Page 68 - 精细化工2019年第9期

·1796· 精细化工 FINE CHEMICALS 第 36 卷

（MIP），可将低含量的有效成分直接从粗提物中筛 磷酸水溶液，B 相乙腈；流速：1.0 mL/min；检测波
选处理，目前已在天然产物的提取分离中有一定的 长：330 nm；进样量：20 μL；采用梯度洗脱，条件
应用 [10-14] 。但在强极性溶液中，由于溶液本身氢键 如表 1 所示。
的干扰，使 MIP 对模板分子的选择识别性降低，应
用受到限制，因此，适合于强极性水环境（包括含 表 1 HPLC 梯度洗脱条件
Table 1 HPLC gradient elution condition table
水的有机相）下的分子识别是一个重要课题。由于
时间/min
金属配位作用在极性溶液中可稳定存在，基于金属
0.00 2.00 10.00 10.01 13.00 13.01 17.00
离子与功能单体、目标分子配位作用的配位印迹聚
流速/（mL/min） 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00
合物可解决上述问题。目前，已有报道在甲醇、四
流动相 A 体积
氢呋喃、乙腈等极性溶液中成功制备了水杨酸、木 分数/% 83 80 78 20 20 83 83
犀草素、芦丁等配位印迹聚合物 [15-18] ，但鲜见在安
流动相 B 体积
全性、极性和经济性更高的水溶液中制备黄酮类化 分数/% 17 20 22 80 80 17 17
合物配位印迹聚合物的报道。
因此，作者在前期于乙醇溶液中成功制备木犀 1.2.2.2 黄酮类化合物含量的测定
2+
草素-Zn 配位印迹聚合物 [19] 的基础上，对在水溶液 取芸香叶苷、木犀草素和芹菜素对照品，以甲
中制备木犀草素配位印迹聚合物的条件及该聚合物 醇为溶剂，配制成混合标准溶液，各对照品质量浓
的吸附性能进行了探讨，以期为木犀草素的分离纯 度均为 80 mg/L，采用外标法，分别精密移取 20 μL
化提供新的方法。 对照品与供试品溶液，按 1.2.2.1 色谱条件进行测定，
绘制黄酮标准品及供试品的 HPLC 图，根据峰面积
1 实验部分 计算各黄酮类化合物的含量。
1.2.3 木犀草素配位印迹聚合物的制备
1.1 试剂与仪器
2+
采用沉淀聚合法，以木犀草素-Zn 为模板分
木犀草素、芹菜素、芸香叶苷，标准品，上海
子，丙烯酰胺（AM）为功能单体，N,N-亚甲基双
阿拉丁生化科技股份有限公司；乙腈，色谱纯，国
丙烯酰胺（MBA）为交联剂，偶氮二异丁腈（AIBN）
药集团化学试剂有限公司；丙烯酰胺，天津市科密
为引发剂，致孔剂为水，制备木犀草素配位印迹聚
欧化学试剂有限公司；N,N-亚甲基双丙烯酰胺，天
合物（LUT-CIPs）。按照表 2 制备 LUT-CIPs。
津市凯通化学试剂有限公司；偶氮二异丁腈，上海

山浦化工有限公司；乙酸锌、乙酸铅，天津市天力 表 2 木犀草素配位印迹聚合物条件因素考察
化学试剂有限公司；无水乙醇、甲醇，天津市凯通 Table 2 Preparation conditions of luteolin-Zn(Ⅱ) complex
化学试剂有限公司；硝酸铋、硝酸镁、硫酸锌、硝 imprinted polymers
酸钡，上海凌峰化学试剂有限公司；硫酸镍、硫酸 n(模板分子)∶
模板分子/ 功能单体/ 交联剂/
锰、硫酸铈、硫酸铜、硫酸镉、乙酸铜、硝酸锌， 样品 n(功能单体)∶ mmol mmol mmol
n(交联剂)
中国（上海）国药试剂有限公司。以上试剂均为分
CIPs1 1∶1∶30 0.1 0.1 3.0
析纯。
CIPs2 1∶2∶30 0.1 0.2 3.0
FTIR-7600 傅里叶变换红外光谱仪，天津港东
CIPs3 1∶3∶30 0.1 0.3 3.0
科技发展有限公司；LC-20AT 型高效液相色谱仪，
CIPs4 1∶4∶30 0.1 0.4 3.0
日本岛津公司；SPE-24 固相萃取装置，上海那艾精
CIPs5 1∶5∶30 0.1 0.5 3.0
密仪器有限公司；RE52CS 旋转蒸发器，上海亚荣
CIPs6 1∶4∶20 0.1 0.4 2.0
生化仪器厂；全自动扫描紫外-可见分光光度计，上 CIPs7 1∶4∶30 0.1 0.4 3.0
海光谱仪器有限公司。 CIPs8 1∶4∶40 0.1 0.4 4.0
1.2 方法 CIPs9 1∶4∶50 0.1 0.4 5.0
1.2.1 紫外法测定木犀草素的含量 CIPs10 1∶4∶60 0.1 0.4 6.0
具体测定方法参见文献[19]。
1.2.2 HPLC 法测定木犀草素及有关黄酮的含量 典型制备 条件如下 ：准确称 取 0.0286 g
1.2.2.1 HPLC 条件 （0.1 mmol）的木犀草素（LUT）、0.0219 g（0.1 mmol）
色谱柱：Inertsil DOS-SP，4.6 mm×250 mm× 的 Zn(Ac) 2 与 0.0284 g（0.4 mmol）的 AM，加入约
5 μm；柱温：40 ℃；流动相：A 相体积分数 0.3% 100 mL 甲醇溶液，超声反应 2 h 后旋转蒸发至溶剂