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第 12 期                    刘兴勇,等:  环境和生长阶段对羊肚菌氨基酸的呈味影响                                   ·2059·


                 羊肚菌属于子囊菌亚门(Ascomycotina)、盘菌                   与菌柄紧相连,尖端分枝交织成网格状,阶段 2 为
            纲(Discomycetes)、盘菌目(Pezizales)、羊肚菌科                生长中期,菌盖变为深棕色或褐色,阶段 3 为生长
            (Morchellaceae)、羊肚菌属(Morchella),是一种                后期,菌柄直径达到 2~3 cm,基部膨大,呈现不规
            珍贵的食药兼用食用菌,因味道鲜美、口感细腻,                             则凹槽。所有羊肚菌均由食用菌类专业人员鉴定为
            常被用来作为烹饪调料。羊肚菌因含有杂多糖、微                             粗柄羊肚菌。新鲜羊肚菌清洗干净后于 70  ℃干燥,
            量元素、黄酮类等功效成分而具有抗氧化、抗癌、                             粉碎备用。
                                                       [1]
            免疫调节等保健效果,其营养丰富,受到青睐 。
            目前,对于羊肚菌的研究也主要围绕上述保健功
            能 [2-5] 、营养价值   [6-7] 和人工培养技术开展。羊肚菌
            的菌丝体含有丰富的氨基酸,总氨基酸和人体必需
            氨基酸含量比较高,  必需氨基酸占氨基酸总量的
            49%左右,基本接近 FAO/WHO 推荐的模式,且决
            定鲜味的谷氨酸、天冬氨酸含量尤为突出,是优质
            的蛋白源     [7-8] 。
                 近年来,培育技术的不断突破基本实现了羊肚
            菌的人工室外培养殖,2015~2016 年预计产量为
                 [9]
            500 t 。随着羊肚菌产量的突破,其滋味品质成为
                                                                      1—生长初期;2—生长中期;3—生长后期
            关注重点。氨基酸是羊肚菌独特鲜味的来源之一,
            且食用加工中氨基酸呈味作用主要以游离态形式。                                       图 1   不同生长阶段粗柄羊肚菌
            但生长环境、生长阶段对羊肚菌滋味成分氨基酸的                                Fig. 1    Pictures of morels at different growth stages

            变化及风味贡献了解较少。目前,对食用菌滋味成分
                                                                   17 种混合氨基酸标准溶液(天冬氨酸、苏氨酸、
            大多采用味精当量(Equivalent umami concentration,
                                                               丝氨酸、谷氨酸、脯氨酸、甘氨酸、丙氨酸、半胱
            EUC)来综合协同定量评价游离鲜味氨基酸与核苷                            氨酸、缬氨酸、甲硫氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、酪
            酸的鲜味作用。Li        [10] 等分别对茶树菇、侧耳、姬松
                                                               氨酸、苯丙氨酸、组氨酸、赖氨酸、精氨酸),质量
            茸、杏鲍菇和毛头鬼伞进行滋味评价,姬松茸和毛
                                                               分数≥99%,Sigma 公司;水合茚三酮、乙酸钾、柠
            头鬼伞的鲜味最强,味精当量分别达到 88.37 和                          檬酸、柠檬酸三钠,分析纯,国药集团试剂公司;
            86.86 g MSG/100 g。Chen [11] 等依据大小对不同生长
                                                               甲醇,色谱纯,德国 Merck 公司。
            阶段香菇菌盖和菌柄进行风味评价。
                                                               1.2    仪器
                 但 EUC 评价无法综合其他风味氨基酸,而滋味
                                                                   S-433(D)氨基酸自动分析仪,德国 Sykam 公
            活性值(TAV)则考虑了所有呈味氨基酸,更能全
                                                               司;binderFD115 电热鼓风干燥箱,德国 binder 公司;
            面分析氨基酸对羊肚菌的滋味贡献。  同时,为了考
                                                               AE 100 电子分析天平,瑞士 Mettler Toledo 仪器有
            察不同环境和生长阶段羊肚菌游离氨基酸的组成及
                                                               限公司;HC-2518 高速离心机,安徽科大中佳公司;
            对滋味的影响,采用加热超声萃取模拟羊肚菌加工
                                                               KQ-500E 超声波清洗仪,昆山市超声仪器有限公司。
            食用中的菌液,分析游离氨基酸的种类及含量,结
                                                               1.3    实验方法
            合 TAV 分析滋味的变化,旨在为羊肚菌人工培育及
                                                               1.3.1   标准溶液配制及定量
            质量控制提供一定的理论依据。
                                                                   氨基酸混合标准溶液中 L-半胱氨酸浓度为
                                                                     –3
                                                                                                     –3
            1   实验部分                                           1.25×10  μmol/L,其余氨基酸的浓度均为2.5× 10 μmol/L,
                                                               将 1 mL 氨基酸混合标准溶液用 0.02 mol/L 盐酸稀释
            1.1    材料与试剂                                       定容至 25 mL,得到氨基酸标准工作液,浓度为 100
                 实验所用材料为粗柄羊肚菌,野生羊肚菌 3 份,                       μmol/L,半胱氨酸浓度为 50 μmol/L。氨基酸定量采
            分别从云南香格里拉、大理向当地村民购买,均采                             用外标法进行。为减少标准溶液稀释过程实验误差,
            集于当地山林,昆明市场购买 1 份;人工羊肚菌 15                         氨基酸自动分析仪分别对标准溶液进样 1、10、20、
            份,分别从云南香格里拉、大理、曲靖、怒江、昆                             50、80 μL,氨基酸浓度分别相当于 0.10、1.00、2.00、
            明五地人工培育场按子实体形态各购置 3 份。羊肚                           5.00、8.00  μmol/L,共 5 个浓度梯度。将不同浓度
            菌子实体形态如图 1 所示。                                     梯度氨基酸标准溶液在相同条件下进样,用得到的
                 图 1 中阶段 1 为生长初期,菌盖呈现淡黄色,                      色谱图峰面积与对应氨基酸标液浓度作图,绘制 17
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