Page 125 - 《精细化工》2023年第9期
P. 125
第 9 期 褚帅北，等: ARTP-DES 复合诱变结合前体耐受性选育达托霉素高产菌株 ·1973·
由图 2 可以看出，出发菌株在癸酸钠质量浓度 分数为 0.6%的 DES 作为最佳诱变剂量。
为 2 g/L 的平板中生长较好，随着癸酸钠质量浓度 2.5 ARTP-DES 复合诱变选育高产菌株
的增加，平板上生长菌落数逐渐减少，当癸酸钠质 ARTP 诱变时间设为 75 s，DES 诱变剂量设为
量浓度为 6 g/L 时，平板上基本无菌株生长。因此， 体积分数 0.6%，经 ARTP-DES 复合诱变后，将诱变
选择质量浓度为 6 g/L 的癸酸钠为出发菌株的筛选 得到的 240 株突变菌株进行摇瓶发酵，通过高效液
压力。 相色谱法测定其达托霉素产量，结果如图 5 所示。
2.3 ARTP 诱变致死率曲线
图 3 为出发菌株的 ARTP 诱变致死率曲线。
图 5 复合诱变初筛结果
Fig. 5 Preliminary screening results of compound mutagenesis
图 3 出发菌株的 ARTP 诱变致死率曲线 mutants
Fig. 3 Lethal rate curve of strain AN-126 treated by ARTP
由图 5 可知，以出发菌株 AN-126 的达托霉素
由图 3 可知，随着 ARTP 诱变时间的延长，出 产量 41.58 mg/L 为指标，经 ARTP-DES 复合诱变后，
发菌株的致死率逐渐增大，当诱变的时间为 120 s 共获得了 41 株正突变菌株，正突变率为 17.1%，其
时，致死率为 98.3%，接近于 100%。根据育种经验， 中菌株 AD-117 达托霉素产量最高，为 91.52 mg/L。
一般采用致死率 70%~80%作为最佳的诱变时间 [23] 。 经摇瓶复筛，41 株正突变菌株的达托霉素产量均有
当 ARTP 诱变的诱变时间为 75 s 时，玫瑰孢链霉菌 所下降，没有产量在 90 mg/L 以上的突变菌株。
的致死率为 73.6%。因此选择 75 s 作为 ARTP 的最 2.6 ARTP-DES 复合诱变结合癸酸钠耐受性选育
佳诱变时间。 高产菌株
2.4 DES 诱变致死率曲线 ARTP 诱变时间设为 75 s，DES 诱变剂量设为
出发菌株的 DES 诱变致死率曲线如图 4 所示。 体积分数 0.6%，经过 ARTP-DES 复合诱变，癸酸钠
DT 平板筛选，共获得 213 株生长良好的突变菌株。
对 213 株突变菌株进行摇瓶初筛，结果如图 6 所示。
图 4 出发菌株的 DES 诱变致死率曲线
Fig. 4 Lethal rate curve of strain AN-126 treated by DES
图 6 复合诱变结合癸酸钠耐受性初筛结果
由图 4 可知，随着 DES 体积分数的增加，出发 Fig. 6 Preliminary screening results of compound mutagenesis
combined with sodium decanoate tolerance
菌株的致死率逐渐增大。当 DES 体积分数为 1.0%
时，致死率达到 98.2%，接近 100%。当 DES 体积 由图 6 可知，以原始菌株 AN-126 的达托霉素
分数为 0.6%时，致死率为 72.8%。因此，选择体积 产量 41.58 mg/L 为指标，共获得了 58 株正突变菌
