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·1890· 精细化工 FINE CHEMICALS 第 35 卷
2.4 MSCE固定化柚苷酶水解柚皮苷的酶学性质研究
2.4.1 MSCE 固定化柚苷酶的最佳反应 pH 及 pH 稳
定性
MSCE 固定化柚苷酶与游离柚苷酶水解柚皮苷
实验的最佳反应 pH 及 pH 稳定性的研究结果见图 10。
图 8 固定化时间对 MSCE 固定化柚苷酶酶活力的影响
Fig. 8 Effect of immobilization time on the activity of the
MSCE immobilized naringinase
2.2.4 给酶量对固定化柚苷酶酶活力的影响
考察了给酶量对 MSCE 固定化柚苷酶酶活力的
影响，实验方法同 1.2.3 节，结果见图 9。由图 9 可知，
给酶量在达到 57.48 U/mL 之前，固定化柚苷酶的酶
活力随着给酶量的增大而迅速增加；达到 57.48
U/mL 之后，继续加大给酶量对固定化柚苷酶酶活力
的影响并不明显。这是因为一定量的磁性硅基壳聚
糖微球表面壳聚糖所含的活性团是一定的 [25] ，当给
酶量为 57.48 U/mL 时，载体的结合位点达到饱和，
部分酶分子进入孔隙深处，底物难以与其接触，导
致酶活增加缓慢甚至略微下降。因此 MSCE 固定化
柚苷酶的最佳给酶量为 57.48 U/mL。
图 10 MSCE 固定化柚苷酶与游离柚苷酶水解柚皮苷实
验的最佳反应 pH（a）及 pH 稳定性（b）
Fig. 10 Optimum pH (a) and pH stability (b) of MSCE
immobilized naringinase and free naringinase in
naringin hydrolysis experiment
由图 10a 可知，MSCE 固定化柚苷酶与游离柚
苷酶的最佳反应 pH 均为 4.5，但游离柚苷酶受 pH
的影响波动较大，这说明 MSCE 固定化柚苷酶对其
最佳反应 pH 没有明显影响，并初步认为 MSCE 固
定化柚苷酶较游离柚苷酶的 pH 稳定性好。由图 10b
图 9 给酶量对 MSCE 固定化柚苷酶酶活力的影响
Fig. 9 Effect of crude naringinase broth activity on the 可知，MSCE 固定化柚苷酶的相对酶活力在 pH 2.0~
activity of the MSCE immobilized naringinase 9.0 内几乎趋于稳定，而游离柚苷酶的相对酶活力波
2.3 最佳条件下 MSCE 固定化柚苷酶的参数测定 动非常大。这说明 MSCE 固定化柚苷酶有较好的 pH
以上固定化工艺参数优化的结果表明，在最佳 稳定性。
条件下，利用 MSCE 进行柚苷酶的固定化，其载酶 2.4.2 MSCE 固定化柚苷酶的最佳反应温度及温度
率、酶活回收率和酶比活力分别为 31.29%、88.92% 稳定性
[9]
和 409.33 U/g。相比 Xiao 等的研究，在磁性纳米 MSCE 固定化柚苷酶与游离柚苷酶水解柚皮苷
颗粒表面包裹 SiO 2 和壳聚糖后再用于柚苷酶的固定 的最佳反应温度及温度稳定性的研究结果见图 11。
化，其酶活回收率和酶比活力分别提高了 8.60%和 由图 11a 可知，MSCE 固定化柚苷酶与游离柚苷酶
10.83 倍，不仅具有在外加磁场下与底物快速分离的 的最佳反应温度均为 50 ℃，在相同温度下 MSCE
性能，还具有耐酸的性质，同时还减少了磁性纳米 固定化柚苷酶较游离柚苷酶的相对酶活力更高，说
颗粒对酶的直接热传递，有利于提高其热稳定性。 明 MSCE 固定化柚苷酶对其最佳反应温度没有明显
