Page 63 - 《精细化工》2023年第4期
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す 4 ᱌                   ̮   Ϋ  喑  ぶ  : ȕ-͆⅕䚥⮱⩌➖А䅏䓴⼸ࣷ⩌➖∂ݣิⵁ⾣䔈ᆂ                            g749g


            ࣷ B. subtilis Გ⎽⮱ panD ധ఍ܳݘౕ E. coli  BL21             ⩞λᓛ⩌➖ L-๖ۙ⅕䚥-Į-㙞㓔䚣⮱≨ᕔ͚ᓰ
            (DE3)͚ᐯ⎽㶕䓫喑ϧЙࣾ⣝Გ㜗 B. subtilis panD ധ               ч̻Ꮒ➖㐀वⵡ౼ڣ͆䚛䚝ധఏ㐀Ჱ喑䒙ࡃ䓴⼸͚
            ఍㑃⴮⮱ L-๖ۙ⅕䚥-Į-㙞㓔䚣ᰶᰡ倅⮱≨ᕔȡ㏼䓴                         ᭀ๞≨喑᜽ͧ䄒䚣Ꮑ⩕⮱̭͗ͨ㺮⨣䶵                  [36] ȡͧγ㼐
            䚣႓ᕔ䉕㶕ᒮ喑䄒䛺㏱䚣ᰭ䔯⍖Ꮣহᰭ䔯 pH ܳݘ                           ̷۠䔝䬛䷅喑⻾ⵁϧঅౕࣵڣЃ➖⻺᫦䲏ևγ䄥็
            ͧ 65 Ďহ 7.0喑ᰭ䔯⍖Ꮣ̸⮱℁䚣≨ͧ 15.60 U/mg喠                 ᅊ䄂喑ᣏ㉏γ̭ψڣЃᲒ⎽⮱ L-๖ۙ⅕䚥-Į-㙞㓔䚣喑
            ౕ 37 ĎȠ300 mL Ҁ㈨͚ߍڒ 7.5 mg 䛺㏱䚣䔈㵹 8 h               ̺ह⩌➖Გ⎽⮱ L-๖ۙ⅕䚥-Į-㙞㓔䚣⾮अҀࣷڣ
            ⮱Ꮒ➖䒙ࡃ჋侹喑जᓄݝ 2.23 g/L ⮱ ȕ-͆⅕䚥              [6-7] ȡ  ᕔ䉕ຯ㶕7᝭⹧ȡLIUぶ        [38] ᄳT. castaneumᲒ⎽⮱panD
            PEI ぶ [41] ᄦ B. subtilis Გ⎽⮱ panD ധ఍䔈㵹γჇा          ധ఍䔈㵹ᐯ⎽㶕䓫喑㣤ᓄγ℁䚣≨ͧ 4.83  U/mg ⮱ L-
            䔈ࡃ喑㣤ᓄγ͑͗ᕔ㘪᣽ࡴ⮱⾮अҀ喍V68I হ I88M喎喑                     ๖ۙ⅕䚥-Į-㙞㓔䚣喑ݖ⩕ౕ 600  nm ∏䪬ั॥ٶᏓ
            ⾮अҀ䒙ࡃᏂ➖㣤ᓄ ȕ-͆⅕䚥⮱ϔ䛼ͧ 4.1 g/Lȡᑍ                      ͧ 200 ⮱䛺㏱㣹㣹⋟䔈㵹 10 mL Ҁ㈨⮱ܳឦ㶒᫆ڕ
                   [7]
            㚫䒶ぶ 䕇䓴Ⴧ◦⾮अ喑Ჱᐧγ⾮अҀ E56S喑䄒䚣                          ㏳㘋יࡃᬣ喑जᄳ 1  mol ⮱ L-๖ۙ⅕䚥䒙ࡃͧ 143
            ⾮अҀౕ 5 L 㑽͚䒙ࡃ ȕ-͆⅕䚥ϔ䛼䓫ݝγ 215 g/Lȡ                  g/L ⮱ ȕ-͆⅕䚥喑䒙ࡃ⢴䓫 80%ȡ䦵ᄦ䄒䛺㏱䚣喑
                                                       [7]
            䮑γ⾮अᩦ䕍喑ⵁ⾣ϧঅ䔅䛴ः㶕䓫წͨᰡᢏ Ƞ                             ܳݘ䔈㵹 G369A     [38] ȠK221R [43-44] ⮱ࢂ⾮अহ R98H
                         [5]
            䒪Ҁ䉕ㆿᰡᢏ Ƞⷠ〜㑧๞             [42] ぶ᫦∂᣽倅䄒䛺㏱㣹            হ K351S [45] ⮱ࣹ⾮अ喑ᰭх⾮अҀ⮱ ȕ-͆⅕䚥ϔ䛼
            L-๖ۙ⅕䚥-Į-㙞㓔䚣⮱䒙ࡃ㘪߈喑ѳ ȕ-͆⅕䚥⮱ᰭ                        ͧ 170.5 g/Lȡ
            倅ϔ䛼౴̺ࣷ E56S ⾮अҀȡ

                                    㶕 7  ̺ह⩌➖Გ⎽⮱ L-๖ۙ⅕䚥-Į-㙞㓔䚣⾮अҀࣷڣᕔ䉕
                      Table 7    L-aspartate-Į-decarboxylase mutants from different biological sources and their properties
                                                      Specific   Optimum    Optimum   Production/
               Source        Host        Mutations                                           Yield/%  References
                                                   activity/(U/mg)  temperature/Ď  pH  (g/L)
             B. subtilis  E. coli BL21(DE3)  E56S      ÿ            ÿ         ÿ       215.3   94.10    [7]
             T. castaneum  E. coli BL21(DE3)  G369A   4.80          42        6.0     162.0   91.00    [38]
             T. castaneum  E. coli BL21(DE3)  K221R   0.35          40        6.5     134.7   94.52    [43]
             T. castaneum  E. coli BL21(DE3)  K49R    0.27          42        6.5      ÿ       ÿ       [46]
             T. castaneum  E. coli BL21(DE3)  R98HȠK351S   7.05     50        7.0     170.5   95.54    [45]
             C. jeikeium   E. coli BL21(DE3)  R3K     17.31         ÿ         ÿ        22.5   67.23    [36]
                 ∕喟Ąÿą㶕⹧᱗ᰶⰥڠ្䖀ȡ

                 䮑̷䔝͑⻺ࢂ䚣∂ݣิ ȕ-͆⅕䚥ጒ㞧喑ऑ⩌㣹                        γᏌ➖⮱⩌᜽喑́ჹ侙䚥⮱Фᵩ䔉ѻλ L-๖ۙ⅕䚥喑
            ࣷⱌᵥ⩌➖͚⮱䅤⅕䚥㙞㓔䚣喍GAD喎Όڤᰶ̻ L-                          ఍ₑ喑ࣹ䚣㏔㖁∂ݣิ ȕ-͆⅕䚥ڤᰶ䒰๔⮱ጒ͇ࣾ
            ๖ۙ⅕䚥-Į-㙞㓔䚣Ⱕㆨѩߌ㘪ȡѳ䄒䚣䰭㺮⸤䚥ॎ                           ᆂ⒉߈喑ڣݣิ䌜㏬ຯఫ 7 ᝭⹧ȡ
            ৳䛈喍PLP喎҉ͧ䒲䚣᝺जיࡃ๖ۙ⅕䚥Ƞࡷ㘞⅕                                Ⱋݺ喑ᄦࣹ䚣㏔㖁∂ݣิ ȕ-͆⅕䚥⮱ᣏ㉏ͨ㺮
            䚥হࡷ㘞χ⸧䚥ࣾ⩌㙞㓔ࣺᏁ喑ܳݘ⩌᜽ ȕ-͆⅕䚥Ƞ                          䯳͚λ L-๖ۙ⅕䚥䚣হ L-๖ۙ⅕䚥-Į-㙞㓔䚣⮱ࡼ
            ➈⸧䚥হχ➈⸧䚥         [47] 喠́䄒䚣̭̀ᕔ̺倅喑䚣≨䒰                हхࡃ喑ࣹ䚣㏔㖁ݣิ ȕ-͆⅕䚥⮱᫦∂ࣷϔ䛼ຯ㶕 8
            ѻ喑㜡Ҭ䄒䚣ౕ ȕ-͆⅕䚥ጒ͇ࡃݣิ᫦䲏Ꮑ⩕ᕔ̺                           ᝭⹧ȡQIAN ぶ     [48] 䕇䓴ᄦ๔㗍ᱳ㣹Გ⎽⮱ L-๖ۙ⅕
            ᑧȡⰛݺ喑䔅⇎ᰶڠλᏁ⩕ऑ⩌㣹ࣷⱌᵥ⩌➖͚䅤                             䚥䚣হ䅤⅕䚥᷿ᱳ㣹Გ⎽⮱ L-๖ۙ⅕䚥-Į-㙞㓔䚣
            ⅕䚥㙞㓔䚣⩌ϔ ȕ-͆⅕䚥᫦䲏⮱្䖀                [36] ȡ           䚣⋟䔈㵹̺ह℁Ҹ䄰䙺喑ᓄݝγ AspA হ ADC ⮱ᰭ
            3.2  ࣹ䚣㏔㖁∂ݣิ ȕ-͆⅕䚥                                 Ҡ䚣≨߈℁ͧ(1.0~1.5)ń1喠倅Ⴔぶ           [49] ࣾ⣝喑AspA
                 L-๖ۙ⅕䚥-Į-㙞㓔䚣יࡃ L-๖ۙ⅕䚥㙞ࣨ㓔                      হ ADC ⮱ᰭхڕ㏳㘋䉕䛼℁ͧ 1ń80喑जౕ 8 h ڲ
            ധ⩌᜽ ȕ-͆⅕䚥᭜̭ₒࣺᏁ喑≮⼸キᭀȠϔ➖ੜ̭喠                          ᄳ 0.1 mol/L ⮱ჹ侙䚥䒙ࡃͧ 8.02 g/L ⮱ ȕ-͆⅕䚥ȡ
            ѳ䄒䓴⼸͚⮱ L-๖ۙ⅕䚥-Į-㙞㓔䚣ᭀࣾ⩌̺ज䔳                          ͧγ䔈̭ₒキࡃ㏔㖁ࣺᏁ喑ⵁ⾣ϧঅࣵᄳ͑⻺ᐯ⎽
            ⮱ᱧ⤳ᕔ๞≨喑ᰶᬣ䰭㺮⌨ߍ̭Ⴧ䛼⮱⸤䚥ॎ৳䛈                             䚣ധ఍ౕ E. coli BL21(DE3)ڲ䔈㵹γڞ㶕䓫ȡQIAN
            ࣯̻יࡃ喑́Ꮒ➖ L-๖ۙ⅕䚥Фᵩ䒰倅喑͒䛺䭽ݣ                           ぶ [48] ݖ⩕ᵥ㈃Ҁ㐀वѺ◦䄰ᣔ̻ധ఍ฺݣ㼐۠γ͑
            γ䄒᫦∂⮱Ꮑ⩕ȡL-๖ۙ⅕䚥䚣喍AspA喎जיࡃჹ                          ⻺䚣יࡃ᩵⢴ጛᐯ๔Ƞ̺ᭀࡼह⮱䬛䷅喑Ҭᓄ ȕ-͆
            侙䚥⩌᜽ L-๖ۙ⅕䚥喑̻ ADC 㖁वҬ⩕ᬣ喑जВ                         ⅕䚥⮱ϔ䛼䓫ݝγ 80.4  g/Lȡ䮼ऻ喑ᄳ⾮अҀ Q5
            Вჹ侙䚥ͧᏂ➖䔈㵹 ȕ-͆⅕䚥⮱ݣิȡ䄒㏔㖁ࣺᏁ                           喍BsPanD  I46V/I88M/K104S/I126* 喎̻ AspA ധ఍λ E.coli
            䖬ٺγ͚䬡Ҁ⮱ܳ⻨㏜ࡃ喑㞯㏓γ⩌ϔ᜽᱙喑ۼᄾ                             BL21(DE3)͚ڞ㶕䓫喑ᰭ㏵㣤ᓄγ 118.6  g/L ⮱ ȕ-
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