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·2060·                            精细化工   FINE CHEMICALS                                  第 35 卷

            种氨基酸的标准曲线。                                            (2)呈味氨基酸含量及 TAV 分析
            1.3.2   样品前处理                                          采用味道强度值(Taste Activity Value,TAV)
                 羊肚菌粉末在 70  ℃烘干至恒重,密封保存。                       评价氨基酸呈味贡献,TAV 表示样品中呈味物质测
            分析天平准确称取 1 g 样品(精确至 0.0001 g),置                    定值与呈味物质的味道阈值之比。当 TAV 大于 1 时,
            于 100 mL 容量瓶中,加蒸馏水 50 mL,置超声仪中                     认为该物质对呈味有重要贡献,且数值越大,影响
            于 240 W、70  ℃萃取 20 min,冷却并定容,混匀。                   越显著,当比值小于 1 时,该物质对呈味没有贡献。
            样品溶液用 0.22 μm 滤膜过滤备用。                              通过计算菌液氨基酸味道强度值,找出对羊肚菌滋
            1.3.3   仪器检测条件                                     味有显著贡献的氨基酸。
                 采用氨基酸自动分析仪离子交换色谱-茚三酮                              TAV [12] 为某一呈味氨基酸的含量与其阈值的
            柱后衍生法测定样品中游离氨基酸。Na  型阳离子                           比。公式为:
            交换树脂,4.6  μm  × 200 mm;测定波长在 570 nm                                 TAV = w 1 /w 2
            和 440 nm;缓冲液流速 4.5 mL/min,茚三酮衍生液                   式中:w 1 为呈味氨基酸在样品中的含量,mg/g;w 2
                                                               为该氨基酸滋味阈值浓度,mg/g。
            流速 0.25 mL/min,  柱温 31~76  ℃;进样量 50 μL。
            每个样品检测 3 组平行。
                                                               2    结果与讨论
            1.3.4   鲜味评价方法
                (1)游离氨基酸组成及含量分析                                2.1   氨基酸回归方程
                 分别统计总游离氨基酸含量(TFAA)、必需氨                            以游离氨基酸峰面积为横坐标,以氨基酸的浓
            基酸含量(EAA)和非必需氨基酸含量(NEAA)                           度(mmol/L)为纵坐标,绘制氨基酸的回归方程如
            及鲜味、甜味、苦味氨基酸含量。                                    表 1 所示。

                                                 表 1   氨基酸回归方程及系数
                                      Table 1    Amino acids regression equations and coefficients
               氨基酸               线性方程                 R         氨基酸              线性方程                 R   2
                                                       2
                Asp           y=293.41x+500.57      0.9991       Ile          y=291.63x+379.22      0.9995
                 Thr          y=245.64x+98.431      0.9999       Leu          y=448.78x+492.59      0.9994
                 Ser          y=343.36x+181.16      0.9995       Tyr          y=326.86x595.78      0.9997
                 Glu          y=522.18x311.25      0.9998       Phe          y=464.12x+379.38      0.9995
                 Gly          y=219.06x67.142      1.0000       His          y=308.33x+1438.6      0.9992
                 Ala          y=309.59x84.889      0.9995       Lys          y=341.93x+1698.7      0.9993
                 Cys          y=57.696x885.23      0.9991       Arg          y=377.63x+328.24      0.9994
                 Val          y=400.94x+1633.4      0.9992       Pro          y=43.037x12.132      0.9997
                Met           y=339.81x+472.91      0.9994

                                                     2
                 由表 1 可知,各氨基酸线性关系良好,R 均大                       味成分具有影响       [9,13] 。为比较不同产地羊肚菌中游离
            于 0.9990。另外,除脯氨酸在 440 nm 出峰,其他                     氨基酸组成及含量,对 5 个样品采集点的人工羊肚
            16 种氨基酸均在 570 nm 出峰。                               菌氨基酸进行分析,结果见表 2。
            2.2   不同产地羊肚菌游离氨基酸含量                                   由表 2 可见,不同产地间羊肚菌游离氨基酸间
                 外源营养、光照、温度等环境因素对羊肚菌滋                          含量差异不显著(P>0.05),但氨基酸含量范围较大,

                                          表 2   不同产地羊肚菌游离氨基酸比较(mg/g)
                        Table 2    Free amino acids components and comparison of morels from different habitats (mg/g)
                                         香格里拉            大理            曲靖             怒江            昆明
                天门冬氨酸(Asp)               0.41±0.27     0.39±0.19      0.24±0.11     0.35±0.21     0.38±0.19
                谷氨酸(Glu)                 4.06±1.55     1.85±1.42      1.63±1.15     2.07±2.03     3.57±3.16
                苏氨酸(Thr)*                1.44±0.82     1.08±0.75      1.17±0.62     1.72±1.17     2.12±1.62
                丝氨酸(Ser)                 0.77±0.14     0.47±0.24      0.80±0.52     0.76±0.65     1.27±1.20
                甘氨酸(Gly)                 0.51±0.16     0.21±0.05      0.28±0.13     0.30±0.18     0.43±0.36
                丙氨酸(Ala)                 2.82±0.74     1.56±0.65      1.76±0.58     1.76±0.96     2.28±0.89
                脯氨酸(Pro)                 0.52±0.23     0.19±0.15      0.35±0.20     0.38±0.32     0.43±0.35
                缬氨酸(Val)*                0.74±0.26     0.37±0.06      0.53±0.10     0.48±0.30     0.61±0.38
   87   88   89   90   91   92   93   94   95   96   97