Page 83 - 《精细化工》2021年第8期
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第 8 期                     龚孟翔，等:  基于静电纺丝制备的聚乙烯醇/高岭土止血膜                                  ·1577·


            艺，能将高分子聚合物、金属氧化物、碳、金属、                             加入高岭土，制成高岭土含量 0、0.1%、0.5%、1.0%、
                                                [6]
            复合材料等各类材料固化并生成纤维丝 。目前，                             2.0%（以 PVA 溶液的质量为基准，下同）的静电纺丝
            人们可以通过静电纺丝工艺来制备过滤膜、生物发                             止血膜母液，依次记为 ML0、ML01、ML05、ML1、
            光材料、生物组织支架等。该工艺因其良好的材料                             ML2。
            成型能力、快速制备能力和较低的制备成本而在工                             1.2.2   静电纺丝止血膜的制备
            业界和学术界得到较为广泛的应用                 [7-10] 。静电纺丝           取 2 mL 上述母液进行电喷射打印，电纺电压
            工艺可以在短时间内实现聚合物聚集体以纤维形式                             为 12.75 kV，电纺速度为 1 mm/s，电纺环境温度为
            形成膜结构。研究表明，膜或网状结构可以帮助止                             室温，针尖与基底之间的距离为 15 cm，电纺时保
            血材料快速形成紧密的凝块，并有助于进一步提高                             持无风密闭状态，防止强空气流通对成膜造成影响。
            止血材料的止血效果          [11-12] 。因此，静电纺丝技术在             将 ML0、ML01、ML05、ML1、ML2 所打印的止血
            止血材料的制备领域具有较为广阔的应用前景，但                             膜依次命名为 PK0、PK01、PK05、PK1、PK2。
            目前还鲜见报道。                                           1.3    表征
                 本文拟以聚乙烯醇（PVA）作为止血材料的母                         1.3.1  SEM 测试及元素分析
            体结构，混入止血效果好、无热效应副作用的高岭                                 对 PK0 和 PK2 进行 SEM 测试，测试前保持止
            土 [13-14] ，基于静电纺丝工艺来制备止血膜，考察止                      血膜干燥且整洁，并进行喷金处理；同时利用元素
            血膜的形貌、止血效果和生物相容性，并探究其止血                            分析仪（EDS）对比两种止血膜的元素分布情况。
            机理。                                                1.4   止血性能测试
                                                               1.4.1   体外止血性能测试
            1   实验部分
                                                                   根据文献[15]采用体外复钙凝血实验探究材料
            1.1   试剂与仪器                                        的止血性能。将 80 μL 0.2 mol/L 氯化钙水溶液加
                                                4
                 PVA〔相对分子质量为(4.0~4.5)×10  Da〕、高岭               入 2 mL 抗凝猪血中，然后立即加入 50 mg 止血材
            土、无水氯化钙、水合氯醛、磷酸盐缓冲液（PBS）、                          料（普通纱布、PK0~PK2 或速即纱），保持测试温
                                                               度 37 ℃，并用静音混合器均匀混合材料与血液（转
            二甲基亚砜（DMSO），AR，天津市大茂化学试剂
            厂；曲拉通-100（TX-100），AR，上海阿拉丁生化                       速 30 r/min，振动角变化范围 0~135°），测量血液达到
            科技股份有限公司；新鲜猪血，用质量分数 10%的                           凝固的时间。实验采用空白对照作为阴性对照组，同
            枸橼酸钠溶液进行抗凝化处理，大连铁岭屠宰场；                             时每组样品重复测试 3 次。
                                                               1.4.2  SD 大鼠肝损伤止血模型
            噻唑蓝（MTT）细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒、
            高糖培养基（DMEM）、胎牛血清（FBS），江苏凯                              SD 大鼠肝损伤止血模型的构建参照文献[16]。
                                                               采用的 SD 大鼠并无性别要求，体重为 180~200 g。
            基生物技术股份有限公司；枸橼酸钠普通生化真空
            采血管（10 mL），鲁食药监械生产；康宁 Costar                       绝食 12 h 后，SD 大鼠在实验前用 2.5 mL 水合氯醛
            3524/3599 24 孔、96 孔细胞培养板，美国康宁公司；                   （质量分数 5%）溶液麻醉，并固定在实验台上。用
            活化部分凝血活酶时间（APTT）和凝血酶原时间                            手术剪暴露大鼠肝脏后，用手术刀在肝脏创制“X”
            （PT）试剂盒，上海太阳生物技术有限公司；SD 大                          型致命伤口，并立即施加止血材料。其中，伤口长
                                                      TM
            鼠，辽宁长生生物技术有限公司；速即纱（Surgicel ），                     度为 2~3 cm，深度为 0.2~0.3 cm。实验中所采用的
            药用级，美国强生公司。除特殊说明外，文中所涉及                            止血材料为 50 mg，并设置空白对照为阴性对照，
            用水均为去离子水或二次去离子水。                                   而施加 50 mg 速即纱作为阳性对照，测量并记录伤
                 QUANTA 450 型 钨灯丝 扫描电子 显微 镜                    口部位的失血量与止血时间。每个样品重复测量 3
            （SEM），美国 FEI 公司；WH-986 型静音混合器，                     次。所有的实验步骤严格遵循国家卫生研究院
            中国其林贝尔仪器制造有限公司；Thermo Fisher                       （NIH）关于实验动物的培育与使用的相关指导
            Multiskan FC 酶标仪，美国 Thermo 公司；C2000-1              （No. 85-23 Rev. 1985），同时实验中所有的动物
            型单通道凝血分析仪，北京普利生生物科技开发有                             实验都经由大连理工大学生物医学伦理委员会批
            限公司；BB15 型 CO 2 细胞培养箱，美国 Thermo                    准进行。
            LaserLab 公司。                                       1.4.3   全血凝血动力学测试
            1.2   材料制备                                             全血凝血动力学被认为是判定止血材料止血性
            1.2.1   静电纺丝止血膜母液的配制                               能是否优良的一种有效手段，可以在一定程度上反
                 配制质量分数 10%的 PVA 水溶液，向其中均匀                     应所生成凝血块的紧密程度，全血凝血动力学指数
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