Page 112 - 《精细化工》2023年第5期
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·1032· 精细化工 FINE CHEMICALS 第 40 卷
荧光恢复率表明,RB 和 β-CD@AuNPs 在弱碱性条
件下表面都带负电,因此,RB 和 β-CD@AuNPs 通
过静电作用力相互排斥,这有利于荧光恢复 [18] 。但
是,碱性条件下荧光背景较强,因此,选用 pH 7.6
用作后续检测溶液 pH。
图 4 pH 对 β-CD@AuNPs-RB 的荧光恢复率的影响
Fig. 4 Effect of pH on fluorescence recovery rate of
β-CD@AuNPs-RB
a—β-CD@AuNPs 的紫外-可见吸收光谱和 RB 的荧光光谱;b— 2.3.2 β-CD@AuNPs 浓度对 β-CD@AuNPs-RB 检测
RB、β-CD@AuNPs+RB、β-CD@AuNPs+RB+孕酮的荧光光谱;c 体系的影响
—RB、β-CD@AuNPs+RB、β-CD@AuNPs+RB+孕酮的荧光寿命变
化 为了优化灵敏度,控制用于猝灭 RB 的 β-CD@
图 3 孕酮与 β-CD@AuNPs-RB 荧光探针的作用机制分析 AuNPs 的浓度是必不可少的 [18] 。β-CD@AuNPs 浓度
Fig. 3 Reaction mechanism analysis between progesterone 根据其粒径和紫外-可见光谱计算所得 [20] 。考察了不
and β-CD@AuNPs-RB
同浓度 β-CD@AuNPs 对 β-CD@AuNPs-RB 荧光恢复
2.3 反应条件的优化 率的影响,结果如图 5 所示。由图 5 可知,β-CD@
为了探究 β-CD@AuNPs-RB 荧光探针检测性激 AuNPs-RB 体系的荧光恢复率随着 β-CD@AuNPs 浓
素的最佳条件,选取 RB 为 40 nmol/L 水溶液,孕 度的增加先增加后降低,在 β-CD@AuNPs 浓度为
酮含量为 4 μg/g 的乙醇溶液保持不变,分别探究 pH 0.298 nmol/L 时,荧光恢复率最高。这是因为较低
值和 β-CD@AuNPs 浓度对检测体系的影响,其他反 浓度的 β-CD@AuNPs 意味着 RB 被猝灭的不充分,
应条件同 1.2.2.1 节。 检测溶液中仍存在游离的 RB,使得空白信号较强,
2.3.1 pH 对 β-CD@AuNPs-RB 检测体系的影响 从而导致系统灵敏度降低。
溶液的 pH 能够影响 β-CD@AuNPs-RB 检测体
系的灵敏度,因为 pH 会影响 β-CD 和 RB 的包合以及
性激素的置换能力 [18] 。为了监测 pH 对 β-CD@AuNPs-
RB 检测性激素的影响,在 pH 6.8~8.0 的范围内,考
察了 pH 对 β-CD@AuNPs-RB 的荧光恢复率的影响
〔用 PBS 缓冲液(0.01 mol/L)调节体系 pH〕,结
果如图 4 所示。荧光恢复率(R)由式(1)计算:
R/%=[(F–F 0 )/F 0 ]×100 (1)
式中:F 为存在性激素(孕酮)时的荧光强度;F 0
为初始荧光强度。
从图 4 可以看出,β-CD@AuNPs-RB 体系的荧
光恢复率随着 pH 的增加先增加后降低,在 pH 7.6 图 5 β-CD@AuNPs 浓度对体系荧光恢复率的影响
Fig. 5 Effect of β-CD@AuNPs concentration on its fluorescence
时最高。β-CD@AuNPs-RB 体系在 pH 6.8 时的微弱 recovery rate
荧光恢复率表明,弱酸性条件下,RB 表面带正电荷,
RB 自发吸附到 β-CD@AuNPs 表面,荧光被强烈猝 过量的 β-CD@AuNPs 导致 RB 荧光有效猝灭,但
灭,恢复效果较差;然而,在弱碱性 pH 下较强的 即使在性激素(孕酮)诱导 RB 从 β-CD 腔中释放的