Page 166 - 《精细化工》2020年第8期
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·1664·                            精细化工   FINE CHEMICALS                                 第 37 卷

                 玉米秸秆降 解率 =22.04+0.97A+0.83B+0.64C+                    表 7    玉米秸秆的主要成分变化情况
            0.70D–0.75AB+0.14AC+1.27AD–0.31BC–0.72BD+                Table 7    Main compositions of corn straw
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            0.41CD–2.63A –1.31B –2.71C –0.26D                    原料     纤维素含量/% 半纤维素含量/%  木质素含量/%
                 由表 6 可知:此模型的 P 值小于 0.0001,说明极                  降解前      36.47±0.89   28.76±1.04   16.08±0.87
            其显著;失拟项 P 值为 0.1829>0.05,说明不显著             [25] 。   降解后      25.41±0.48   19.57±0.98   13.04±0.77
            由此可知,该模型选择正确,可用于优化放线菌
                                                                   玉米秸秆中纤维素含量>半纤维素含量>木质素
            GS-4-21 降解玉米秸秆。
                                                               含量。当被放线菌 GS-4-21 降解后,其主要成分的
                 从表 6 还可以看出,各因素的效应关系为
            A>B>D>C,即培养基初始 pH>摇床转速>接菌量>发                       含量(纤维素、半纤维素和木质素)均有不同程度的
                                                               下降。从表 7 中数据可以计算出玉米秸秆中纤维素、
            酵温度;其中,AB、AD、BD 对实验有显著影响,交
                                                               半纤维素、木质素的降解率分别为 30.33%、31.95%、
            互作用响应曲面如图 12 所示。由图 12a、b 和 c 可
                                                               18.91%。放线菌 GS-4-21 对半纤维素的降解率是最
            见,曲面的坡度比较陡,说明两两因素之间的交互
                                                               高的,其次是纤维素,最后是木质素。
            作用是比较显著的。
                 综合以上单因素和响应曲面分析结果,使用                           3   结论
            Design-expert 8.0 进行多响应值的最优条件选择,从
            而得出优化工艺参数:培养基初始 pH 为 6.46,摇                           (1)从寒地黑土中筛选出的放线菌 GS-4-21 可
            床转速 157.62 r/min,发酵温度 28.47  ℃,接菌量的                产纤维素酶并对玉米秸秆具有较好的降解能力。
            体积分数为 3%,在此工艺参数下预测的玉米秸秆降                              (2)当发酵时间为 5 d,培养基初始 pH 为 6,
            解率为 23.12%。考虑实际操作情况,确定 4 个因素                       发酵温度为 28  ℃,摇床转速为 160  r/min,接菌量
            分别为培养基初始 pH  6,摇床转速 160  r/min,发                   的体积分数为 3%时,玉米秸秆的降解率可达到
            酵温度 28  ℃,接菌量的体积分数为 3%,在此条件                        23.54 %。其中,纤维素、半纤维素、木质素的降解
            下进行玉米秸秆降解实验,摇瓶发酵 5  d 后,玉米                         率分别为 30.33%、31.95%和 18.91%。
            秸秆的降解率为 23.54%,与预测值差别不大,证明                            (3)考虑在后续实验中采用培养基成分的优化、
            模型可靠,优化条件有效。                                       复合菌群的构建和紫外诱变等手段,提高菌株 GS-4-21
            2.7    SEM 分析                                      产纤维素酶的能力,更好地降解玉米秸秆,为秸秆
                 为从表观层面观察菌株对玉米秸秆的降解能                           类生物质降解及利用提供菌种资源和理论依据。
            力,用 SEM 对玉米秸秆降解前后的形貌进行观察,
                                                               参考文献:
            如图 13 所示。
                                                               [1]   LI Z M (李梓木).  Study  on  the  effect  of  extract  on  hydrothermal
                                                                   pretreatment of corn stalk[D]. Harbin: Harbin Institute of Technology
                                                                   (哈尔滨工业大学), 2016.
                                                               [2]   JUAN G E, SILKE A, MERVYN B. Next generation sequencing of
                                                                   actinobacteria for the discovery of novel natural products[J]. Marine
                                                                   Drugs, 2016, 14(4): 2-19.
                                                               [3]   KATZ  L,  Baltz  R  H.  Natural  product  discovery:  Past,  present,  and
                                                                   future[J].  Journal  of  Industrial  Microbiology  and  Biotechnology,
                                                                   2016, 43(2/3): 155-176.
                                                               [4]   ZHANG  R  (张瑞),  ZHANG  Y  Y  (张熠依),  TIAN  K  P  (田昆鹏),
                                                                   et al.  Study  on  the  selection  and  characteristics  of  microbiological
                                                                   agents  for  straw  biogas  fermentation  pretreatment[J].  Anhui
                                                                   Agricultural Science (安徽农业科学), 2014, (11): 3334-3337.
                图 13    降解前(a)后(b)玉米秸秆的 SEM 图                  [5]   MAGARE V N, Kulkarni C P, Maurya C B. Extraction of cellulase
            Fig. 13    SEM images of corn straw before (a) and after (b)   enzyme  from  isolated  actinomycetes[J].  Paripex-Indian  Journal  of
                    degradation                                    Research, 2015, 4(5): 8-10.
                                                               [6]   BENHADJ  M,  GACEMI-KIRANE  D,  MENASRIA  T, et al.
                 由图 13 可见,玉米秸秆降解前的表面结构比较                           Screening  of  rare  actinomycetes  isolated  from  natural  wetland
            完整,致密且有规则,玉米秸秆降解后的表面出现                                 ecosystem  (Fetzara  Lake,  Northeastern  Algeria)  for  hydrolytic
                                                                   enzymes  and  antimicrobial  activities[J].  Journal  of  King  Saud
            较大的裂缝和孔洞,菌株 GS-4-21 在降解过程中对                            University-Science, 2018: 1-7.
            玉米秸秆的结构进行一定的破坏,增加了纤维素的                             [7]   BHATTI A A, HAQ S, BHAT R A. Actinomycetes benefaction role in
                                                                   soil and plant health[J]. Microbial Pathogenesis, 2017, 111: 458-467.
            暴露面积,提高了纤维素的利用率。结果表明:放线
                                                               [8]   SHI  B  (史彬),  HUANG  W  W  (黄魏魏),  FU  D  N  (付丹妮),  et al.
            菌 GS-4-21 具有较高的玉米秸秆降解能力。                               Study on the screening of straw degradation actinomycetes GC and
                                                                   its  application[J].  Journal  of  Microbiology  (微生物学杂志),  2018,
            2.8   玉米秸秆中主要成分的测定
                                                                   38(2): 43-49.
                 玉米秸秆的主要成分变化情况如表 7 所示。                                                       (下转第 1671 页)
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