Page 189 - 《精细化工》2020年第2期
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第 2 期                 张泽玺,等:  电-生物耦合技术降解中药提取废水及微生物群落分析                                   ·391·


            中药提取废水具有较强的抗冲击负荷能力。10 V 下                          Chao 指数与微生物群落丰度呈正相关关系,A 的
            HRT 为 24 h 动态实验的 COD 去除率为 82.83%±                  Chao 指数大于 B,说明阴极板附近生物膜细菌群落
            1.76%,同样电压下静态实验较动态实验 COD 去除                        更加丰富。Shannon 和 Simpson 指数是生态学上用
            率提高 16.14%,有机物与微生物接触更加充分可能                         于表征微生物群落多样性的指数,Shannon 指数越
            是 COD 去除率提高的主要原因。实际工程应用多采                          高,群落多样性越高         [31] ,Simpson 指数越小,菌落
            用动态进水模式,考虑建设成本,确定 HRT 为 24 h                       越复杂,A 的群落多样性高于 B,这在 Simpson 指
            适宜。                                                数中也得到证明。Coverge 为测序深度指数,代表样
            2.3    高通量测序结果分析                                   品文库覆盖率,数值越高,则样品中序列被测出的
            2.3.1   微生物群落多样性                                   概率越高,反映测试结果是否代表样品微生物的真
                 经 PCR 和高通量测序后,2 个生物膜样品(A、                     实情况。A、B 样品的 Coverge 指数均大于 0.99,反
            B)的有效序列数分别为 54895 和 40190,在 97%的                   映了样品微生物的真实情况。
            相似度水平上对有效序列归类 OTU,A、B  样品的
            OTU 数量分别为 1061 和 452,A 样品 OTU 数量较
            高,代表着 A 样品具有较多的微生物种类。本研究
            共获得阴阳极板附近细菌群落 29 门、54 纲、119 目、
            219 科、413 属。
                 A 和 B 样品 Good's coverage 指数均大于 99%,
            说明测序获取了绝大多数样本信息。通过绘制 OTU
            稀释曲线(图 4),在 97%相似性水平上发现 A、B
            样品在序列数分别大于 50000 和 30000 后趋于平坦,
            基本达到饱和,说明测序能够反映阴阳极板附近微

            生物群落的多样性。A、B 样品的丰富度和多样性指                                         图 4  OTU 稀释曲线
            数见表 1。Chao 指数能衡量微生物群落的丰度                  [30] ,            Fig. 4    Rarefaction curves of OTU

                                   表 1   阴阳极板附近生物膜的 16S rRNA 序列、丰富度及多样性
                       Table 1    16S rRNA sequence, abundance and diversity of biofilms near cathode and anode plates
              样品      序列数     OUT 数量      门       纲      目       科      属     Chao   Shannon  Simpson  Coverge
               A      54895     1061      29      54     116    216     403   1185    4.91    0.0281  0.99665
               B      40190      452      21      29     57     106     209    567    2.92    0.1581  0.99701

            2.3.2   阴阳极板附近微生物群落结构变化                                主要菌落构成有变形菌门(Proteobacteria)、拟
                 阴阳极板附近生物膜在门水平上的细菌群落堆                          杆菌门(Bacteroidetes)、厚壁菌门(Firmicutes)、
            积柱状图如图 5 所示。                                       绿弯菌门(Chloroflexi)和 Epsilonbacteraeota,5 个
                                                               菌门在 A、B 样品中的相对丰度分别达到 94.82%和
                                                               99.53%。变形菌门和拟杆菌门在 A、B 样品中相对
                                                               丰度分别达到 50.28%、32.87%和 72.19%、9.58%,
                                                               厚壁菌门在 A、B 样品中相对丰度分别为 9.19%和
                                                               4.20%。
                                                                   根据图 5 可知,阴阳两极板附近生物膜在门水
                                                               平上相对丰度存在差异。厚壁菌门、绿弯菌门和拟
                                                               杆菌门在反应器中相对丰度高低为 A>B;变形菌门
                                                               在反应器中相对丰度高低为 A<B;Epsilonbacteraeota
                                                               在 B 样品中相对丰度达到 13.43%,而在 A 样品中
                                                               相对丰度仅为 0.22%。

                                                                   对门水平上相对丰度占比最高的变形菌门在纲
                   图 5   样品中门水平细菌群落结构及分布
            Fig. 5    Bacterial community  structure and distribution of   水平上的分布特征进一步分析。A、B 样品中变形菌
                   the samples at phylum level                 门的组成主要有 4 个纲(图 6),分别为 α-变形菌纲
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