Page 162 - 《精细化工》2021年第3期

·582· 精细化工 FINE CHEMICALS 第 38 卷

数，在 96 孔细胞培养板中每孔加入 100 μL 细胞悬 肿瘤细胞的增殖抑制率分别为 97.45%、96.04%、
液，置于 37 ℃，体积分数 5% CO 2 培养箱中培养 97.10%和 97.64%，其抑制率均在 95%以上；化合物
24 h，将提前配制好的不同浓度的待测化合物溶液 Ⅴe 对上述 4 种人体肿瘤细胞的增殖抑制率分别为
加入到 96 孔板的每个微孔中，置于 37 ℃、体积分 96.88%、94.21%、96.32%和 97.29%，其中，对 Hela、
数 5% CO 2 氛围中培养 72 h 后，每孔加入 20 μL（质 PC-3 及 Hep G-2 3 种人体肿瘤细胞的增殖抑制率均
量浓度为 5 g/L）MTT 溶液，继续培养 4 h，弃去上 在 95%以上，对 MDA-MB-231 的抑制率也大于 94%；
清液，每孔加入 150 μL DMSO 溶解，摇床振荡 10 min 化合物Ⅴc 对上述 4 种人体肿瘤细胞的增殖具有显
混匀，用酶标仪测定 490 nm 处的吸光度（A）。根据 著的抑制活性，其中，对 Hela 的抑制率超过 90%；
式（1）计算样品的抑制率： 化合物Ⅴa、Ⅴb 对 4 种肿瘤细胞增殖具有较好的抑
A  A 制活性，其抑制率均超过 50%；化合物Ⅴf 的抗肿
 /%  c s  100 （1）
A  A b 瘤活性较差。当 N-[4-(异海松酰胺基)苯基]-杂环磺
c
式中：η 为抑制率，%；A c 为不加药的对照组吸光度； 酰胺类化合物的浓度为 10 μmol/L 时，其抑制率均
A s 为加药组细胞吸光度；A b 为空白组（指的是不加 较低，抗肿瘤效果不明显，说明药物浓度对抗肿瘤活
药物也不加肿瘤细胞，但其他的溶液如 1.3 节中提到 性具有较大的影响。将表 1 的体外抗肿瘤活性进行
的 MTT 溶液、DMSO 溶液等都是加的）吸光度；（4） 初步构效关系分析，当杂环上引入氯原子时，化合
细胞形态学观察，将加药后的 96 孔细胞培养板置于 物对肿瘤细胞的抑制率增强，其中，N-[4-(异海松酰
37 ℃，体积分数 5%CO 2 氛围中培养 72 h 后，在倒置 胺基)苯基]-吡啶类磺酰胺类化合物在吡啶环上引入
显微镜下进行细胞学观察，显微镜放大倍数为 100”。 氯原子后抗肿瘤活性明显增强，而未引入氯原子的
吡啶类化合物Ⅴf 抗肿瘤活性较差；喹啉环上引入
2 结果与讨论 氯原子，化合物的抗肿瘤活性有所提高，但引入氟

原子的化合物的抗肿瘤活性却有所下降。根据表 1
2.1 结构表征 中各化合物对人体 4 种肿瘤细胞的增殖抑制活性研
以异海松酸为原料，先将其酰氯化制得异海松酸
究，选取对抗肿瘤活性较好的化合物Ⅴc、Ⅴd、Ⅴe
酰氯（Ⅱ），同时杂环类磺酰氯与对苯二胺发生酰胺
来研究其半抑制浓度（IC 50 ），并选用高效、广谱的
化反应生成中间产物Ⅳ，然后化合物Ⅱ再与中间体
天然产物抗癌剂紫杉醇和临床上应用较广的抗癌剂
Ⅳ发生酰胺化反应，以 50.7%~88.7%的收率制得了 5-氟尿嘧啶（5-FU）作为阳性对照，同时选取对肿
6 个 N-[4-(异海松酰胺基)苯基]-杂环磺酰胺类化合物
瘤细胞毒性较好的化合物Ⅴd 和Ⅴe 考察其对人体
Ⅴa~Ⅴf。
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采用 FTIR、 HNMR、 CNMR 和 MS 对合成的 正常细胞——人脐静脉内皮细胞（HUVEC）的细胞
毒性，结果见表 2。
化合物进行了结构表征。其中，化合物Ⅴa~Ⅴc 和
Ⅴd~Ⅴf 分别为 N-[4-(异海松酰胺基)苯基]-喹啉类
表 1 N-[4-(异海松酰胺基)苯基]-杂环磺酰胺类化合物对
磺酰胺化合物和 N-[4-(异海松酰胺基)苯基]-吡啶类
肿瘤细胞的抑制率
磺酰胺化合物。 Table 1 Inhibitory rates of N-[4-(isopimaramid)phenyl]-
以化合物Ⅴa 为例，IR 数据显示，在 3440~ heterocyclic sulfonamide compounds against
3270 cm –1 附近出现了 N—H 的伸缩振动吸收峰， cancer cell lines
–1
1565 cm 出现了 C==N 的伸缩振动吸收峰，1115 cm –1 化合物 浓度/ 抑制率/%
(μmol/L) Hela MDA-MB-231 PC-3 Hep G-2
出现—SO 2 —的伸缩振动吸收峰，说明化合物Ⅴa 已
Ⅴa 100 58.71 66.25 61.32 65.53
成功合成。
10 0.41 1.88 6.27 4.45
2.2 抗肿瘤活性分析
Ⅴb 100 69.41 58.44 56.10 51.58
采用 MTT 法分别测定了 N-[4-(异海松酰胺基)苯 10 2.19 2.50 3.66 4.34
基]-杂环磺酰胺类化合物在浓度为 100 和 10 μmol/L Ⅴc 100 91.77 88.44 79.44 89.10
时对 Hela、MDA-MB-231、PC-3 和 Hep G-2 4 种人 10 0.14 2.81 2.09 6.33
体肿瘤细胞增殖的抑制活性，结果见表 1。 Ⅴd 100 97.45 96.04 97.10 97.64
10 0.43 4.27 1.35 9.43
由表 1 可知，当 N-[4-(异海松酰胺基)苯基]-杂
Ⅴe 100 96.88 94.21 96.32 97.29
环磺酰胺类化合物的浓度为 100 μmol/L 时，除化合 10 12.20 1.22 9.86 18.99
物Ⅴf 外，其他化合物的抗肿瘤活性均优于改性前的
Ⅴf 100 9.60 3.44 4.36 18.76
母体化合物异海松酸，化合物Ⅴd、Ⅴe 对 Hela、 10 0.27 2.19 0.17 3.99
MDA-MB-231、PC-3 及 Hep G-2 这 4 种人体肿瘤细 IPA 100 28.16 22.65 10.34 39.58
胞都具有良好的抑制率：化合物Ⅴd 对上述 4 种人体 10 11.59 12.0 7.38 2.91