Page 105 - 201811
P. 105
第 11 期 徐 杰，等: 磁性硅基壳聚糖微球固定化柚苷酶水解柚皮苷 ·1891·
影响，并初步认为 MSCE 固定化柚苷酶的温度稳定 性实验结果见图 13。如图 13 所示，MSCE 固定化
性比游离柚苷酶好。由图 11b 和 11c 可知，在 40 和 柚苷酶在贮存 25 d 以后酶活趋于稳定，贮存 30 d 之
60 ℃下，随着保温时间的增加，MSCE 固定化柚苷 后仍保留 80%以上的相对酶活力；然而游离柚苷酶
酶的相对酶活力下降趋势较游离柚苷酶缓和，说明 在贮存 30 d 之后仅约 30%的相对酶活力，期间酶活
MSCE 固定化柚苷酶有较好的温度稳定性。 下降较快。因此，MSCE 固定化柚苷酶有较好的贮
藏稳定性。
图 12 MSCE 固定化柚苷酶的操作稳定性
Fig. 12 Operational stability of MSCE immobilized
naringinase
图 13 MSCE 固定化柚苷酶与游离柚苷酶的贮藏稳定性
Fig. 13 Storage stability of MSCE immobilized naringinase
and free naringinase
3 结论
图 11 MSCE 固定化柚苷酶与游离柚苷酶水解柚皮苷实 依次用化学共沉淀法、溶胶-凝胶法和乳液交联
验的最佳反应温度及温度稳定性 法制得磁性硅基壳聚糖微球，再进行环氧基修饰后
Fig. 11 Optimal reaction temperature and thermal stability 用以固定化柚苷酶。通过对磁性硅基壳聚糖微球的
of MSCE immobilized naringinase and free
naringinase in naringin hydrolysis experiment 表征和磁性能研究可知，该磁性硅基壳聚糖微球成
功包覆了壳聚糖和具有耐酸性质的 SiO 2 ，粒径约为
2.4.3 MSCE 固定化柚苷酶的操作稳定性 200 μm，表面具有许多微孔结构，且具有良好的磁
MSCE 固定化柚苷酶操作稳定性的研究结果见 分离性能。通过单因素实验，确定了环氧基修饰的
图 12。 磁性硅基壳聚糖微球（MSCE）固定化柚苷酶的最
由图 12 可知，经过 7 次循环使用，MSCE 固定 佳工艺条件为：pH 3.0、温度 30 ℃、时间 4 h、给
化柚苷酶的相对酶活力为 53.36%，且经过第 6 次使 酶量 57.48 U/mL。通过最佳条件，测得 MSCE 固定
用后 MSCE 固定化柚苷酶的相对酶活力趋于稳定。 化柚苷酶的载酶率、酶活回收率和酶比活力分别为
这说明 MSCE 固定化柚苷酶具有良好的操作稳定性。 31.29%、88.92%和 409.33 U/g；水解柚皮苷重复使
2.4.4 MSCE 固定化柚苷酶的储藏稳定性 用 7 次后，仍具有 53.36%的相对酶活力；4 ℃贮存
MSCE 固定化柚苷酶与游离柚苷酶的贮藏稳定 30 d 之后，还具有 80.97%的相对酶活力，说明 MSCE
