Page 127 - 《精细化工》2023年第9期

第 9 期 褚帅北，等: ARTP-DES 复合诱变结合前体耐受性选育达托霉素高产菌株 ·1975·

达托霉素最高产量达到 512.64 mg/L；
（2）ARTP-DES 复合诱变后，经过癸酸钠耐受
性筛选得到突变菌株，其正突变率较未经癸酸钠耐受
性筛选得到的突变菌株高约 10%，且未经过癸酸钠压
力筛选得到的突变菌株产量<90 mg/L，而经过癸酸钠
耐受性筛选得到的突变菌株中有 6 株的达托霉素产
量>90 mg/L，说明复合诱变结合癸酸钠压力筛选是
选育达托霉素高产菌株的一种有效育种手段；

（3）在 5 L 发酵罐中分阶段补加癸酸钠溶液，
M—DL5000 DNA marker；1—Strain AN-126；2—Strain RR-447
图 10 菌株 AN-126 和 RR-447 的 BOX-PCR 谱图 既能保证菌体前期的正常生长，又能保证在达托霉
Fig. 10 BOX-PCR profiles of strains AN-126 and RR-447 素合成阶段有充足的前体物质，同时还减小了发酵
后期菌株受癸酸钠毒性的影响，是一种有效的前体
2.10 高产菌株 RR-447 分批发酵
物补加方法；
为进一步考察高产菌株 RR-447 的工业发酵性
（4）ARTP-DES 复合诱变结合癸酸钠耐受性筛
能，按照 1.2.13 节实验条件，在 5 L 发酵罐中进行
选虽然可以有效选育达托霉素高产菌株，但诱变过程
分批发酵，发酵结果如图 11 所示。 中仍然存在突变随机性问题。后期可通过比较转录组

学技术来对比高产菌株与原始菌株在基因表达量上
的差异，寻找与高产达托霉素有关的关键性基因，从
而为未来通过基因工程手段定向改造菌株奠定基础。

参考文献：

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3 结论 Screening of high daptomycin-producing strain by He-Ne laser
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（1）通过 ARTP-DES 复合诱变结合癸酸钠耐受 [10] GAO F X (高芳霞), YU Y Q (俞岩青), WANG K R (王昆蓉), et al.
性筛选，选育出一株遗传稳定的达托霉素高产菌株 Breeding of high daptomycin-producing strain by ARTP and UV
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RR-447，摇瓶产量为(101.41±0.37) mg/L，是出发菌
2016, 41(6): 425-428.
株的 2.44 倍。在 5 L 发酵罐中流加前体物质癸酸钠， （下转第 2002 页）