Page 194 - 《精细化工》2020年第12期

·2556· 精细化工 FINE CHEMICALS 第 37 卷

放实验。首先，将 0.1 g 纳米凝胶分散在 10 mL 超 个装有 40 mL PBS 缓冲液（pH=7.4，10 mmol/L）的
纯水中，并加入 1 mL 指定浓度的 DOX 溶液。将混 玻璃试管中；其中一根试管加入 122.8 mg GSH，另
合物在室温下搅拌过夜，通过 DOX 和纳米凝胶中的 一根不加 GSH 的试管作为对照组。将两个试管置于
羧基之间的静电缔合将药物装载到纳米凝胶上。随 温度为 20 ℃的恒温水浴中并均匀振荡。在指定的
后 ，将混 合物 小心地 转移 到离心 管中 ，并 以 时间间隔从每个试管中收集 2 mL 溶液，并以
12000 r/min 的速度离心 20 min。移去含有未装载 12000 r/min 的速度在高速离心机中离心 20 min。用
DOX 的上清液，小心收集底层物质并将其分散在超 UV-Vis 分光光度计在 480 nm 处测定上清液中 DOX
纯水中，以获得装载有 DOX 的纳米凝胶，表征前将 的浓度。通过建立的 DOX 标准曲线计算出指定时间
其冷冻干燥 48 h。用已知浓度的 DOX 水溶液在 内每个样品的药物释放量。验证温度改变对模型药
480 nm 处的吸光度建立标准曲线。使用 UV-Vis 分 物的触发时，重复上述操作；将实验温度从 20 ℃
光光度计测量上清液在 480 nm 处的吸光度，然后根 更改为 30 和 40 ℃，分别记录载药纳米凝胶在 30
据标准曲线计算游离 DOX 的量，从而获得负载在纳 和 40 ℃的 DOX 释放量，并按下式计算药物累积释
米凝胶上的 DOX 的量。纳米凝胶的载药效率和载药 放效率：
量按下式计算 [18-19] （M 代表质量）： 累积释放效率/%= M ( 物放量药释 )  100
M (ሹူ໾ਈ ) M (Ⴓ৖ူ໾ਈ ) M ( 米凝 量纳 胶 )载药量
载药效率/%=  100
M (ሹူ໾ਈ ) 所有释放实验均进行 3 次并计算出平均值。监测释
载药量/%= 放过程长达 96 h。当进行 pH 响应性测试时，实验温
M (ሹူ໾ਈ ) M (Ⴓ৖ူ໾ਈ ) ×100 度固定在 37 ℃（即正常的生理体温）。除了将 PBS
M (ବ૜ୠࢋਈ ) M (ሹူ໾ਈ ) M (Ⴓ৖ူ໾ਈ ) 缓冲液的 pH 分别调节至 7.4、5.8 和 4.0 外，其他条件
为了验证纳米凝胶的氧化还原和温度响应性， 与上述操作相似。
将还原剂 GSH 用量和实验温度设置为变量，同时将 图 1A 为交联剂合成及纤维素改性的反应路线，
溶液的 pH 固定在 7.4，该值与人体正常组织的 pH 图 1B 为纳米凝胶的合成以及药物的负载与释放
相同。首先，将 100 mg 载药纳米凝胶均匀地放入两 机制。

图 1 纳米凝胶的制备以及药物负载和释放机理示意图
Fig. 1 Schematic diagram of nanogel preparation and drug loaded and release mechanism