Page 108 - 《精细化工》2020年第4期

·742· 精细化工 FINE CHEMICALS 第 37 卷

optimal purification conditions, respectively. The enlarged process of the optimal purification conditions
had stable efficiency and good effect. GYP-1 at different concentrations had a significantly inhibitory
activity on the oxidation of LDL and the inhibitory effect presented a good dose-effect relationship. The
inhibition effect of GYP-2 at the same concentration on the generation of conjugated dienes (CD) and
malondialdehyde (MDA) was significantly stronger than that of GYP-1 (P<0.01). In addition, the effects of
GYP-2 on retarding spectral red shift, inhibiting changes of LDL appearance colors and microstructures
during oxidation were also stronger than those of GYP-1.
Key words: gardenia yellow pigment; low density lipoprotein; oxidative modification; macroporous resin;
purification; biological engineering

低密度脂蛋白含有大量不饱和脂肪（Polyunsaturated 恩吸附材料科技有限公司；XAD-7HP，北京慧恩易
fatty acids，PUFAs），在体内易被氧化成氧化型低密 科技有限责任公司；LS-300、LS-300B，陕西蓝深
度脂蛋白 （ Oxidative low density lipoprotein ， ox- 特种树脂有限公司。
LDL）、经一系列生理反应后可导致动脉粥样硬化 肝 素钠（ 185 U/mg ）、乙 二胺四 乙酸 二钠
（Atherosclerosis，AS） [1-2] 。 （EDTA-2Na）、2-硫代巴比妥酸（TBA）、2,6-二叔
栀子（Gardenia jasminoides Ellis）为茜草科栀 丁基对甲酚（BHT）、藏花素-1、栀子苷、绿原酸标
子属植物的干燥成熟果实，主产于江西、湖南、福 准品，上海阿拉丁试剂有限公司；牛血清白蛋白
建等省，是卫生部颁布的首批药食两用资源 [3-4] 。栀 （BSA），国药集团化学试剂公司；其他试剂均为国
子黄色素（GYP）是从栀子果实中提取的水溶性天 产分析纯。
然色素，其主要成分藏花素和藏花酸具有抗氧化、 TU-1901 双光束紫外-可见分光光度计，北京谱
抗炎、抗癌、保肝、抑制动脉粥样硬化、保护神经 析通用仪器有限责任公司；Spectra Max 190 酶标仪，
[5]
等作用 。预计在 2020 年国内外 GYP 市场需求量 美国分子仪器有限公司；PB-10 pH 计，德国 Sartorius
[6]
高达 1500 t 左右 。相关研究表明，栀子水提物及 仪器设备有限公司；RE-52 型旋转蒸发仪，上海亚
其主要成分藏花素及藏花酸能降低动物体内低密度 荣生化仪器厂；BT100-2 蠕动泵，保定兰格恒流泵
脂蛋白胆固醇水平、抑制 AS 产生 [7-8] 。但 GYP 对 有限公司；NR60CP 精密色差仪，深圳市三恩时科
LDL 自身氧化是否具有抑制作用，目前尚不明确。 技有限公司；VEGA （Ⅱ） LSU 型扫描电子显微
由于 GYP 中含有大量栀子苷、绿原酸等杂质, 镜，捷克 TESCAN 公司。
[9]
既影响其稳定性，又导致着色后食品变绿变暗 ， 1.2 方法
因此，需要对 GYP 粗品进行精制。近年来，国内外 1.2.1 粗提液的制备
大部分学者通过静态方式筛选树脂并进行纯化，得 将干燥的栀子果实用高速粉碎机粉碎后过 40
[9]
到不同纯度的 GYP。CHEN 等 采用静态方式从 9 目筛，称取 500 g 栀子粉末按料液比 1∶15（g/mL）
种大孔树脂中筛选得到 HPD-722 树脂适合纯化 加入体积分数 60%乙醇溶液、50 ℃恒温水浴搅拌
GYP。但是通过动态方式筛选确定的树脂因更接近 1.5 h，提取 2 次后合并提取液，4500 r/min 离心 10 min，
[4]
实际生产而被采用 。
滤液 50 ℃减压浓缩至无醇味，加入去离子水得到不
基于此，本文采用更接近产业化需要的动态方 [9]
同质量浓度的 GYP 溶液，4 ℃储存备用 。取适量
式从 10 种代表性树脂中筛选 GYP 富集树脂，然后
粗提液40 ℃冷冻干燥，得到 GYP 粗提粉 （GYP-1）
对该树脂纯化工艺进行优化以确定小试工艺，对该
置干燥器中备用，树脂最佳条件纯化后冻干的栀子
工艺参数进行放大实验并对纯化前后的 GYP 性质
黄色素以 GYP-2 表示。
及其抑制 LDL 氧化能力进行比较，为后续产业化开
1.2.2 大孔树脂动态筛选
发不同系列 GYP 产品提供了理论参考。
1.2.2.1 大孔树脂预处理
1 实验部分 分别称取适量不同型号的大孔树脂，用去离子水
洗 2~3 次，加入体积分数为 95%的乙醇浸泡 24 h。湿
1.1 材料、试剂与仪器 法装柱后，用体积分数为 95%的乙醇冲洗树脂，洗
水栀子果实，采自江西湖口道地产区，由九江 至洗涤液在试管中加 5 倍水稀释后不浑浊，再用去
学院陈晔教授鉴定；大孔树脂 AB-8、NKA、Seplite 离子水洗至流出液澄清且无醇味，备用 [10] 。
LX-21、Seplite LX-68，西安蓝晓科技新材料股份有 1.2.2.2 动态筛选处理方法
限公司；HPD-200A、HPD-722、HPD-100，沧州宝 将 GYP 粗提液以 2 BV/h 流速分别上 10 种树脂