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第 7 期 蓝虹云，等: ω-氯甲基长叶烯的合成及其抑菌活性 ·1257·

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为 1000 mg/L 的Ⅰc 溶液，即为Ⅰc 母液。同法配制 外光谱图中，3200 cm 处—OH 的特征峰消失，在
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Ⅰb、Ⅰ、酮康唑和硫酸卡那霉素的母液。 3037 cm 处出现新的特征吸收峰，归属于长叶烯基
1.3.3 菌悬液的配制 烯丙基氯类化合物中烯氢（==C—H）的特征吸收峰，
取适量金黄色葡萄球菌菌种加入到 10 mL 小烧 表明原料经系列反应后生成了目标产物Ⅰc。
杯中，用无菌水稀释调配成 0.5 麦氏比浊标准的菌
悬液，取该菌悬液 50 μL，用相应的无菌培养基稀
释 1000 倍，配成金黄色葡萄球菌初始菌悬液。同法，
配制肺炎克雷伯氏菌和白色念珠菌的初始菌悬液。
1.3.4 抑菌活性评价方法
用 96 孔板微量二倍稀释法 [17-18] 测定样品的最
低抑菌质量浓度（MIC）：向 96 孔平板的 2~11 号孔
中分别加入 100 μL 含体积分数 2% DMSO 的无菌培
养基溶液，往 1 号孔和 2 号孔中加入 100 μL 事先配
制好的母液。从 2 号孔中取 100 μL 样品溶液到第 3
个孔中，从 3 号孔取 100 μL 样品溶液到 4 号孔，依
图 1 化合物Ⅰ、Ⅰa、Ⅰb 和Ⅰc 的红外吸收光谱图
次类推进行梯度稀释操作，使 1~12 孔的样品溶液质 Fig. 1 FTIR spectra of compounds Ⅰ, Ⅰa, Ⅰb and Ⅰc
量浓度分别稀释至 1000、500、250、125、62.5、31.25、
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15.625、7.8125、3.9063、1.9531、0.9766、0.4833 mg/L， Ⅰc 核磁氢谱如下，HNMR (600 MHz，CDCl 3 )，
再分别向各孔中加入初始菌悬液 100 μL，最终使 δ：5.167～5.179 (1H, t,H-13), 4.120~4.134 (2H, dd,
1~12 孔的样品溶液质量浓度分别为 500、250、125、 J=12、7.2Hz, H-14), 2.927~2.934 (1H, d, J=4.2Hz,
62.5、31.25、15.625、7.8125、3.9063、1.9531、0.9766、 H-1), 2.077~2.082 (1H,d, J=3Hz, H-2eq,eq 代表平伏
0.4833 和 0.2417 mg/L；另将 100 μL 含体积分数为 键), 1.703~1.755 (1H, m, H-3eq), 1.581~ 1.682 (3H,
m,H-6eq, H-4a, H-8a), 1.478~1.552 (2H, m, H-6ax,
2% DMSO 的无菌培养基溶液与 100 μL 初始菌悬液
H-2ax，ax 代表直立键), 1.389~1.458 (3H, m, H-3ax,
混合，配制成空白对照组。将金黄色葡萄球菌和肺
H-5eq , H-7eq), 1.009~1.086 (2H, m, H-5ax, H-7ax),
炎克雷伯氏菌在 37 ℃下培养 24 h，而白色念珠菌在 1.005 (3H, s, H-10), 0.972 (3H , s, H-11), 0.880 (3H, s,
30 ℃下培养 24 h，比较测试组与空白对照组浑浊度 H-12)。 HNMR 数据显示，ω-氯甲基长叶烯有 25 个
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的差异，以不产生浑浊的最低质量浓度作为该样品 氢原子，其中，碳碳双键上氢原子的吸收峰出现在
对测试菌的最低抑菌质量浓度，每个样品对每种测 低场，且受邻近亚甲基氢原子的影响，呈现三重峰，
试菌做 3 个平行实验，测试结果取平均值。 而亚甲基氢原子受碳碳双键上氢原子的影响，则呈
同法，在 96 孔板中注入阳性对照品溶液，细菌 现双三重峰。
以硫酸卡那霉素为阳性对照，真菌以酮康唑为阳性 Ⅰc 核磁碳谱如下， CNMR (150MHz，CDCl 3 )，
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对照，进行对照实验。 δ：20.694 (C 10 ), 25.295 (C 6 ), 28.912 (C 3 ), 29.990 (C 4 ),
30.061 (C 11 ), 30.987 (C 12 ), 33.490 (C 8 ), 36.716 (C 2 ),
2 结果与讨论 42.386 (C 7 ), 43.302 (C 5 ), 44.616 (C 14 ), 44.946(C 1 ),
48.722 (C 4a ), 62.360 (C 8a ), 106.432 (C 13 ), 168.671
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2.1 化学组成及波谱结构分析 (C 9 )。 CNMR 数据表明，Ⅰc 有 16 个碳原子。其
ω-氯甲基长叶烯（Ⅰc）、长叶烯（Ⅰ）、ω-乙酰 中，碳碳双键两个碳原子的吸收峰出现在低场，化
氧甲基长叶烯（Ⅰa）和 ω-羟甲基长叶烯（Ⅰb）的 学位移大于 100，而因受邻近碳碳双键和氯原子的
红外吸收光谱见图 1。由图 1 可看出，4 种化合物均 共同影响，氯甲基碳原子的化学位移（δ44.616）较
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在 2954、2864 cm 处出现甲基或亚甲基的 C—H 伸 甲基和亚甲基的大。
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缩振动吸收峰，在 1680 cm 处出现环外 C==C 特征 化合物Ⅰc 属于烯丙基氯类化合物，在电喷雾
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吸收峰。Ⅰa 含有酯基，在 1739 cm 处出现酯羰基 离子源质谱(ESI-MS)下，易发生烯丙基裂解，生成
伸缩振动吸收峰，与其他 3 种化合物相比，其红外 烯丙基正离子，在高分辨率质谱图中出现强的
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+
光谱特征吸收峰明显增强；Ⅰb 在约 3200 cm 处出 [M-Cl] 离子峰，该离子峰的化学式为[C 16 H 25 ] ，质
现新的宽吸收峰，归属于—OH 的特征吸收峰，同 荷比实验值（217.1950）与计算值(217.1956)基本一
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时，1739 cm 处的特征吸收峰消失，表明长叶烯基 致，即化合物Ⅰc 的化学式为 C 16 H 25 Cl，不饱和度为
烯丙基酯类化合物Ⅰa 已转化为Ⅰb；而在Ⅰc 的红 4，与理论值相符。