Page 173 - 《精细化工》2023年第6期
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第 6 期                  赵灵芝,等:  基于 Fe(Ⅲ)和邻苯二胺显色反应快速检测硫化物                                 ·1323·


            2.4   干扰实验                                         150 μmol/L 范围内呈线性关系,线性方程为 y=
                                  3+
                                                                             2
                 为了检验构建的 Fe -OPD 显色体系的抗干扰                      88.72–0.5057x   (R  =0.984),检出限为 0.1 μmol/L。
                      3+
            性能,向 Fe -OPD 显色体系加入不同浓度的 L-Cys,
            其紫外-可见吸收光谱和混合液颜色变化情况见图
            7。从图 7 可知,L-Cys  浓度达到 50 μmol/L 以上才
            会引起显色体系吸光度略微下降,而混合液颜色几
            乎未发生褪色。其他硫醇(GSH、Homo、GSSG、
            DTT、半胱胺),常见还原性物质(尿酸、邻苯二
                                                 –
                                          2–
                                     –
                                                        –
                                 –
            酚)和常见阴离子(Cl 、F 、SO 4 、NO 3 、HSO 3 、
                            –
                     2–
                                          –
               2–
                                  2–
                                                    3+
            SO 3 、CO 3 、HCO 3 、HPO 4 、H 2 PO 4 )中加入 Fe -OPD
            显色液,体系颜色也几乎不发生变化。各物质加入
              3+
            Fe -OPD 显色体系后的结果表明,GSH、L-Cys、
            DTT、半胱胺、Homo 等浓度达到 50 μmol/L 以上,
                                                    3+
            尿酸、邻苯二酚浓度达到 100 μmol/L 以上,Fe -OPD
            显色体系 450 nm  处的吸光度才发生明显的下降,
            说明浓度在 50  μmol/L 以下的上述物质均不干扰
            NaHS 的检测。常见阴离子浓度高达 100  μmol/L 也
                       3+
            不能引起 Fe -OPD 显色体系吸光度下降,说明这些
            阴离子不干扰 NaHS 的检测。



                                                               注:NaHS 浓度从上到下依次为 0、1、3、5、7、10、20、30、
                                                                                                  3+
                                                               50、75、100、150、200、300 μmol/L;插图为 Fe -OPD 显色体
                                                               系与不同浓度的 NaHS 混合后的溶液颜色(a,浓度从左到右依
                                                               次为 0、5、10、20、30、50、100、200、300  μmol/L)和荧光
                                                               光谱(b,浓度从左到右依次为 0、1、3、5、7、10、20、30、
                                                               50、75、100、150、200、300 μmol/L)
                                                                      3+
                                                               图 8  Fe -OPD 显色体系中加入不同浓度的 NaHS 溶液
                                                                    的紫外-可见吸收光谱图(a)和荧光光谱(b)
                                                               Fig. 8    UV-Vis absorption spectra (a) and fluorescence
                                                                      spectra (b) of Fe -OPD chromogenic system in
                                                                                    3+

            注:L-Cys 浓度(从上到下,插图从左到右)依次是 0、50、100、                      the presence of NaHS with different concentrations
            300、500 μmol/L
                                                                             3+
                    3+
            图 7  Fe -OPD 显色体系加入不同浓度 L-Cys 反应后的                     图 9a 为 Fe -OPD 显色体系在纸芯片上检测不
                 UV-Vis 吸收光谱和溶液颜色(插图)                          同浓度 NaHS 的比色法检测结果。由图 9a 可知,在
            Fig. 7    UV-Vis absorption  spectra and  solution color     最佳的实验条件下(Fe 和 OPD 加样体积 10  μL,
                                                                                   3+
                              3+
                    (inset) of Fe -OPD chromogenic system in the
                    presence of L-Cys with different concentrations   分析物 NaHS 体积 12 μL,反应时间 5 min,反应底
                                                               液为 20 mmol /L pH 4.0 NaAc-HAc 缓冲液),在纸
                   3+
            2.5  Fe -OPD 显色体系用于比色检测 NaHS                       芯片上滴加不同浓度的 NaHS 溶液后,纸芯片颜色
                            3+
                 图 8a 为 Fe -OPD 显色液在加入不同浓度的                    随 NaHS 浓度升高逐渐变浅。RGB 中蓝色分析色道
            NaHS 溶液后的紫外-可见吸收光谱。从图 8a 可看出,                      值(B 值)随 NaHS 浓度变化的关系如图 9b 所示。
            随着 NaHS 浓度上升,混合液颜色逐渐褪去,450 nm                      由图 9b 可知, 纸芯片颜 色与 NaHS 浓度 在
            处吸光度逐渐下降。吸光度与 NaHS 的浓度在 10~                        20~150 μmol/L 范围内呈线性关系,线性回归方程为
                                                                                 2
            200 μmol/L 范围内呈 线性关系 ,线性方 程为                       y =0.8058x+29.725(R  =0.9929,n=3)。将 NaHS 标
                               2
            y=0.6783–0.00299x (R =0.987),检出限为 0.3 μmol/L。      准溶液稀释,在纸芯片上按上述方法进行显色反应,
                       3+
            图 8b 为 Fe -OPD 显色液在加入不同浓度的 NaHS                    当颜色差异裸眼可区别,即 B 值大于空白值(10)
            溶液后的荧光谱图。由图 8b 可知,在 412 nm 光激                      时为检出限,NaHS 的检出限为 2 μmol/L。这说明
                       3+
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            发下,向 Fe -OPD 显色体系加入 NaHS 后,荧光强                     可基于 Fe -OPD 显色体系在纸芯片上对 NaHS 进行
            度逐渐降低,荧光强度与 NaHS 的 浓度在 5~                          快速的定量检测。
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