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第 3 期 朱龙宝，等: 成团泛菌苯丙氨酸氨基变位酶的性质表征及用于合成-苯丙氨酸 ·453·
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表明酶的最适温度为 30 ℃。进一步研究了酶的温度 活性，而 Cu 强烈抑制酶活性，相对酶活性仅剩
稳定性，分别在 40、50 和 60 ℃下处理酶 0.5~3.0 h 34%，抑制酶活性达到 66%。由图 6b 可见，在
后，测定剩余酶活力，结果见图 4b。结果表明，重 1 mmol/L 的浓度下，SDS 和 Triton 100 对酶的活性
组 PaPAM 在 40~50 ℃下处理 3.0 h 时酶活性保持 影响较大，而 Tween 80 和 CTAB 的影响较小。
90%以上，在 60 ℃下处理处理 3.0 h 后仍具有约 40%
的酶活力（图 4b），表明酶的热稳定性较高，与来
源于 S. maritimus 的苯丙氨酸氨基变位酶（SmPAM）
具有相似的稳定性和最适反应温度 [14] ，而来源于植
物 T. chinensis 的苯丙氨酸氨基变位酶（TcPAM）的
活性最适温度为 15 ℃，超过 30 ℃时主要表现出
脱氨酶活性（催化底物脱氨生成反式肉桂酸） [16] ，
表明微生物来源的酶在合成 β-苯丙氨酸方面更适合
工业应用。
图 5 pH 对酶活性（a）及稳定性（b）的影响
Fig. 5 Effects of pH on PaPAM activity (a) and stability (b)
图 4 温度对酶活性（a）及稳定性（b）的影响
Fig. 4 Effects of temperature on the activity (a) and
stability (b) of enzyme
2.4.2 pH 对酶活性的影响
在 30 ℃下考察了 pH 对 PaPAM 活性的影响，
结果见图 5。从图 5 可知，酶的最适 pH 为 9，酶活
达 2.1 kU/g（图 5a）。将酶分别在 pH 8、9、10 下处
理 4~24 h，每隔 4 h 取样测定剩余酶活力，结果见
图 5b。由图 5b 可知，酶在 pH 8~10 内较稳定，活
性保持在 98%以上。
2.4.3 金属离子及表面活性剂对酶活性的影响
金属离子和表面活性剂（1 mmol/L）对 PaPAM
2+
+
活性的影响如图 6 所示。由图 6a 可见，Na 、Mg 、 图 6 金属离子（a）及表面活性活性剂（b）对酶活性的
影响
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Ca 、Fe 在 1 mmol/L 的浓度下对 PaPAM 的活性影 Fig. 6 Effects of metal ions (a) and surfactants (b) on the
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响较小；Mn 、Zn 的影响较大，明显抑制了酶的 activity of recombinant PaPAM
