Page 115 - 《精细化工》2020年第4期
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第 4 期 曹亚楠,等: 栀子黄色素富集纯化对其抑制 LDL 氧化修饰的影响 ·749·
力显著增强,原因可能是纯化后的 GYP 活性物质通
过富集而达到显著抑制效果 [31] 。同浓度 BHT 与
n-LDL 还未进入增殖阶段,这是因为 BHT 为高纯度
的分析纯,而 GYP-1 和 GYP-2 均为混合物,仍有许
多杂质,后续通过进一步分离纯化,其抑制 LDL 氧
化效果会更显著。CHEN 等 [31] 也发现,栀子醇提物
与纯化后 GYP 具有抗氧化活性,且纯化后抗氧化效
果优于乙醇粗提物。
2.7.2 GYP 纯化前后 MDA 产生及降解动力学比较
注:图中不同大写字母表示 GYP-1 抑制 MDA 产生差异显著 由 2.5.2 节测定结果显示,GYP-1 能抑制 LDL
(p<0.05)。 氧化过程中 MDA 的产生。因此,通过测定 24、48、
图 12 不同浓度 GYP-1 对 LDL 氧化修饰过程中 MDA 产
72、96 h MDA 产生量进一步比较纯化前后 GYP 对
生量的抑制效果
Fig. 12 Inhibition efficiency of GYP-1 at different concentrations LDL 氧化过程的抑制作用。GYP-1 和 GYP-2 对 MDA
on the MDA producing during oxidation modification 产生的抑制效果比较见图 14。
process of LDL
2.7 GYP 纯化前后对 LDL 氧化修饰的比较
2.7.1 GYP 纯化前后 CD 产生和降解动力学曲线
LDL 脂质氧化主要分为延迟、增殖、降解 3 个
阶段 [30] 。氧化修饰过程中,随着 LDL 中内源性抗氧
化物逐渐消耗,LDL 从缓慢的延迟阶段过渡到增殖
阶段,CD 含量逐渐上升,当 CD 达到最大值时,即
进入降解阶段,CD 含量开始下降 [28] 。GYP-1 和
GYP-2 抑制LDL 氧化修饰中 CD 产生比较结果见图13。
注:图中不同大写字母表示 GYP-1 和 GYP-2 抑制 MDA 产生差
异显著(p<0.01)。
图 14 GYP-1 和 GYP-2 对 MDA 产生的抑制效果比较
Fig. 14 Comparison of inhibition between GYP-1 and
GYP-2 on the MDA production (p<0.01)
如图 14 所示,ox-LDL 组在 24 h 时 MDA 产生
量即达到高峰,随着时间延长其含量逐渐下降。添
加 GYP-1、GYP-2 和 BHT 后 MDA 峰值均有不同程
度延迟。在相同浓度(75 mg/L)下,GYP-1、GYP-2
样品在 48 h 出现 MDA 峰值,但 GYP-2 样的 MDA
图 13 GYP-1 和 GYP-2 抑制 LDL 氧化中 CD 产生的比较 峰值显著低于 GYP-1 样,显示 GYP-2 抑制 MDA 产
Fig. 13 Comparison of inhibition between GYP-1 and 生的效果更显著(p<0.01)。这是因为纯化后的 GYP
2+
GYP-2 on the CD formation in the Cu induced
LDL oxidation 中抗氧化活性物质含量更多,从而抑制能力更强 [31] 。
陈丽萍等 [32] 的研究也发现,GYP 的抗脂质过氧化能
从图 13 可以看出,随着 LDL 脂质过氧化进行, 力明显强于栀子粗提物,与本实验结果类似。
CD 产生量开始增加。ox-LDL 延迟时间最短,在120 min 2.7.3 紫外-可见光谱扫描比较纯化前后 GYP 抑制
时吸光度即达到最大值 0.813。添加 GYP-1、GYP-2 LDL 氧化能力
和 BHT 后,延迟时间明显增加。12.5 mg/L 的 GYP-1 LDL 脂质过氧化反应的主要产物为脂质氢过氧
在 120 min 前后 CD 快速增殖,约在 240 min 时达到 化物,其在 234 nm 附近有最大吸收 [19] 。在 2.4.2 节
最高峰,比 ox-LDL 组延迟了 120 min。12.5 mg/L 采用紫外扫描对 GYP-1 及 GYP-2 成分含量进行分析
的 GYP-2 在 180 min 时才开始增殖,420 min 左右 的基础上,本文进一步对 GYP-1、GYP-2 与 LDL 的
吸光度才达最大,比 ox-LDL 及 GYP-1 分别延迟了 孵育液进行紫外光谱扫描,以评价其对 LDL 氧化修
300 和 180 min,说明 GYP 纯化后比纯化前抑制能 饰抑制能力的差异,结果如图 15 所示。