Page 162 - 《精细化工》2020年第8期

·1660· 精细化工 FINE CHEMICALS 第 37 卷

1.4 SEM 分析和纤维素含量测定 糖苷酶酶活分别为 11.94±0.51、12.07±0.43、32.94±0.83
SEM 观察：取放线菌 GS-4-21 降解前、后的玉 和 30.87±1.04 U/mL。该复筛结果进一步验证了放线
米秸秆进行 SEM 观察。 菌 GS-4-21 具有较强的产纤维素酶的能力。如：任
采用范式洗涤法 [18] 测定玉米秸秆的纤维素、半 大明等 [19] 从土壤中筛选出 1 株产纤维素酶的放线
纤维素和木质素含量。 菌，该菌发酵后的 FPA、C 1 、C X 和β-糖苷酶酶活分
别为 13.88、10.40、30.06 和 8.05 U/mL。李堆淑 [20]
2 结果与讨论 对灰色链霉菌产纤维素酶的发酵条件进行响应曲面

法优化，优化后 C X 酶活为 6.103 U/mL。陈逸文 [21]
2.1 菌株的初筛实验结果
筛选出一株链霉菌 Streptomyces pactum，对产酶条件
将筛选的菌株点在 CMC 培养基上，28 ℃下培
进行优化后，菌株的 C X 酶活为 0.455 U/mL。
养 7 d，经刚果红实验后发现 1 株比值（D/d）较大
2.3 菌株的形态特征观察结果
的菌株，其编号为 GS-4-21，结果如图 1 所示。经
将菌株 GS-4-21 接种在 ISP3 培养基上，培养后
测量后得到 D 值为(13.63±0.47) mm，d 值为(2.47±
观察其形态以及显微镜下形态，结果如图 3 和图 4
0.17) mm，D/d 值为 5.54±0.20。结果表明，菌株
所示。
GS-4-21 具有较强的分解纤维素能力，是后续实验
的研究对象。

图 3 菌株 GS-4-21 的形态学观察结果
图 1 菌株 GS-4-21 的刚果红染色实验结果
Fig. 1 Congo red staining results of strain GS-4-21 Fig. 3 Morphological observation of strain GS-4-21

2.2 菌株的复筛实验结果
2.2.1 葡萄糖标准曲线
经 Origin 分析：回归方程为 y=1.1214x–0.1179，
2
R =0.99849 。葡萄糖含量与吸光度的相关性在
0.2~1.4 g/L 范围内较好。
2.2.2 菌株 GS-4-21 的酶活测定
4 种纤维素酶活的测定结果如图 2 所示。

图 4 菌株 GS-4-21 的显微形态特征
Fig. 4 Microscopic morphological characteristics of strain
GS-4-21

由图 3 可见，菌株 GS-4-21 的气生菌丝呈现灰
白色，其基内呈浅红棕色，不产生色素，较干燥，易
挑取。依据《微生物分类学》 [22] ，初步鉴定该菌株
GS-4-21 为放线菌。
在 40×100 倍下进行观察，显微镜形态观察表
明，这株菌具有丝状菌丝及球状的孢子链，呈现明

显的放线菌特征。
图 2 4 种纤维素酶活测定结果
Fig. 2 Results of four cellulase activities 2.4 菌株的分子生物学鉴定结果
2.4.1 菌株的 PCR 扩增和质粒提取结果
菌株 GS-4-21 在发酵 7 d 时的 FPA、C 1 、C X 和 β- 图 5 是菌株的 PCR 扩增和质粒提取结果。