Page 114 - 《精细化工》2020年第7期
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·1396· 精细化工 FINE CHEMICALS 第 37 卷
细菌液,涂布均匀,在无菌培养箱中培养 24 h 观察 量分数 0.1%TritonX-100 处理的 RBC 作为阳性对照
菌落生长情况。 的 OD 值。
抗菌率用式(1)计算:
2 结果与讨论
R /% (A B / ) A 100 (1)
式中:R—抗菌率,%,保留 4 位有效数字;A—空 2.1 红外光谱分析
白对照水凝胶试样 24 h 后回收菌数,cfu/片;B— 对 GO、TA、PATG 和 PATGH 进行红外光谱测
PHMG 改性水凝胶试样 24 h 后回收菌数,cfu/片。 试,结果如图 3 所示。
1.4.2.2 琼脂平皿扩散法
参考 GB/T 20944.1—2007 [18] ,采用琼脂平皿扩
散法定性表征 PATGH 凝胶与 PAGH 凝胶的抑菌性能
及其中 PHMG 的非浸出性。测试菌种为革兰氏阳性菌
代表金黄色葡萄球菌(S.aureus,ATCC29213)。将抗
菌水凝胶与已接种的细菌固体培养基充分接触,经
过一段时间培养,与水凝胶中抗菌物质接触部分的细
菌受到了抑制,进而通过观察所接触部分的细菌菌落
数来表征抗菌水凝胶的抗菌性能,这种方法可定性与
定量地表征抗菌水凝胶的抗菌效果,具有科学性 [19] 。
图 3 GO、TA、PATG 和 PATGH 的红外谱图
对于 TA 与 PHMG 是否反应,琼脂平皿扩散法也 Fig. 3 FTIR spectra of GO, TA, PATG and PATGH
同样可以反映出来。未与水凝胶中 TA 反应的 PHMG
–1
因为无法固定在水凝胶中,只是单纯被吸收在凝胶 图 3 中,PATG 凝胶红外谱图中,3200 cm 处
–1
中,所以在该测试中会有很大的抑菌圈出现,在 为 N—H 基团的特征吸收峰,1660 与 1610 cm 处
多次测试后,失去了抗菌性能。而与 PHMG 反应 出现较强的吸收峰归因于酰胺键基团中 C==O 的伸
良好的水凝胶,PHMG 被固定在水凝胶内,无法 缩振动和 N—H 的弯曲振动,这些都是 PAM 的特征
溢出,因此不会形成抑菌圈,在多次实验和反复 吸收峰;与 GO 的红外谱图相比较,在 1720 cm –1
–1
浸泡后,仍然具有很好的抗菌性能,可以达到长效 处的 C==O 伸缩振动、1110 cm 处 C—O 的对称伸
–1
抗菌的效果。 缩振动峰消失,1630 cm 处 C—OH 伸缩振动峰减
在 LB 固体培养基中接种 100 μL 金黄色葡萄球 弱,表示 PATG 凝胶中 GO 因参与反应被大量还原;
4
菌细菌液(S.aureus,5×10 cfu/mL),涂布均匀,恒 TA 的红外谱图中,酚羟基特征吸收峰在 3374 cm –1
–1
温培养 15 min 后,将样品凝胶放在培养皿中,使其 处,C—C 特征吸收峰在 1600 cm 处,但在 PATG
凝胶的红外谱图中,其特征峰大多数与 GO 的特征
与培养皿充分接触,在 37 ℃恒温恒湿的条件下培
养 24 h,观察是否有抑菌圈产生。 峰相重叠;PATG 凝胶中—OH 的伸缩振动峰由
–1
–1
1.4.3 生物相容性测试 3374 cm 偏移至 3395 cm 处,说明 TA 分子中酚羟
通过红细胞(RBC)的溶血实验来探究 PATGH 基与 GO 发生了反应。与 PATG 凝胶相比,PATGH
凝胶的生物相容性 [20] 。RBC 溶血实验原理:RBC 在 凝胶的红外谱图中,在 1625 与 1645 cm –1 处出现
溶血剂作用下会破裂,通过酶标仪测定释放出来的 C==N 的伸缩振动峰,说明 PATGH 中存在 PHMG。
血红蛋白的吸收值来判定 RBC 破裂的情况,进一步 2.2 力学性能测试
确定材料的溶血率,从而评价材料的生物相容性 [21] 。 PTG、PTG 0.5 、PATG 和 PATG 0.5 的力学性能测
对于具有良好的生物相容性的物质一般定义为其 试如图 4 所示。
RBC 溶血率低于 20%。
通过酶标仪测定样品在 576 nm 的 OD 值,用式
(2)计算其溶血率。
OD OD
溶血率/ % 1 sample negative 100 (2)
OD OD
positive negative
式中:OD sample —样品的 OD 值;OD negative —用未处
理的 RBC 作为阴性对照的 OD 值;OD positive —用质