Page 114 - 《精细化工》2020年第7期
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·1396·                            精细化工   FINE CHEMICALS                                 第 37 卷

            细菌液,涂布均匀,在无菌培养箱中培养 24 h 观察                         量分数 0.1%TritonX-100 处理的 RBC 作为阳性对照
            菌落生长情况。                                            的 OD 值。
                 抗菌率用式(1)计算:
                                                               2    结果与讨论
                         R /%   (A B  / ) A  100    (1)
            式中:R—抗菌率,%,保留 4 位有效数字;A—空                          2.1    红外光谱分析
            白对照水凝胶试样 24 h 后回收菌数,cfu/片;B—                           对 GO、TA、PATG 和 PATGH 进行红外光谱测
            PHMG 改性水凝胶试样 24 h 后回收菌数,cfu/片。                     试,结果如图 3 所示。
            1.4.2.2   琼脂平皿扩散法
                 参考 GB/T 20944.1—2007  [18] ,采用琼脂平皿扩
            散法定性表征 PATGH 凝胶与 PAGH 凝胶的抑菌性能
            及其中 PHMG 的非浸出性。测试菌种为革兰氏阳性菌
            代表金黄色葡萄球菌(S.aureus,ATCC29213)。将抗
            菌水凝胶与已接种的细菌固体培养基充分接触,经
            过一段时间培养,与水凝胶中抗菌物质接触部分的细
            菌受到了抑制,进而通过观察所接触部分的细菌菌落
            数来表征抗菌水凝胶的抗菌性能,这种方法可定性与

            定量地表征抗菌水凝胶的抗菌效果,具有科学性                     [19] 。
                                                                   图 3  GO、TA、PATG 和 PATGH 的红外谱图
                 对于 TA 与 PHMG 是否反应,琼脂平皿扩散法也                       Fig. 3    FTIR spectra of GO, TA, PATG and PATGH
            同样可以反映出来。未与水凝胶中 TA 反应的 PHMG
                                                                                                         –1
            因为无法固定在水凝胶中,只是单纯被吸收在凝胶                                 图 3 中,PATG 凝胶红外谱图中,3200 cm 处
                                                                                                         –1
            中,所以在该测试中会有很大的抑菌圈出现,在                              为 N—H 基团的特征吸收峰,1660 与 1610 cm 处
            多次测试后,失去了抗菌性能。而与 PHMG 反应                           出现较强的吸收峰归因于酰胺键基团中 C==O 的伸
            良好的水凝胶,PHMG 被固定在水凝胶内,无法                            缩振动和 N—H 的弯曲振动,这些都是 PAM 的特征
            溢出,因此不会形成抑菌圈,在多次实验和反复                              吸收峰;与 GO 的红外谱图相比较,在 1720 cm                 –1
                                                                                           –1
            浸泡后,仍然具有很好的抗菌性能,可以达到长效                             处的 C==O 伸缩振动、1110 cm 处 C—O 的对称伸
                                                                                     –1
            抗菌的效果。                                             缩振动峰消失,1630 cm 处 C—OH 伸缩振动峰减
                 在 LB 固体培养基中接种 100 μL 金黄色葡萄球                   弱,表示 PATG 凝胶中 GO 因参与反应被大量还原;
                                    4
            菌细菌液(S.aureus,5×10 cfu/mL),涂布均匀,恒                  TA 的红外谱图中,酚羟基特征吸收峰在 3374 cm                 –1
                                                                                             –1
            温培养 15 min 后,将样品凝胶放在培养皿中,使其                        处,C—C 特征吸收峰在 1600 cm 处,但在 PATG
                                                               凝胶的红外谱图中,其特征峰大多数与 GO 的特征
            与培养皿充分接触,在 37  ℃恒温恒湿的条件下培
            养 24 h,观察是否有抑菌圈产生。                                 峰相重叠;PATG 凝胶中—OH 的伸缩振动峰由
                                                                      –1
                                                                                      –1
            1.4.3   生物相容性测试                                    3374 cm 偏移至 3395 cm 处,说明 TA 分子中酚羟
                 通过红细胞(RBC)的溶血实验来探究 PATGH                      基与 GO 发生了反应。与 PATG 凝胶相比,PATGH
            凝胶的生物相容性         [20] 。RBC 溶血实验原理:RBC 在            凝胶的红外谱图中,在 1625 与 1645 cm            –1  处出现
            溶血剂作用下会破裂,通过酶标仪测定释放出来的                             C==N 的伸缩振动峰,说明 PATGH 中存在 PHMG。
            血红蛋白的吸收值来判定 RBC 破裂的情况,进一步                          2.2   力学性能测试
            确定材料的溶血率,从而评价材料的生物相容性                      [21] 。      PTG、PTG 0.5 、PATG 和 PATG 0.5 的力学性能测
            对于具有良好的生物相容性的物质一般定义为其                              试如图 4 所示。

            RBC 溶血率低于 20%。
                 通过酶标仪测定样品在 576 nm 的 OD 值,用式
            (2)计算其溶血率。
                              OD       OD     
                溶血率/   %   1   sample   negative     100 (2)
                              OD       OD     
                                 positive  negative 
            式中:OD sample —样品的 OD 值;OD negative —用未处
            理的 RBC 作为阴性对照的 OD 值;OD positive —用质
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