Page 71 - 《精细化工》2022年第3期

第 3 期 杜 梦，等: 无载体水溶性聚卟啉纳米粒用于肿瘤的光动力治疗 ·493·

通过计算可知，P-1O、P-3O、P-5O 的单线态氧 从图 3b 可知，在弱酸条件下纳米粒的粒径差别
产率分别是 TCPP 单体的 1.34 倍、1.77 倍、1.95 倍 不大，在碱性条件下，粒径有变大的趋势。碱性介
（图 2）。由此可知，引入柔性醚链成功抑制了卟啉 质下，可能 P-5O 表面少量未反应的羧基与介质中的
单体间的 π-π 堆积效应，提高了单线态氧的产率， 负电荷由于静电作用相排斥，使得纳米粒在碱性介
且随着链长的增加抑制能力显著增强。 质中较疏松。对纳米粒的血清稳定性进行了测试，
2.4 纳米胶束的表征以及稳定性测试 如图 3c 所示。纳米粒粒径在水中、PBS 缓冲液中以
由于 P-5O 具有较好的水溶性以及单线态氧产 及含有体 积分数 10% FBS 的 PBS 缓冲 液
率，所以选择 P-5O 自组装成纳米粒并对纳米粒进行 〔PBS(10%FBS)〕中变化不大，具有良好的血清稳
了一系列的稳定性测试，纳米粒制备方法以及稳定 定性。对母液中的纳米粒进行的稀释稳定性研究见
性研究方法详见 1.4 节。对 P-5O 溶于水中自组装形 图 3c。从图 3c 可以看出，P-5O 纳米粒在稀释 5~100
成的纳米粒进行了 SEM 测试（图 3a），结果表明， 倍时，粒径几乎没有变化。纳米粒的冻干稳定性结
形成的纳米粒粒径在 100 nm 左右。随后，在不同 果见图 3b。从图 3b 可知，冻干前后纳米粒的稳定
pH 的环境下测试纳米粒的粒径（图 3b）。 性良好。图 3b 证明纳米粒在 3 d 内具有良好的稳定

性。pH 稳定性表明，P-5O 纳米粒可以在弱酸环境
下保持良好的稳定性；血清稳定性表明，P-5O 纳米
粒可以在模拟的人体组织液以及血液中保持稳定；
稀释稳定性表明，P-5O 纳米粒可以在稀释至 100 倍
时仍维持良好的稳定性；冻干稳定性表明，P-5O 纳
米粒可以在40 ℃下保存；时间稳定性表明，P-5O
纳米粒可以在一定时间内维持良好的稳定性。综上
所述，P-5O 纳米粒在模拟的人体生理环境中具有良
好的稳定性。
2.5 聚卟啉体外光暗毒性评价
采用 MTT 法对 P-5O 纳米粒进行了体外光暗毒
性评估 [34-35] ，结果如图 4 所示。

图 4 对 293T 的体外暗毒性以及对 Hep1-6 的体外光/暗
毒性
Fig. 4 In vitro dark toxicity to 293T and in vitro photo
toxicity and dark toxicity to Hep1-6

由图 4 可知，P-5O 纳米粒在正常细胞（293T）

中具有较低的暗毒性，在较高浓度下（50 μmol/L）
图 3 纳米粒的 SEM 图（a）；纳米粒在不同 pH 下、冻干前 细胞存活率依旧高于 80%，证明其具有一定的安全
后以及在 PBS（pH=7.16）中 3 d 内的稳定性（b）；纳
性。如图 4 所示，P-5O 纳米粒在肿瘤细胞（Hep1-6）
米粒在不同溶剂下以及不同稀释倍数下的稳定性（c）
Fig. 3 SEM images of nanoparticles (a); Stability of 中同样具有较低的暗毒性，在较高浓度下（50 μmol/L）
nanoparticles at different pH, before or after 细胞存活率高于 80%，但是在激光照射下，Hep1-6
lyophilization, and in PBS (pH=7.16) within 3 d 细胞存活率显著下降至 30%以下，证明其具有明显
(b); Stability of nanoparticles in different solutions
and at different dilution times (c) 的 PDT 杀死肿瘤细胞的能力。仅光照组的结果显示，