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·214· 精细化工 FINE CHEMICALS 第 36 卷

TPAS 的细胞毒性，MTT 化学名为 3-(4，5-二甲基 吸收，固体紫外吸收主要出现在 407 nm 处，为分子
噻唑-2)-2，5-二苯基四氮唑溴盐。MTT 能够被活细 大共轭体系的 π–π*电子跃迁所致。在 318 nm 处出
胞中的酶还原为蓝紫色的 Formazan 晶体,通过测试 现了 1 个小肩峰，为 N 原子上孤对电子的 n–π*跃迁
细胞吸光度来获得探针毒性的相关信息。 所致 [24] 。化合物有很强的荧光发射，其最大发射峰
将 A549 细胞种于 96 孔培养板中（接种密度为 在 479 nm 处，由图 1b 可知，荧光发射为蓝光。

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1×10 /孔），放入 37 ℃的培养箱里培养 12 h。将 MTT 2.1.2 液体光学性质测试
以 PBS 做溶剂配成浓度为 5 g/L 的溶液。分别向接 荧光材料在稀溶液中一般存在以下规律：当溶
种好的细胞里加入含有不同浓度 TPAS 的含 MTT 液 液中荧光材料的浓度小于一定范围时，荧光强度与
的培养基混合液（TPAS 的浓度依次为 0、1、10、 荧光材料的浓度成正比关系 [25] 。为了验证 TPAS 在
30、50、70 和 100 μmol/L），孵育 48 h，倒扣 96 孔 稀溶液中是否存在此规律，测试了一系列不同浓度
培养板除去多余的 MTT 液，然后向各孔分别加入 TPAS 溶液的荧光和紫外光谱，结果如图 2a、b 所示。
150 μL 二甲基亚砜（DMSO）溶液，用荧光免疫分
图中可看出，随着溶液浓度的增大，紫外吸光度逐
析仪检测 490 nm 处各孔的吸光度，从而检测化合物 渐增大，荧光也逐渐变强。说明在 1.0×10 ~1.0×
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TPAS 的细胞毒性。 –5
10 mol/L 内，溶液的荧光强度与其浓度成正比。通
1.7 细胞成像实验 过作 433 nm 处相对荧光强度与浓度的线性拟合图，
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将接种好的 A549 细胞（接种密度：1×10 /孔）
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如图 2c 所示，其中，I 0 是 TPAS 浓度为 1.0×10 mol/L
培养 12 h 后，贴壁加入含有 TPAS 的培养基混合液 时的荧光强度（114.12），I 是 TPAS 的浓度在 2.0×
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（TPAS 浓度为 1.0×10 mol/L），孵育 0.5 h 后，在
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10 ~1.0×10 mol/L 范围的荧光强度，将 I/I 0 的值定
倒置荧光显微镜下观察并记录。
义为相对荧光强度。由图 2c 可知，433 nm 处荧光
2 结果与讨论 强度与浓度的线性关系较好，得到线性方程为
2
y=0.53917x + 0.97333，R 为 0.99282，说明 TPAS 在
2.1 光学性质测定 稀溶液中（TPAS 浓度在 2.0×10 ~9.0×10 mol/L）
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–6
2.1.1 固体光学性质测试 的荧光强度正比于浓度，且呈线性系。
化合物 TPAS 固体的紫外和荧光光谱图如图 1a 考察了 TPAS 的溶剂化效应，分别将 TPAS 溶
所示，固体 TPAS 在日光灯和紫外灯下的照片如图 于石油醚、正己烷、乙酸乙酯、丙酮、DMF 以及
1b 所示。从图 1a 可以看出，TPAS 在紫外区有较好 DMSO 6 种溶剂中，荧光测试结果如图 3 所示。

图 1 固体 TPAS 的紫外吸收和荧光谱图（a）；固体 TPAS
在日光灯和紫外灯下的照片（b）
Fig. 1 UV-vis absorption and PL spectra of TPAS powders (a);
photographs of TPAS powders taken under room
light and UV light(b)