Page 93 - 精细化工2019年第12期
P. 93
第 12 期 吴 倩，等: 玫瑰产色链霉菌 P450 酶体外催化合成 16α-羟基泼尼松龙 ·2421·
a、b 分别为培养基发酵 0、48 h 泼尼松龙的 HPLC 图谱；c、d、e 分别为 30%~50%、50%~70%、0~30%饱和硫酸铵蛋白沉淀在 NaIO 4
支持下催化泼尼松龙反应后 HPLC 图谱
图 1 泼尼松龙转化的液相色谱图及反应式
Fig. 1 HPLC and hydroxylation reaction of prednisolone
2.2 16α 羟基化酶过氧化物分流反应条件优化 在 0.5 mmol/L 泼尼松龙、1.0 mmol/L NaIO 4 条
为了提高 16α 羟基化酶催化过氧化物分流反应 件下，反应 6 h 达到平衡，16α-羟基泼尼松龙的产量
效率，考察了泼尼松龙溶解度、过氧化物种类、金 为 23.3 mg/L，转化率为 12.9%。而在同等条件、
属离子浓度、反应温度以及 pH、过氧化氢浓度、泼 1.0 mmol/L H 2 O 2 支持下反应 12 h 达到平衡，16α-
尼松龙浓度对 16α 羟基化酶过氧化物分流反应的 羟基泼尼松龙的产量为 45.3 mg/L，泼尼松龙转化率
影响。 达到 25.1%。NaIO 4 支持的过氧化物反应转化率低于
2.2.1 过氧化物种类对 16α 羟基化酶过氧化物分流 H 2 O 2 ，综合考虑，确定 H 2 O 2 作为泼尼松龙过氧化物
反应的影响 反应的氧化剂，代替天然电子传递系统。
分别选择了 NaIO 4 和 H 2 O 2 这 2 种具有反应活性 H 2 O 2 支持的泼尼松龙分流反应 HPLC 检测结果
如图 3 所示。
的过氧化物和氢过氧化物进行了对比研究。NaIO 4
和 H 2 O 2 作为氧化剂使泼尼松龙在 16α 羟基化酶催化
下发生过氧化物分流反应，如图 2 所示。
图 3 泼尼松龙 H 2 O 2 分流反应液相检测图
Fig. 3 HPLC of single oxidation reaction of prednisolone
图 2 过氧化物对过氧化物分流反应的影响 by H 2 O 2 -shunt pathway
Fig. 2 Effect of kind of peroxides on the peroxide shunt [5]
reaction 参考 H 2 O 2 分流途径 ，推测 P450s 催化泼尼松
