Page 114 - 《精细化工》2020年第4期
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·748·                             精细化工   FINE CHEMICALS                                 第 37 卷













                                              a、c—GYP-1 色差;b、d—GYP-2 色差
                                               图 10    GYP-1、GYP-2 色差分析
                                      Fig. 10    Chromatic difference analysis of GYP-1 and GYP-2

            2.5    GYP 分离纯化放大实验                                解吸率、OD 1 及 OD 2 均未产生显著性差异,说明放
                 根据 1.2.4 节方法进行放大实验,结果见表 7。                    大后该制备工艺稳定,有效降低了 OD 值,为 GYP
            由表 7 可知,放大前后 NKA 树脂对 GYP 吸附率、                      规模化生产提供了参考。

                                            表 7    NKA 树脂分离纯化 GYP 放大实验
                                Table 7    Scale-up test of separation and purification of GYP by NKA resin
                     总上样量/mg      吸附量/(mg/g)     吸附率/%      解吸量/(mg/g)     解吸率/%         OD 1        O  D  2
              小试     347.84±0.09    36.9±0.27    95.45±0.56 a  32.94±0.98    94.31±1.43   a  0.69±0.01   a  0.684±0.008   a
                                           a
                                                                     a
                                           a
                                                                     a
              扩试    9796.22±68.66   37.9±0.45    93.36±0.45 a  35.54±0.26    96.41±0.99   a  0.721±0.01   a  0.721±0.003   a
                 注:表中同列数据后相同小写字母表示样品各指标差异不显著(p>0.01)。

            2.6    GYP-1 抑制 LDL 氧化修饰作用                             由图 11 可以看出,ox-LDL 组 CD 产生量最高,
                 相关研究表明栀子具有抗氧化作用                [27] 。但 GYP    吸光值为 0.75,比 n-LDL 组高出 74 倍,表明 Cu            2+
            对 LDL 氧化修饰的抑制效果尚不明确。因此,在                           促进 LDL 氧化。添加不同浓度 GYP-1(6.25、12.5、
            2.5 节表征 GYP 纯化前后各主要成分含量差异的基                        25  mg/L)及阳性对照 BHT 对 CD 产生均有显著的
            础上,本文首先对 GYP-1 抑制 LDL 氧化的功能活                       抑制作用(p<0.01)。且随着浓度增加,吸光度降低,
            性进行了验证,随后对其纯化前后抑制 LDL 氧化功                          抑制能力呈现良好的量效关系。原因可能是 LDL 内
            能活性进行了比较。
                                                               源抗氧化剂被消耗后,栀子粗提物中的抗氧化活性
            2.6.1    GYP-1 抑制 CD 产生量的测定                        成分阻止 LDL 被氧化,从而抑制 CD 产生              [19] 。苏伟
                      2+
                 在 Cu 诱导下,LDL 中 PUFAs 发生氧化引起
                                                               等 [29] 研究发现,栀子总皂苷能延缓 LDL 氧化过程中
            脂质自由基重排形成在 230~235  nm 有特征吸收的                      CD 的产生。
            CD,CD 是 LDL 氧化的早期产物           [28] 。通过测定 CD
                                                               2.6.2    GYP-1 抑制 LDL 氧化修饰中 MDA 产生量的
            产生量评价 GYP-1 抑制 LDL 氧化修饰作用,结果
                                                                     测定
            见图 11。
                                                                   随着 PUFAs 继续进行脂质过氧化反应,LDL 氧
                                                               化修饰过程中产生大量有毒的醛类,通过测定 MDA
                                                               含量可评价 LDL 脂质氧化程度,MDA 含量越高氧
                                                                                                     2+
                                                               化程度越强     [19] 。按照 1.2.5.4 节方法,将 Cu 与 LDL
                                                               共同孵育 24  h 后测定 MDA 产生量,结果如图 12
                                                               所示。
                                                                   由图 12 可知,ox-LDL 吸光度最高(0.913),
                                                               说明 LDL 氧化修饰过程中产生大量脂质过氧化物。
                                                               n-LDL 吸光度值显著低于 ox-LDL(p<0.05),表明

            注:图中不同大写字母表示 GYP-1 抑制 CD 产生差异显著                    自然条件下 LDL 氧化较慢。添加不同浓度 GYP-1
            (P<0.01)。                                          (25、50、100 mg/L)后,吸光度显著低于 ox-LDL
             图 11    不同浓度 GYP-1 抑制 LDL 氧化过程中 CD 产生效果
            Fig. 11    Inhibition efficiency of GYP-1 at different concentrations   (p<0.05),表明 GYP-1 能有效抑制 LDL 氧化,且
                   on the CD production during LDL oxidation   随着浓度升高,其抑制能力增强,有明显的量效关系。
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