Page 113 - 《精细化工》2020年第4期
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第 4 期                  曹亚楠,等:  栀子黄色素富集纯化对其抑制 LDL 氧化修饰的影响                                 ·747·


            从而将 GYP 洗脱出来。增加流速,缩短了洗脱液与                              由图 8 可知,随着洗脱剂乙醇体积分数增加,
            树脂的接触时间,使一部分 GYP 溶液未被洗脱出                           NKA 大孔树脂对 GYP 的解吸能力增强、洗脱曲线
            来,解吸率因此降低          [17] 。因此,考虑时间、洗脱效               变高变窄,体积分数为 80%的乙醇溶液洗脱曲线对
            率等因素,选择 2 BV/h 为 GYP 最佳洗脱流速。                       称,且无明显拖尾现象。这是因为 GYP 的主要成分
            2.3.4    GYP 洗脱剂体积分数及用量的确定                         藏花素具有糖苷键,在水溶液中极性较弱,且与乙
                 洗脱剂体积分数及洗脱剂用量对解吸效果的影                          醇相似,所以易被乙醇溶液洗脱出来                 [26] 。因此,选
            响见图 8。                                             择体积分数为 80%的乙醇溶液作为洗脱剂。
                                                                   由图 8 还可知,确定洗脱乙醇体积分数为 80%后,
                                                               当洗脱剂用量为 3 BV 时,流出液中 GYP 浓度已趋
                                                               于平衡,增大洗脱液体积,解吸变化不明显。因此,
                                                               选取 3 BV 体积分数为 80%的乙醇溶液洗脱 GYP。
                                                               2.4    GYP 纯化前后各理化性质的测试与比较
                                                               2.4.1    纯化前后 GYP 主要成分分析
                                                                   GYP 纯化前后主要成分测定结果见表 5。
                                                                   表 5 显示,纯化后 GYP-2 主要成分藏花素质量
                                                               分数及色价由纯化前的 5.59%、41.05 分别提高到
                                                               34.89%、252,而 OD 1 、OD 2 则分别降低到 0.69、0.684,
                                                               达到了较好的富集效果,为后续研发不同系列 GYP
             图 8    洗脱剂体积分数及洗脱剂用量对解吸效果的影响
             Fig. 8    Effect of eluent concentration and dosage on the desorption   产品提供了依据。

                                                  表 5    GYP 主要成分测定
                                        Table 5    Determination of main components of GYP
                         w(藏花素)/%       w(栀子苷)/%        w(绿原酸)/%           OD 1           O  D  2     色价
                                                                                a
                                                                                                          b
                                                                                                a
                                                                 b
                                                 b
                                  b
               GYP-1       5.59±0.01      44.65±0.35      6.47±0.02      2.65±0.003      1.01±0.002    41.05
               GYP-2      34.89±0.24   a    68±0.22      25.18±0.17      0.69±0.009     0.684±0.008    252   a
                                                 a
                                                                 a
                                                                                b
                                                                                                b
                 注:表中同列数据后不同小写字母表示不同样品主要成分含量差异显著(P<0.01)。

            2.4.2    纯化前后 GYP 紫外、可见全波长扫描                       2.4.3    纯化前后 GYP 颜色表征
                 GYP 纯化前后光谱扫描结果见图 9。由图 9 可                         在 2.4.1、2.4.2 节表征 GYP 纯化前后含量差异
            看出,GYP-1 溶液有 3 个明显的吸收峰。杂质栀子                        的基础上,进一步采用色差仪比较 GYP 纯化前后色
            苷的特征吸收峰在 238  nm 处(峰 1),杂质绿原酸                      度的差别,通过颜色表征更直观地说明 GYP 纯化效
            的特征吸收峰在 325  nm(峰 2),GYP 主要成分藏                     果。GYP 色泽测定结果见表 6,GYP-1、GYP-2 的
                                                        [9]
                                                                                                   *
            花素和藏花酸的特征吸收峰在 440 nm 处(峰 3) 。                      色差分析见图 10。由表 6 可见,GYP-1 的 a 为-2.00,
                                                                *
            纯化后 GYP-2 主要有效成分藏花素、藏花酸吸收峰                         b 为正值,从图 10 中可直观看出 GYP-1 溶液偏黄
            明显增高、纯度显著提高,而栀子苷的吸收峰强度                             绿色,可能是因为栀子苷含量多,造成 GYP 发生绿
                                                                                *
                                                                             *
            显著降低。说明纯化前 GYP-1 溶液中含有的大量栀                         变。GYP-2 的 a 、b 值分别比 GYP-1 高 24、16,图
            子苷等杂质在纯化过程中被除去,GYP 纯度得到显                           10 中显示色相为红黄色,其 E          *  比 GYP-1 高 24.13,
            著提高。                                               表明 GYP-2 与参照组差异更大,颜色更深、纯度更

                                                               高。因 GYP 中显色成分主要是藏花素,浓度升高,
                                                               GYP 溶液会由黄色变成红色,与上述结果一致,说
                                                               明纯化后的 GYP 达到了富集效果。

                                                                             表 6    GYP 色泽测定
                                                                       Table 6    Determination of GYP color
                                                                      L *   a *   b   *   E    深浅   色相  艳度
                                                                                          *
                                                                     84.89  2.00  43.15  33.53   偏深  偏绿黄 偏艳
                                                               GYP-1     a     b    b      b
                                                                     ±0.16  ± 0.06  ±1.9  ±1.86
                                                                     72.1  22.06  59.63  57.66   偏深  偏红黄 偏艳
                                                               GYP-2    b      a     a     a
                                                                     ±0.18  ±0.15  ±0.55   ±0.57

                       图 9    GYP 纯化前后光谱扫描                         注:表中同列数据后不同小写字母表示样品外观色泽差异
             Fig. 9    Scanning spectra of non-refined and refined GYP   显著(P<0.01)。
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