Page 156 - 《精细化工》2021年第12期

·2518· 精细化工 FINE CHEMICALS 第 38 卷

金处理后，用 SEM 观察断面形貌。 对照组吸光度。
1.3.4 力学性能测试 根据 GB/T 16886.5—2017 采用 MTT 测试双网
将 BPAM 水凝胶和双网络水凝胶 DN1~DN5 络水凝胶 DN0~DN5 浸提液的细胞存活率。在 96 孔
（溶胀平衡）分别裁成 25 mm  4 mm 哑铃状和 板培养 NIH3T3 细胞，加入双网络水凝胶浸提液的
15 mm  15 mm  4 mm 块状，用电子拉力试验机在 上清液（质量浓度为 10、20 mg/L），并设置阴性空
50 mm/min 的速率下分别测试拉伸强度-拉伸应变和 白对照。孔中加入 MTT 溶液（质量浓度 5 g/L 溶于
压缩强度-压缩应变。 PBS 中）培养 4 h，吸出培养基向孔中加二甲基亚砜
1.3.5 抗菌实验 （DMSO）溶解甲瓒。最后测定 570 nm 处孔中溶液
根据GB/T 20944.1—2007 测定双网络水凝胶DN1~ 的吸光度，同时设定 630 nm 为参比波长。根据式（8）
DN5 的抗菌性。将活化的大肠杆菌（E. coli）和金黄 计算细胞存活率：
6
色葡萄球菌（S. aureus）悬浊液稀释至 1×10 CFU/mL A
细胞存活率 /%  s  100 （8）
后涂覆在固化的琼脂培养基上，双网络水凝胶 A b
DN1~DN5 和不加 BSP 的双网络水凝胶 DN0 裁成圆
式中：A s 、A b 分别为样品、阴性空白对照组吸光度。
形（d=20 mm）置于培养皿上 37 ℃孵育 24 h，观察
抑菌圈大小，并按式（5）计算抑菌带宽度： 2 结果与讨论
(Rd )
H  （5） 2.1 水凝胶溶退胀性能与组分干重百分率分析
2
式中：H 为抑菌带宽度，mm；R，d 分别为抑菌圈 对水凝胶溶退胀性能与组分干重百分率进行了
和样品直径，mm。 测试，结果见图 1。
1.3.6 羟基自由基清除法测定抗氧化活性
将冻干双网络水凝胶 DN1~DN5 粉末和磷酸盐
缓冲溶液（PBS）配制成质量浓度为 1、2、3 g/L 的
悬浊液，37 ℃振荡 48 h 得到浸提液，加入 6 mmol/L
水杨酸-乙醇溶液、2 mmol/L FeSO 4 溶液和 1 mmol/L
H 2 O 2 溶液，37 ℃水浴 30 min，在 510 nm 测量吸光
度，与未加 H 2 O 2 的吸光度和空白对照组（未加样品）
的吸光度。并测试纯 BSP 粉末与未加 BSP 的双网络
水凝胶浸提液的羟基自由基清除率，根据式（6）计
算羟基自由基清除率（R）：
(A  A  A )
R /%  3 1 2  100 （6）
A 3
式中：A 1 、A 2 、A 3 分别为样品、未加 H 2 O 2 、空白对
照组的吸光度。
1.3.7 生物相容性测定
根据 YY/T 1651.1—2019 采用直接接触法测定
双网络水凝胶 DN0~DN5 的溶血率。取适量样品放
入试管中加入适量质量分数 0.9%氯化钠注射液，恒
温水浴 37 ℃孵育 30 min，加入稀释的葡萄糖-柠檬
酸血液（按照 0.2 mL 血液与 10 mL 0.9%氯化钠注射
液比例稀释），37 ℃孵育 1 h 后离心取上清液，通
过紫外-可见分光光度计测量 545 nm 处的吸光度。
蒸馏水作阳性对照，质量分数 0.9%氯化钠注射液作
阴性对照，根据式（7）计算溶血率：
A  A
溶血率 / %  1 2  100 （7）
A  A 2
3
式中：A 1 、A 2 、A 3 分别为样品、阴性对照组、阳性