Page 67 - 《精细化工》2022年第3期
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第 3 期 杜 梦，等: 无载体水溶性聚卟啉纳米粒用于肿瘤的光动力治疗 ·489·
四苯基卟啉（TPP）能高效地产生单线态氧， 1 实验部分
且具有相对较低的暗毒性 [14-16] ，但由于其平面刚性
共轭结构，在水性介质中容易产生 π-π 堆积，随着 1.1 试剂与仪器
浓度的增加趋于聚集，引发聚集诱导猝灭（ACQ）， 二乙二醇（质量分数 99%）、六甘醇（质量分数
ACQ 会大大降低单线态氧量子产率，削弱 PDT 的 97%）、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐
效果 [17-21] 。近年来，国内外研究者为了避免具有大 （EDC·HCl，质量分数 99%）、对二甲氨基吡啶
环共轭结构的光敏剂发生 ACQ 效应采取了不同的 （DMAP，质量分数 98%）、1,3-二苯基异苯并呋喃
措施，如使用聚合物对光敏剂进行物理包封 [22] 、设 （DPBF，分析纯），上海萨恩化学技术有限公司；
计合成卟啉偶联物 [23-24] 、通过引入金属离子增大卟 三缩四乙二醇（3O-2OH，质量分数 99%），上海麦
啉的空间位阻或引入氟原子影响共轭结构的相互作 克林生化科技有限公司；四羧基苯基卟啉（TCPP，
用 [25-27] 、通过引入柔性链段推开光敏剂小分子 [28-31] 质量分数 97%），上海楷树化学科技有限公司；磷酸
以及通过引入具有空间位阻结构的取代基抑制光敏 盐缓冲溶液（PBS，pH 7.2）、胎牛血清（FBS），格
剂分子自身的聚集倾向 [32-33] 等。以上措施可以有效地 来赛生命科技（上海）有限公司；乙醚、甲醇、N,N-
避免光敏剂小分子的自聚集，提高单线态氧的产率。 二甲基甲酰胺（DMF）、三氯甲烷、四氢呋喃、甲苯、
但是为了解决大部分光敏剂水溶性差导致的不利于 乙腈（分析纯），天津市科密欧化学试剂有限公司。
给药及药物输送且在体内循环时间短等问题，仍然 Varian DLG400 核磁共振波谱仪，美国 Varian
需要引入其他的组分来提高光敏剂的生物相容性。 公司；ZS90 纳米粒度与 Zeta 电位分析仪，英国马
为了解决上述问题，本课题组前期通过在卟啉 尔文公司；基质辅助激光解吸飞行时间质谱仪
单体间引入柔性链，并用两亲性聚乙二醇-聚乳酸 （MALDI-TOF）、1515 型凝胶色谱仪（GPC），美国
（PEG-PLA)载体进行共沉淀形成纳米粒，有效抑制 Waters 公司；UV8543 紫外-可见分光光度计，日本
了卟啉类光敏剂的 ACQ 效应，提高了光敏剂的单线 岛津仪器公司；NOVA NanoSEM 450 场发射扫描电
态氧产率、水溶性和体内循环时间等 [34-35] 。但是， 子显微镜（SEM），美国 FEI 公司。
在形成纳米粒的过程中，仍会有大量的疏水性卟啉 1.2 水溶性聚卟啉的合成
单体聚集而导致载药量较低，除此以外，由于引入 水溶性 P-3O 的合成路线如下所示。
了没有治疗功效的 PEG-PLA 载体会对正常组织造
成一定的细胞毒性及免疫反应。为了克服上述问题，
本文通过引入亲水性的柔性醚链合成了一系列卟啉
聚合物，通过对聚合条件筛选获得高相对分子质量
且具有良好水溶性的聚卟啉 P-5O。P-5O 可以直接
溶解在水中，具有最优的单线态氧产率，在不借助
载体的情况下自组装形成纳米粒，并对所形成的纳
米粒稳定性以及体外光暗毒性进行了测试。水溶性
聚卟啉的合成路线及自组装过程如下所示〔图中
EDC·HCl 为 1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺
盐酸盐、DMAP 为对二甲氨基吡啶、TCPP 为四羧
以单体为 3O-2OH 为例简述水溶性 P-3O 的制备
基苯基卟啉〕。
方式。称取 TCPP（25 mg，0.032 mmol）、EDC•HCl
（ 49 mg， 0.256 mmol）和 DMAP（ 15.6 mg，
0.128 mmol）溶于 400 µL DMF 中，加热至 80 ℃搅
拌 10 min。然后，加入 3O-2OH（12.4 mg，0.064 mmol）
和 100 µL DMF 的混合溶液，升温至 110 ℃继续反
应 48 h。待反应结束后，将反应液在 15 mL 乙醚中
沉降，经离心收集沉淀，在室温下真空干燥过夜除
去残留的乙醚。将沉淀溶于 4 mL DMSO 和水的混
合溶剂〔V(H 2 O)∶V(DMSO)=10∶1〕中，并用截留
相对分子质量为 500 的透析袋在去离子水中透析
24 h 后，于40 ℃的冷冻干燥机中冻干，最终产物
