Page 112 - 《精细化工》2020年第4期

·746· 精细化工 FINE CHEMICALS 第 37 卷

除杂效果的影响见图 6。由图 6 可以看出，随着水
洗量增加，流出液中杂质含量显著降低。当洗至 7
BV 时，再增加水洗量，流出液中杂质浓度下降不明
显。因此，选取水洗量为 7 BV。

图 5 NKA 大孔树脂动态吸附泄漏曲线
Fig. 5 Dynamic adsorption leakage curve of NKA macroporous
resin

大孔吸附树脂吸附过程中，一般认为泄漏点是
流出液质量浓度达上样液质量浓度 10%所对应的体
积 [25] 。图 5 显示，流出液体积 27 BV 即为泄漏点。 图 6 GYP 水洗除杂曲线
Fig. 6 Curves of GYP washing for impurity removal
上样液体积小于 27 BV 时，流出液均未达到泄漏点
浓度。继续上样，GYP 在 440 nm 处的吸光度呈直 2.3.2 乙醇体积分数对除杂效果的影响
线上升、泄露严重。因此，选择 NKA 大孔树脂分离 在水洗除蛋白、多糖的基础上进一步去除栀子
纯化 GYP 最大上样体积为 27 BV。 苷、绿原酸等杂质，分别用不同体积分数的乙醇为
2.3 NKA 大孔树脂动态解吸实验 洗脱剂，对吸附达到饱和的树脂柱进行洗杂 [23] 。前
2.3.1 水用量对除杂效果的影响 期单因素实验中，确定乙醇用量为 9 BV。以不同体
水洗的主要目的是除去多糖、蛋白质等杂质， 积分数的乙醇溶液为洗脱剂，洗脱液成分含量及除
同时还能除去一部分栀子苷和绿原酸 [23] 。水用量对 杂效果比较见表 4。

表 4 不同体积分数乙醇洗脱液成分含量及除杂效果比较
Table 4 Comparison of composition content and impurity removal effect of ethanol eluent with different concentration
乙醇体积分数/% 藏花素含量/(mg/g) 绿原酸含量/(mg/g) 栀子苷含量/(mg/g) OD 1 O D 2
b
e
a
5 0.07 0.63±0.009 e 6.66±0.12 e 29.48±0.53 7.72±0.104
d
10 0.12 0.99±0.004 d 12.1±0.1 31.99±0.28 7.1±0.028
b
a
d
c
c
15 0.51±0.005 c 2.17±0.021 c 16.33±0.13 c 9.71±0.1 3.51±0.063
b
d
d
20 0.75±0.01 2.64±0.024 b 17.47±0.21 b 7.01±0.02 2.89±0.012
e
e
25 1.76±0.003 a 4.08±0.006 a 21.01±0.02 a 3.61±0.01 1.91±0.002
注：表中同列数据后小写字母表示同列各成分含量差异显著（P<0.05）。

如表 4 所示，增加乙醇体积分数，乙醇洗脱液
中藏花素、绿原酸、栀子苷含量均增加。当乙醇体
积分数超过 15%时，更多的 GYP 也会被洗脱出来。
5%、10%低体积分数乙醇溶液除杂时，尽管醇洗液
OD 1 、OD 2 很高，但其对杂质的洗脱效率明显偏低；
当醇溶液体积分数升高后（15%~25%），其醇洗液
OD 1 、OD 2 呈下降趋势，说明随着乙醇体积分数升
高，其对栀子苷及绿原酸的选择性会降低。因此，
综合考虑洗脱效率和除杂效果，选择体积分数为
[9]
15%的乙醇溶液进行除杂。CHEN 等 用 HPD-722
图 7 乙醇洗脱流速对解吸率的影响
大孔树脂纯化 GYP 时也选取体积分数为 15%的乙
Fig. 7 Effect of ethanol elution velocity on the desorption ratio
醇溶液洗脱栀子苷、绿原酸等杂质。
2.3.3 洗脱剂流速对 GYP 洗脱效果的影响 由图 7 可知，流速为 2 BV/h 时解吸率最高，为
用 2.3.1、2.3.2 节的最佳条件除杂后，考察不同 93.87%。这是因为流速较慢时，乙醇溶液能充分与
流速的洗脱剂对GYP解吸率的影响，结果如图7所示。 树脂接触，更好地破坏 GYP 与树脂之间的作用力，