Page 56 - 《精细化工》2020年第9期
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·1770· 精细化工 FINE CHEMICALS 第 37 卷
收原子光谱法 [29] 、电感耦合等离子体质谱法 [30] 、原 加入装有氯化亚砜（1.21 g，10.0 mmol）的 100 mL
子吸收光谱法 [31] 、电感耦合等离子体发射光谱法 [32] 。 三口圆底烧瓶中，加热到 80 ℃，反应 5 h 后，用薄
2+
然而，大多数方法在测定葡萄酒中 Cu 时都需要在 层色谱（TLC）检测反应完毕，展开剂为石油醚/乙
分析前进行萃取和预浓缩。这个过程耗时长，成本 酸乙酯（体积比 3∶1）。反应液直接真空旋蒸，得
高。近年来，荧光探针被认为是一种快速、廉价、 白色固体吡啶甲酰氯（Ⅱ）。
高灵敏度的微量元素检测工具 [33-35] 。目前，已报道 将 2- 苯并噻唑乙腈 （ 化合物Ⅲ ： 1.00 g ，
2+
的 Cu 荧光探针，大多数用于生物成像 [36-44] ，而用 5.81 mmol）、哌啶（0.58 g, 7.16 mmol）、三氯甲烷
2+
于葡萄酒中 Cu 检测的荧光探针少有报道。因此， （10 mL）加入到 50 mL 单口烧瓶中，搅拌升温至
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开发高灵敏性和高选择性地检测葡萄酒中 Cu 的荧 40 ℃；并将 6-羟基-2-萘甲醛（化合物Ⅳ）（1.74 g，
光探针具有重要意义。 9.99 mmol）溶解到 20 mL 三氯甲烷中，逐滴加入到
2+
为了开发快速、高效地检测葡萄酒中 Cu 的荧 上述反应混合液中，并升温至 70 ℃，反应 4 h，用
光探针，本研究以 2-吡啶甲酸和(E)-2-苯并噻唑-3- 薄层色谱（TLC）检测反应完毕，展开剂为石油醚/
(6-羟基萘)丙烯腈为原料，通过酯化反应合成了(E)- 乙酸乙酯（体积比 3∶1）。冷却至室温，真空抽滤，
6-[2-(苯并噻唑-2-基)-2-氰基乙烯基]-2-萘吡啶甲酸 经三氯甲烷重结晶得微黄色黏稠产物（Ⅴ），产率
1
2+
酯（P1），并将其用于葡萄酒和啤酒中 Cu 的检测， 60%。HNMR(300 MHz, DMSO-d 6 )，δ: 10.37 (s, 1H),
2+
以期为开发识别性能良好，实用性强的 Cu 检测方 8.49 (s, 1H), 8.45 (s, 1H), 8.18 (t, J = 7.3 Hz, 3H),
8.08 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.90 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.86
法提供参考。
(d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.58 (t, J = 7.7 Hz, 1H), 7.51 (t,
13
J = 7.6 Hz, 1H), 7.23~7.15 (m, 3H) 。 CNMR
1 实验部分
(75 MHz, DMSO-d 6 ), δ: 164.15, 158.81, 153.44,
148.83, 137.08, 134.69, 134.18, 131.72, 127.55,
1.1 材料与试剂 127.53, 127.48, 127.24, 126.58, 125.28, 123.45,
2-吡啶甲酸、6-羟基-2-萘甲醛、2-苯并噻唑乙 122.87, 120.43, 117.13, 109.65, 103.47。
腈、哌啶、4-二甲氨基吡啶、半胱氨酸、高半胱氨 1.3.2 P 1 的合成
酸、乙二胺、氨水、苯胺、L-苯丙氨酸、脯氨酸、 将化合物Ⅱ（2.04 g，14.4 mmol）和Ⅴ（3.99 g，
L-赖氨酸、L-丝氨酸、三氯甲烷、乙腈、二甲基亚 12.2 mmol）溶解于三氯甲烷中，逐滴滴加 4-二甲氨
砜，均为 AR，北京伊诺凯科技有限公司；CuSO 4 、 基吡啶（DMAP）（1.56 g，14.4 mmol），回流搅拌 7 h，
CaCl 2 、KCl、NaCl、MgCl 2 •6H 2 O、NaS、NaHSO 3 、 冷却至室温，旋蒸，柱层析分离纯化（展开剂为体
Na 2 SO 3 、Na 2 SO 4 、FeS、NH 4 Cl、NaF、NaBr、KI， 积比 10∶1 的石油醚和乙酸乙酯），得黄色黏稠状产
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均为 AR，北京半夏有限公司。3 种啤酒品牌分别为 物 1.63 g，产率 31.0%。HNMR (300 MHz, DMSO-d 6 ),
燕京（A）、青岛（B）、纯生（C）；3 种葡萄酒品牌 δ: 8.73 (d, J = 4.2 Hz, 2H), 8.33 (d, J = 7.9 Hz, 2H),
8.17 (d, J = 7.7 Hz, 2H), 8.10 (d, J = 7.5 Hz, 2H), 8.04
分别为斯诺穆云红葡萄酒（D）、卡尔普葡萄红酒（E）、
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(td, J = 7.8、1.7 Hz, 2H), 7.64~7.45 (m, 6H)。 CNMR
醉慕甜红葡萄酒（F），均为市售。
(75 MHz, DMSO-d 6 ), δ: 169.49, 154.22, 150.80,
1.2 仪器与设备 150.44, 138.36, 135.86, 127.10, 126.62, 126.45,
AV300 MHz 核磁共振波谱仪，瑞士 Bruker 公 123.77, 123.04, 120.83。HRMS(ESI), C 26 H 15 N 3 O 2 S:
+
司；Cary-50 紫外-可见分光光度计，美国瓦里安公 calcd. for [M+H] 434.0963, found 434.1082。
司；F-4600 荧光分光光度计，日本日立公司。 1.4 P1 的光谱性能测试
1.3 步骤 测试液的配制及测定方法：精确称取适量探针
合成路线如下所示： 溶于二甲基亚砜（DMSO）中配制成 1.0 mmol/L 母
液。向比色皿中移取 20 μL 母液，并用 PBS 缓冲溶
液（pH 7.0）/乙腈（体积比为 4∶1）定容至 2 mL。
2+
滴加不同量 Cu 水溶液，配成含不同浓度 Cu 2+
（0~900 μmol/L）的荧光探针溶液。测试参数设置：
激发波长 λ ex=311 nm，狭缝宽为 5.0 nm，温度为 25 ℃。
pH 适用范围实验：将 20 μL（1.0 mmol/L）荧
光探针溶液加入到 2 mL PBS 缓冲溶液（pH 3.0~
7.4）/乙腈（体积比为 4∶1）体系中，再加入 40 μL
1.3.1 化合物Ⅴ的合成 （10 mmol/L）Cu 溶液，记录 388 nm 处荧光发射峰。
2+
将 2-吡啶甲酸（化合物Ⅰ：1.05 g，8.5 mmol） 响应时间实验：将 20 μL（1.0 mmol/L）荧光探
