Page 163 - 《精细化工》2020年第8期
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第 8 期 刘晓飞，等: 产纤维素酶放线菌的筛选鉴定及其对玉米秸秆的降解 ·1661·
在 PCR 扩增结果（a）中，1500 bp 左右出现一
个清晰且明亮的条带，为扩增的结果；250 bp 处出
现一个条带，为非特异性条带，不影响后续实验。
由质粒提取结果（b）可知：质粒条带清晰，外送测序。
2.4.2 系统发育树的构建
菌株 GS-4-21 的 16S rRNA 序列，共 1568 bp。
在网站：https://www.ezbiocloud.net 中比对，下载同
源性较高的菌株进行多重比较分析，构建其系统发
育树（邻近法），结果如图 6 所示。
由图 6 可见，菌株 GS-4-21 与 Streptomyces
rishiriensis（AB184383）的 16S rRNA 序列同源性
最高，达 99.72%，且与 GS-4-21 同源性高的菌株都是
a—PCR 扩增结果；b—质粒提取结果；1、2 均为菌株 GS-4-21
图 5 PCR 扩增和质粒提取结果 链霉菌属。在进化树中，菌株 GS-4-21 与 Streptomyces
Fig. 5 PCR amplification and plasmid extraction results rishiriensis 形成一个单独的分支，确定属于链霉菌属。
注：分支处仅显示出＞50%的靴值，0.002 代表两个核苷的遗传距离
图 6 系统发育树的构建（邻近法）
Fig. 6 Phylogenetic tree construction (proximity method)
2.5 单因素实验结果 由图 7 可见，在整个 9 d 的发酵周期中，前 5 d
2.5.1 发酵天数的影响 期间，玉米秸秆降解率上升得较快，这可能是由于
发酵天数对玉米秸秆降解率的影响如图 7 所示。 随着发酵天数的增加，该菌株生长繁殖迅速，分泌
出较多的纤维素酶。5~9 d 期间，玉米秸秆降解率的
变化趋于稳定，这可能是由于培养基中营养物质被
消耗或者积累了较多的代谢产物，从而抑制了菌株
分泌纤维素酶。考虑时间、降解率和经济等因素后，
选择最佳发酵天数为 5 d。
2.5.2 培养基初始 pH 的影响
pH 对酶的活性和稳定性有较大的影响。在最适
宜的 pH 下，酶分子的活性中心会有带正、负电的
基团，有助于纤维素酶与玉米秸秆结合，从而有效
降解玉米秸秆。培养基初始 pH 对玉米秸秆降解率
图 7 发酵天数对玉米秸秆降解率的影响 的影响如图 8 所示。
Fig. 7 Effect of fermentation days on the degradation rate
of corn straw 由图 8 可见，随着培养基初始 pH 的增加，玉
