Page 172 - 《精细化工》2021年第9期

·1886· 精细化工 FINE CHEMICALS 第 38 卷

明显偏少，鱼体更通透，说明 HA 原料无抑制黑色 部伤口处有大量的中性粒细胞，而 MHAF60 组斑马
鱼尾部中性粒细胞明显偏少，说明 MHAF60 材料具
素作用，而添加了富勒烯的 MHAF60 组（富勒烯 C 60
质量分数为 0.001%）对黑色素的产生具有显著的抑 有较好的抗炎效果。
制作用，并且强于 V C 。 2.8 斑马鱼刺激性模型分析
2.7 斑马鱼切尾模型分析 为了检测原料是否会产生刺激反应，采用斑马
图 9 为样品对斑马鱼体尾部修复效果图。由图 鱼氧化应激反应水平的方法进行考察。进行活性氧
9 可见，所标识部位为鱼再生尾鳍，质量浓度 20 mg/L （ROS）染色，采用 DCFH-DA 细胞内活性氧探针检
V C 组和质量浓度 20 mg/L HA 组再生出来的尾鳍呈 测，在 Leica F 205 MA 荧光显微镜下拍照，其中，绿
锯齿状褶皱、平滑度较差，说明 V C 和 HA 修复作用 色荧光代表氧化应激水平。图 11 为样品对斑马鱼氧化
应激反应效果图。由图 11 可见，对照组和样品处理
较差，而添加了富勒烯的 MHAF60 组（富勒烯 C 60
质量分数为 0.001%）鱼尾鳍无锯齿状且平滑无褶 组绿色荧光强度没有差异性，说明 MHAF60、V C 和
皱，并且与未切尾组接近，说明 MHAF60 产品具有 HA 均不会引起氧化应激反应，不会产生刺激作用。
较好的修复作用。图 10 为样品对斑马鱼切尾后抗炎
效果图。

图 11 鱼液对照组（a）、V C 组（b）、HA 组（c）和 MHAF60
组（d）斑马鱼氧化应激反应效果图
图 9 未切尾对照组（a）、切尾对照组（b）、V C 组（c）、
Fig. 11 Pictures of control group (a) , V C group (b), HA
HA 组（d）和 MHAF60 组（e）斑马鱼尾部修复效 group (c) and MHAF60 group (d) oxidative stress
果照片 effect of zebrafish
Fig. 9 Pictures of uncut tail group (a), cut tail group (b),
V C group (c), MHA group (d) and MHAF60 group 2.9 产品品质控制
(e) in repairing the tail of zebrafish
进行放大生产后，已年产 100 t 水溶性富勒烯
C 60 原液，产品在宁波检验检疫局进行了皮肤外用原
料安全性评价，包括多次皮肤刺激性实验、急性经
口实验、急性经皮实验、急性眼刺激-腐蚀性实验、
皮肤变态反应实验和皮肤光毒性实验。结果表明，
产品安全无毒副作用；产品中微生物和重金属含量
检测均符合《化妆品安全技术规范 2015》标准；产
品经 GPC 检测无任何有机溶剂残留。

3 结论

图 10 切尾对照组（a）、V C 组（b）、HA 组（c）和 MHAF60
采用物理分散的方式制备了两款水溶性富勒烯
组（d）组斑马鱼切尾后抗炎效果图
Fig. 10 Pictures of cut tail group (a), V C group (b), HA 材料 MHAF60 和 PPF60，通过 UV-Vis、FTIR、DLS、
group (c) and MHAF60 group (d) anti-inflammatory EPR、气相色谱、细胞实验及斑马鱼实验对材料进
effect of zebrafish 行了表征及功效实验。结果表明，富勒烯 C 60 依然

由图 10 可见，斑马鱼切尾后，尾部伤口处炎症 保持了其特征吸收；并在水中均匀分散，MHAF60
水平上升的时候，中性粒细胞的数量也相对增高， 和 PPF60 粒径分别为 368.5 和 500.6 nm，两种材料
尾部伤口处中性粒细胞数量越少，说明材料抗炎效 均无有机溶剂残留。MHAF60-50 淬灭自由基的能力
果越好。可以发现，切尾对照组、V C 组和 HA 组尾 要显著优 于 PPF60-50 、 V C 和水 溶性虾青 素 。