Page 155 - 《精细化工》2022年第1期

第 1 期 梁 雪，等: γ-聚谷氨酸防晒纳米粒子的制备及性能 ·145·

光谱仪，通过衰减全内反射法（ATR）获得聚合物 皮，在接收池中加入体积比为 1∶1 的无水乙醇和
–1
在 650~4000 cm 范围内的红外光谱，每个光谱扫描 PBS 缓冲液的混合溶液（接收液）。将组装好的 Franz
–1
32 次，分辨率为 0.056 cm ；以氘代二甲基亚砜 扩散池置于透皮扩散仪中，在 35 ℃、转速为 500
（DMSO-d 6 ）为溶剂，以四甲基硅烷（TMS）为内 r/min 的条件下实验。2、4、8 h 后分别取 50 μL 接
标，利用核磁共振波谱仪测定双亲大分子的核磁氢 收液待测，同时补给新鲜的接收液。通过超高效液
谱，并依据特征峰积分面积之比计算出小分子 L-phe 相色谱仪（HPLC）测定接收液中有机防晒剂的浓度，
对 γ-PGA 主链的改性率。 进样量为 5 μL，并将 UV 检测器波长设定为 260 nm。
胶体粒子的尺寸及形貌：将胶体粒子的溶液稀 流动相由甲醇-水〔V(甲醇)∶V(水)=9∶1〕组成，流速
释合适倍数后使用纳米粒度及 Zeta 电位分析仪测定 为 1 mL/min。每组实验重复 3 次以确保测试结果的
胶体粒子的粒径以及粒径分布情况；将胶体粒子水 准确性。
分散液滴于铜网上，在室温下自然干燥，使用 TEM 细胞毒性测试：参照文献[23]中方法进行细胞
在 200 kV 下观察干态胶体粒子形貌。 毒性测试。选用鼠胚胎成纤维细胞（L929）作为评
纳米粒子的负载量与负载率测定：采用离心法 [22] 价细胞。研究了 γ-PGA 防晒纳米粒子不同含量
测定聚合物纳米粒子的负载量与负载率。将 1.2.2 节 （10%、30%，以细胞培养液体积为基准，下同）与
制备的负载不同含量单种有机防晒剂的纳米粒子分 不同培养时间（24、48 h）对 L929 细胞生长状态及
散液放入离心机以 12000 r/min 离心 1 h，除去上清 细胞活力的影响。
液获得沉淀即为 γ-PGA 纳米粒子，再加入 1 mL 防晒指数测试：分别使用 γ-PGA 防晒纳米粒子
DMSO 溶解，用双光束紫外-可见分光光度计测量其 和相 同含 量未 负载 的 3 种防 晒剂 的混 合物
吸光度。利用式（1）可计算出聚合物纳米粒子中有 〔m(AVB)∶m(OMC)∶m(BP-3)= 5∶2∶3，3 种防晒
机防晒剂的负载量；有机防晒剂的负载率是指被负 剂的总质量分数为 32%〕制备防晒霜，控制这两种
载的有机防晒剂质量与原始所用的有机防晒剂质量 成分在防晒霜配方中所占含量均为防晒霜配方整体
之比，利用式（2）可计算出有机防晒剂的负载率： 质量的 10%，配方如表 1 所示。
EC/%  (m / m ) 100 （1）
0 1 表 1 防晒霜的配方
式中：EC（%）为负载量；m 0 为纳米粒子中化学防 Table 1 Formula of sunscreen cream
晒剂质量，g；m 1 为聚合物质量，g。 项目 标准中文名称 质量分数/%
EE/%  (m / m ) 100 （2） 水相 水 余量
0 2
式中：EE（%）为负载率；m 0 为纳米粒子中有机防 1,3-丁二醇 3.0
甲基葡糖醇聚醚-20 3.0
晒剂质量，g；m 2 为所用有机防晒剂质量，g。
甘油 2.0
光稳定性及广谱防晒性：将 γ-PGA 防晒纳米粒 硫酸镁 0.5
子水分散液稀释到适宜浓度，并分别配制相应浓度 透明质酸钠 0.1
的溶解有 AVB、OMC 和 BP-3 3 种有机防晒剂的混 泛醇 0.2
神经酰胺 0.1
合溶液，命名为未负载的防晒剂组合物。使用闸门
烟酰胺 0.8
式 UV 烘箱在距离灯管光照度计 80 mm 高度处照射 柠檬酸 0.1
负载防晒剂的纳米粒子水分散液和未负载的有机防 乙二胺四乙酸二钠 0.05
晒剂溶液 400 s（相当于平均暴露于太阳光 4 h [13] ）。 油相 环五聚二甲基硅氧烷 5.0
聚二甲基硅氧烷 6.0
使用紫外-可见分光光度计测定照射前后纳米粒子
鲸蜡硬脂醇聚甲基硅氧烷 10.0
水分散液和未负载的有机防晒剂溶液的紫外吸光 月桂基 PEG-9 聚二甲基硅氧乙基聚二 2.0
度在 320~400 nm（UVA）和 280~ 320 nm（UVB） 甲基硅氧烷
二硬脂二甲胺锂蒙脱石 1.0
区域降低的百分比来表征有机防晒剂的光稳定性。
硬脂酸 1.0
皮肤渗透性：取一块新鲜猪皮，去除毛和皮下 鲸蜡基 PEG/PPG-10/1 聚二甲基硅氧烷 1.0
脂肪层后，用 PBS 缓冲液（pH=7.4）浸泡冲洗后剪 生育酚乙酸酯 0.1
成边长为 2.5 cm 的正方形。将猪皮置于 Franz 扩散 红没药醇 0.2
异戊二醇 0.2
池的进样池和接收池之间，其中角质层面向进样池。
甘草亭酸 0.1
在进样池中分别加入 γ-PGA 防晒纳米粒子水分散液 香精 0.2
和未负载的 3 种防晒剂的 DMSO 混合溶液 1 mL 后加相 γ-PGA 防晒纳米粒子 10
〔m(AVB)∶m(OMC)∶m(BP-3)= 5∶2∶3，3 种防晒 注：PEG 为聚乙二醇；PPG 为聚丙二醇；10/1 的含义为
剂的总质量分数为 32%〕，使溶液均匀地完全覆盖猪 PEG 与 PPG 的共聚物质的量比为 10∶1。