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·1692·                            精细化工   FINE CHEMICALS                                  第 35 卷

                 缬氨酸是生命体不可或缺的必需氨基酸，其在                          及人宫颈癌细胞（HeLa 细胞）分别对其抗癫痫及体
            动植物体内均有一定含量，在人体的物质代谢及信                             外抗肿瘤活性进行了初步筛选。在前人基础上，拓
            息传递方面具有非常大的作用；缬氨酸可作为人类                             宽了化合物 BHX 在医药学领域的应用，具有较强的
            的营养保健产品，也可作为药品使用，亦可作为饲                             理论及实际意义。
            料添加剂、抗生素、除草剂等，具有抗菌                   [1-3] 、改善
                     [4]
            免疫机能 等功能。薄荷是常用中药之一，具有抗                             1   实验部分
            炎镇痛、抗病毒、抗氧化、抗生育、促进透皮吸收                             1.1   主要试剂与仪器
                       [5]
            等药理作用 。结合 L-缬氨酸和薄荷的药理特点，
                                                                   N-boc-L-缬氨酸，AR，韶远科技（上海）有限
            缬氨酸薄荷酯可用于日用化工、化妆品、医药、食                             公司；薄荷，AR，国药集团化学试剂有限公司；二
            品等领域；在医药领域，BHX 被认为具有巨大的药                           环己基碳二亚胺，AR，上海化学试剂公司；4-二甲
                   [6]
            用潜力 。然而，在药学领域，如抗癫痫及抗肿瘤                             氨基吡啶，AR，Acros Organics；其他均为市售 CP。
            等方面的研究鲜见报道。                                            FT-IR360 型红外光谱仪，美国尼高力仪器公司；
                 BHX 的常用合成方法有两种，一是利用缬氨酸                        AVANCE AV-400 型核磁共振波谱仪，德国布鲁克科
            和薄荷直接酯化；另一种是先对缬氨酸的氨基进行                             技有限公司；JL-C2 型电刺激器，上海嘉龙教仪厂；
            保护，再和薄荷酯化。氨基酸酯衍生物的合成方法                             Agilent 1200 Series 型高效液相色谱-质谱联用仪，美
            已有较深入的研究         [7-12] 。近年，李前荣     [13] 等先用苄      国安捷伦科技有限公司。
            酯基氯保护，然后以 DCC/DMAP 为催化剂，以乙                             实验小鼠为 SPF 级雄性昆明小鼠，体重为（24±
            腈为溶剂，用苄酯基氯保护的缬氨酸与薄荷反应，                             2）g，动物合格证号为 SCXK（陕）2007-001，由西
            合成了 5 个 N-苄氧羰基氨基酸薄荷酯，反应速率及                         安交通大学医学实验动物中心提供。肿瘤细胞为 HeLa
            收率均有所提高。本文以 N-boc-L-缬氨酸及薄荷为                        细胞（人宫颈癌细胞），由中国科学院细胞库提供。
            原料，以 DCC/DMAP 为催化剂，二氯甲烷为溶剂                         1.2  BHX 的合成
            合成了 BHX；采用最大电休克惊厥实验法（MES）                              合成路线如下所示：











                 参考文献[13]原理及步骤，改用二氯甲烷为溶                        研碎，加入 0.01 mL 吐温–80，缓慢加水（1.99 mL）
            剂，合成了 BHX。具体步骤为：在装有搅拌的 50 mL                       并研磨均匀后，转移至 2 mL 容量瓶中，加水定容至
            三口烧瓶中，依次加入薄荷（Ⅰ） 2.00 g （12.8 mmol）、                2 mL，4 ℃冷藏备用。
            N-boc-L-缬氨酸（Ⅱ）3.34 g（15.4 mmol）、二氯甲                    50 g/L 卡马西平药液配制：称取卡马西平药品
            烷（20 mL）、DCC 5.28 g（25.6 mmol）、DMAP 0.31 g         100.0 mg，加入 0.01 mL 吐温–80，缓慢加水（1.99 mL）
                                                               并研磨均匀后，转移至 2 mL 容量瓶中，加水定容至
            （2.56 mmol），室温搅拌 5 h。TLC 监测反应〔V（石
                                                               2 mL，4 ℃冷藏备用。
            油醚）∶V(乙酸乙酯)=10∶1〕。反应结束后，反应
                                                               1.3.2   最大电休克模型实验（Maximal Electroshock，
            液过滤，滤液依次用 1 mol/L 盐酸、饱和 NaHCO 3
                                                                     MES）
            溶液、饱和 NaCl 溶液洗涤，有机相经无水硫酸钠干
                                                                   参考文献[14]方法对实验小鼠进行选择及预筛
            燥后，过滤，滤液经旋转蒸发仪旋干，先加入 10 mL
                                                               选，实验前一天，对实验小鼠采用 15 V，60 Hz 的
            乙酸乙酯溶解，再滴加浓度为 2.3 mol/L 的盐酸-乙                      电刺激，两电极夹于小鼠双耳，通电剌激 0.45 s，
            酸乙酯溶液 5 mL，室温搅拌后过滤，滤液经旋转蒸                          出现后肢强直的小鼠属于实验备用小鼠，预筛选合
            发仪旋干，异丙醚打浆，过滤，干燥，得到白色固                             格的小鼠用于下一步实验。
            体（BHX）2.81 g，收率 75.34%。                                于小鼠双耳尖部均匀涂抹生理盐水，使用 20 V、
            1.3   最大电休克惊厥实验（MES）                               64 Hz 交流电，接通电极给予 0.25 s 电刺激，小鼠后
            1.3.1   样品配制                                       肢强直时认定为惊厥         [15] 。取预筛选的小鼠 12 只，按
                 100 g/L BHX 溶液的配制：称取 BHX 200.0 mg，            照随机数字表法分为 3 组，每组 4 只             [16] 。分别命名
   79   80   81   82   83   84   85   86   87   88   89