Page 108 - 201905
P. 108

·876·                             精细化工   FINE CHEMICALS                                  第 36 卷

            多糖的工艺相关报道较少。超高压提取技术属于非                             溶液混匀，置于 40  ℃水浴锅保温 30  min，后放于
            热技术，具有升压速度快、萃取温度低、萃取时间                             冰水浴中 5  min，用紫外-可见分光光度计全量程扫
            短、萃取效率高，不会破坏热敏性活性物质等优点，                            描，吸光度最大吸收波长为 491 nm。
            是最有前景的植物活性成分萃取方式                  [19-20] 。        1.2.3    葡萄糖标准曲线绘制及提取率的计算
                 本文采用超高压技术提取黄精多糖，利用单因                              准确吸取质量浓度为 0、12.5、25.0、37.5、
            素和响应面法对超高压提取黄精多糖工艺进行了优                             50.0 mg/L 的标准葡萄糖溶液 2 mL 于具塞管中，进
            化，与传统工艺进行了比较，并对黄精多糖的抗氧                             行显色反应，在 491 nm 处测吸光度 y,重复测量 3 次。
            化性开展了实验研究，以便为黄精多糖在食品药品                             以 y 为纵坐标，标准葡萄糖溶液的质量浓度 x 为横
            工业的综合开发利用提供理论指导和数据依据，为                             坐标，进行线性回归拟合，绘制标准曲线，标准曲
                                                                                            2
            中药现代化技术提出新的发展方向。                                   线方程为 y=0.01603x+0.10699 (R =0.99)。
                                                                   准确称取醇沉得到的黄精多糖 0.1 g，配得一定
            1   实验部分                                           浓度的多糖溶液，稀释到一定倍数后，进行显色反

                                                               应测得吸光度，根据式（1）和式（2）计算黄精多
            1.1    材料、试剂与仪器
                                                               糖的提取率：
                 黄精药材根茎由大连奇运生大药房提供，产地
            湖北，经大连理工大学分析中心鉴定为多花黄精；                                        质量分数/    %   V     100    （1）
                                                                                        0.1
            去离子水，实验室自制；自密封袋（12 丝），上海                                              W 多糖质量分数
            阿拉丁生化科技股份有限公司；无水乙醇、苯酚、浓                                多糖提取率     / %    2    W          1   0  0    （2）
                                                                                          1
            硫酸、无水葡萄糖，AR，天津大茂化学试剂有限公司；
                                                               式中：V 为待测样品的体积，L；ρ为多糖溶液的质
            DPPH 自由基，南京奥多福尼生物科技有限公司。
                                                               量浓度，kg/L；W 1 为原料的质量，g；W 2 为醇沉获
                 UHPF-750  MPa 超高压设备，包头科发高压科
                                                               得的黄精多糖的质量，g。
            技有限公司；标准筛（10、20、30、40、50、80 目），
                                                               1.2.4    单因素实验
            安平县未名丝网制品有限公司；JP-300B-6 高效多功                           在超高压提取黄精多糖工艺研究过程中，首先
            能粉碎机，永康市久品工贸有限公司；UV-1800 紫
                                                               考察了单个因素对多糖提取率的影响规律。考察工
            外-可见分光光度计，日本 Shimadzon 公司。
                                                               艺参数及范围有：提取剂乙醇体积分数为 0、10%、
            1.2   方法
                                                               30%、50%以及 70%；原料粒径 10~20 目、20~30
            1.2.1    超高压提取黄精多糖流程
                                                               目、30~40 目、40~50 目以及 80 目；固液比为 1∶5、
                 超高压提取黄精多糖的工艺如下所示。将干燥
                                                               1∶10、1∶15、1∶20、1∶30（g/mL）；保压时间 1、
            至恒重的黄精粉碎，并对粉碎的颗粒进行筛分。称
                                                               5、10、15、20  min；操作压力为 100、150、200、
            取 5.0 g 40 目黄精与 85 mL 去离子水混合均匀后，
                                                               250、300 MPa；提取温度为常温。
            真空密封后将其置于常温的超高压设备中，加压至
                                                               1.2.5    响应面实验
            255 MPa 并保持 9.5 min，泄压，取出样品。将密封
                                                                   为进一步确定超高压提取黄精多糖的最佳条
            袋中的混合液减压抽滤，并将滤液置于旋转蒸发器
                                                               件，在单因素基础上，利用 Design-Expert 10 进行响
            中浓缩，取出浓缩液加入无水乙醇，使乙醇的体积
                                                               应面实验设计，采用 Box-Behnken 设计方法，以多
            分数达到 80%以上，置于冰箱过夜醇沉，将醇沉物
                                                               糖提取率为响应值，并对实验结果进行回归和优化。
            离心、45  ℃下干燥，得黄精多糖，产率为 25.01%。                      1.2.6    传统工艺提取黄精多糖
            制备流程图如下所示。                                             采用传统的煎煮法进行对比实验               [21] 。原料粒径、

                                                               固液比和提取剂与超高压提取方式工艺参数相同。
                                                               其他工艺参数为提取温度 100 ℃、提取时间 90 min、
                                                               磁力搅拌，提取过程中不断补充水，以保证固液比
                                                               保持不变，计算黄精多糖的提取率。
                                                               1.2.7    黄精多糖清除 DPPH 自由基能力的测定
                                                                   清除 DPPH 自由基实验过程参考相关文献              [22-24] 。分

            1.2.2    显色反应                                      别量取一定浓度的黄精多糖溶液 3  mL 以及去离子
                 精密量取配制好的 25  mg/L 葡萄糖溶液、黄精                    水 3 mL 置于具塞管中，加入现用现配的 0.2 mmol/L
            多糖溶液 2 mL 于具塞管中，并加入 1 mL 质量分数                      的 DPPH-乙醇溶液，混合均匀后，置于 37 ℃避光的
            为 5%的苯酚溶液，然后沿着液面滴加 5 mL 浓硫酸                        水浴锅中，反应 30  min 后，迅速利用紫外-可见分
   103   104   105   106   107   108   109   110   111   112   113