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·1166· 精细化工 FINE CHEMICALS 第 35 卷

呈椭圆形、球形，出现细胞聚集、脱壁。如图 4b~d 响见图 5 和 6。
所示，质量浓度 1、4 和 16 mg/L 的宋果灵作用后，
细胞数量明显减少，脱壁细胞多，可见较多细胞碎
片，HepG2 细胞呈现长梭形，细胞变圆变小，贴壁
能力下降。因此，3-乙酰乌头碱和宋果灵作用于
HepG2 细胞后影响细胞的形态和功能，在形态学上
表现出死亡细胞和/或即将死亡的形态学特征，最终
导致细胞的死亡。

a—阴性对照；b—ρ（3-乙酰乌头碱）=25 mg/L；c—ρ（3-乙酰
乌头碱）=50 mg/L；d—ρ（3-乙酰乌头碱）=100 mg/L（图中为
双标荧光，正常细胞部分膜呈绿色，凋亡早期细胞呈绿色，核
不着色；凋亡中晚期细胞膜呈绿色，细胞核为红色，下同）

a—阴性对照；b—ρ（3-乙酰乌头碱）=1 mg/L；c—ρ（3-乙酰乌 图 5 Annexin V/PI 染色激光共聚焦显微镜观察 3-乙酰乌
头碱）=4 mg/L；d—ρ（3-乙酰乌头碱）=16 mg/L 头碱质量浓度对 HepG2 细胞凋亡的影响
Fig. 5 Effect of mass concentration of 3-acetylaconitine on
图 3 3-乙酰乌头碱质量浓度作用 HepG2 后细胞形态 HepG2 apoptosis under laser confocal microscopy
特征 stained by Annexin V/PI
Fig. 3 Morphological characteristics of HepG2 cells in the
absence or presence of 3-acetylaconitine 如图 5b 所示，3-乙酰乌头碱在低质量浓度

（25 mg/L）时可见大量细胞的膜呈绿色，随着干预
浓度的增高，细胞核呈大小不等、形状不规则的碎
片状或梅花状，处于凋亡晚期细胞逐渐增高。实验
结果表明，质量浓度 100 mg/L 的 3-乙酰乌头碱具有
明显促进 HepG2 细胞凋亡的作用（图 5d）。
由图 6 可见，质量浓度 6~120 mg/L 的宋果灵干
预 HepG2 细胞，与对照组细胞相比，低剂量组细胞
膜绿色荧光，细胞核体积变小，裂解为碎块，产生
凋亡小体，说明以早期凋亡为主，出现典型的细胞
凋亡形态；随着药物浓度的增加，核红色荧光较多，
说明既有早期凋亡，又有晚期凋亡，凋亡特征表现

越为显著。实验结果表明，质量浓度 120 mg/L 的宋
a—阴性对照；b—ρ（宋果灵）=1 mg/L；c—ρ（宋果灵）=4 mg/L； 果灵具有明显促进 HepG2 细胞凋亡的作用（图 6e）。
d—ρ（宋果灵）=16 mg/L
2.4 FCM 观察 3-乙酰乌头碱和宋果灵对 HepG2 细
图 4 宋果灵质量浓度作用 HepG2 后细胞形态特征 胞凋亡的影响
Fig. 4 Morphological characteristics of HepG2 cells in the Annexin V/PI 染色后流式细胞仪观察 3-乙酰乌
absence or presence of songorine
头碱和宋果灵对 HepG2 细胞凋亡的影响见图 7 和
2.3 LSCM 观察 3-乙酰乌头碱和宋果灵对 HepG2 图 8。
细胞凋亡的影响 如图 7 和 8 散点图所示，对照组细胞主要分布
Annexin-Ⅴ-FITC/PI 双染后激光共聚焦显微镜 在第Ⅲ象限，机械性损伤细胞（第Ⅱ象限）数量相
观察 3-乙酰乌头碱和宋果灵对 HepG2 细胞凋亡的影 对较少。3-乙酰乌头碱处理组（图 7），随着药物浓