Page 212 - 《精细化工》2023年第5期

·1132· 精细化工 FINE CHEMICALS 第 40 卷

去离子水配成角蛋白溶液，用质量浓度为 5 g/L 碳 入浓缩胶胶液至填满样板，迅速插入梳子，室温静
酸钠水溶液调节溶液 pH 约为 9；再分别加入葡萄糖、 置 2 h 后得到电泳胶。将测试样品煮沸 10 min 后在
木糖、半乳糖各 30 mmol（糖浓度 0.3 mol/L）配成 150 V 电压下跑胶，结束后，用考马斯亮蓝溶液对
反应液，另设不加还原糖的角蛋白溶液为对照组。 电泳胶染色；另用相同方法制备电泳胶，然后用
将反应液放入 90 ℃水浴锅中振荡反应一定时间后 Schiff 试剂对糖蛋白染色。
用于吸光度测试（0、1、3 和 5 h）及电泳测试（5 h）。 1.3.2 吸光值（OD）测试
1.2.3 羊毛织物原位染色 用紫外分光光度计测试羊毛角蛋白与还原糖
剪取 3 份羊毛织物各 1 g，分别放入 100 mL （半乳糖、木糖和葡萄糖）反应 0、0.5、1.0 及 2.0 h 时
0.01 mol/L 磷酸缓冲液中（pH=9，即浴比为 1∶100）， 间点的反应液在波长 540 nm 处的吸光值，记为 OD 540 。
加入 3 mmol 还原糖（糖浓度为 0.03 mol/L），于 90 ℃ 1.3.3 还原糖质量浓度测试
水浴中进行反应，分别在反应第 1、3 和 5 h 时测定 用 DNS 法 [14] 测定还原糖的质量浓度。先取 1 mL
羊毛织物的 K/S 值、LabCH 值及反应液中还原糖的 待测液，加去离子水稀释至 25 mL（使糖浓度为
质量浓度。 1~5 mmol/L）。取稀释后的溶液 1 mL，加入 2 mL
1.2.4 温度和 pH 对羊毛织物原位染色的影响 DNS 试剂（182 g 酒石酸钾钠、6.3 g 二硝基水杨酸、
考察 pH 对羊毛织物染色性能的影响时，保持 262 mL 2 mol/L 的氢氧化钠溶液、5 g 苯酚和 5 g 亚
磷酸缓冲液浓度不变，调节其 pH 为 6、7 和 9，反 硫酸钠溶解后用去离子水定容至 1 L），沸煮 2 min，
应温度为 80 ℃，采用葡萄糖染色 5 h，其他工艺条 冷却后加入去离子水补足溶液至 25 mL，测定溶液
件与 1.2.3 节一致。 在 540 nm 处的吸光值，代入所测得的标准曲线（以
考察温度对羊毛织物染色性能的影响时，设置 5 mmol/L 葡萄糖溶液为标准液）：
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温度分别为 70、80 及 90 ℃，采用葡萄糖染色 5 h， A=–0.0331+0.0660c 1 (R =0.9987) （1）
其他工艺条件与 1.2.3 节一致。 其中：A 为吸光度；c 1 为测试液糖浓度，mmol/L。
1.2.5 羊毛织物的预处理 还原糖质量浓度（ρ 2 ，g/L）按下式计算：
过氧化氢预处理：配制 1 L 过氧化氢溶液（将 ρ 2 =25×c 1 ×M/1000 （2）
25 mL 质量分数为 30%的过氧化氢用去离子水定容 其中：M 为还原糖摩尔质量，g/mol；25 为测试液
至 1 L），加入 4 g 焦磷酸钠，此时溶液 pH 约为 9， 的稀释倍数。
将 20 g 羊毛织物完全浸入溶液中，于 80 ℃水浴振荡 1.3.4 LabCH 值及 K/S 值测试
反应 70 min 后，去离子水清洗后 60 ℃烘干，下同。 用高精度分光测色仪测试羊毛织物 LabCH 值
巯基乙醇预处理：用去离子水配制质量分数为 和 K/S 值（色深），设置测试条件为 D65 光源，10°
0.5%的巯基乙醇溶液 1 L，将 20 g 羊毛织物完全浸 视角。每个样品随机取 3 个点测试，取平均值。
入溶液中，30 ℃水浴反应 1 h 后洗净烘干。 1.3.5 匀染性测试
Savinase 16L 蛋白酶预处理：取 0.4 g Savinase 随机选取羊毛织物上的 8 个点，测试其 K/S 值，
16L 蛋白酶加去离子水稀释定容，配成 1 L 酶溶液， 并计算其标准差。
将 20 g 羊毛织物完全浸入溶液中，于 50 ℃水浴反应 1.3.6 耐皂洗色牢度测试
20 min 后，再在 80 ℃水浴中反应 40 min，洗净烘干。 参照 GB/T 3921—2008《纺织品色牢度耐皂洗
去离子水对照组：用去离子水浸泡羊毛织物 1 h 色牢度》对样品进行测试。衬布选择棉布及羊毛，
后烘干。 40 ℃下皂洗。参考 GB/T 250—2008《评定变色用
1.3 性能测试 灰色样卡》评定样品的变色牢度。参考 GB/T 251—
1.3.1 SDS-PAGE 测试 2008《评定沾色用灰色样卡》评定样品的沾色牢度。
参考 HE 等 [13] 方法配制测试样品：取羊毛角蛋 1.3.7 耐刷洗色牢度测试
白与木糖、葡萄糖、半乳糖反应后的溶液各 30 µL， 参照 GB/T 420—2009《纺织品色牢度耐刷洗色
将反应液与 4×上样缓冲液按体积比为 3∶1 混合。 牢度》对样品进行测试。设置刷洗次数为 100 次。
配制分离胶（3 mL Resolver A、3 mL Resolver B、 1.3.8 耐干/湿摩擦色牢度测试
30 μL 质量分数 10%的过硫酸铵溶液、3 µL 四甲基 参照 GB/T 3920—2008《纺织品色牢度耐摩擦
乙二胺）和浓缩胶（1 mL Stacker A、1 mL Stacker B、 色牢度》对样品进行测试。设置摩擦次数为 100 次。
10 µL 质量分数 10%的过硫酸铵溶液、2 µL 四甲基 1.3.9 耐人造光色牢度测试
乙二胺），将分离胶胶液注入电泳胶样板直至液面 参照 GB/T 8427—2008《纺织品色牢度耐人造光
距短板下方 1.5 cm 处，加水液封待其凝固后，再注 色牢度：氙弧》对样品进行测试。设置曝晒时长为 10 h。