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·536· 精细化工 FINE CHEMICALS 第 36 卷

8.4 Hz, 1H, PhH), 7.36(d, J=7.80 Hz, 1H, PhH), 1.3.1.3 抑菌率测定
7.45(m, 2H, PhH), 7.80(m, 1H, PhH), 8.20(m, 1H, 采用稀释涂布平板法，将一定量质量浓度为 3 g/L
PhH), 9.15(s, 1H, NH), 10.44 (s, 1H, OH)。
的化合物丙酮溶液加入到含稀释新鲜菌液的试管
2-乙酰胺甲基-芝麻酚(Ⅵ)：白色粉末，产率 中，37 ℃下培养 18 h，之后将培养样品的菌液用无
–1
48.41%。IR (KBr), ν/cm : 747.76, 931.33, 1038.21, 菌生理盐水依次稀释 10 倍，混合均匀，吸取 200 μL
1179.17, 1221.77, 1292.25, 1442.51, 1490.53, 1561.79,
1632.27, 2687.95, 2920.31, 3103.87, 3295.18 。 于固体培养基上，并用三角涂布棒均匀涂布于固体
1 培养基表面至菌液完全被固体培养基吸收，每个样
HNMR(DMSO, 600 MHz), δ: 1.85(s, 3H, CH 3 ),
4.06(d, 2H, CH 2 ), 5.87(s, 2H, CH 2 ), 6.47(s, 1H, PhH), 品的每个浓度重复实验 3 次，37 ℃下恒温培养 18 h，
6.65(s, 1H, PhH), 8.33(t, J=5.40 Hz, 1H, NH), 9.48(s, 计算活菌数 C，以不添加化合物的试管为对照样，
1H, OH)。 计算活菌数 B，并根据下式计算抑菌率 [23-24] ：
2-乙酰胺甲基-4-肉桂苯酚(Ⅶ)：淡黄色粉末， R/%=(1–C/B)×100
–1
产率 69.52%。IR (KBr), ν/cm : 705.16, 1038.21, 式中：R 为抑菌率，%；C 为处理菌生长量，个；B
1235.71, 1447.73, 1505.25, 1547.07, 1660.93, 2304.56, 为对照菌生长量，个。
2375.04, 2856.80, 2927.28, 3323.84, 3741.31 。 1.3.2 抑制海藻生长活性实验
1 HNMR(DMSO, 600 MHz), δ: 1.58(s, 6H, CH 3 ), 以三角褐指藻、中肋骨条藻和旋链角毛藻为受
1.82(s, 3H, CH 3 ), 4.12(d, 2H, CH 2 ), 6.70(d, J=8.40 Hz,
1H，PhH), 6.89(m, 1H, PhH), 6.99(d, J=2.40 Hz, 1H, 试藻种，将经过玻璃砂芯漏斗过滤的海水高温杀菌
PhH), 7.14(t, J=6.60 Hz, 1H, PhH), 7.18(s, 1H, PhH), 后作为培养液，按表 1 配方配成营养液，pH=8.0±0.1。
7.20(d, J=1.20 Hz, 1H, PhH), 7.24(s, 1H, PhH), 7.25(d, 将接种后的藻种置于光照强度为 4000 lux、光暗比
J=7.80 Hz, 1H, PhH), 8.31(t, J=5.40 Hz, 1H, NH), 为 12∶12、温度为 20 ℃的人工气候箱内培养 [25] 。
9.51(s, 1H, OH)。
1.3 生物活性测试 表 1 营养液配方
Table 1 Formula of the nutrient solution
作为高活性环保型抑制剂，辣素具有良好的抑
体积分数/%
菌和抑藻功能，是一种可以有效抑制海洋污损生物 藻类
维生素 硝酸钠 硅酸钠 痕量元素 磷酸钠
附着与生长的活性物质 [16] 。本文选取自然界常见的 容量
大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、三角褐指藻、中肋骨 （mL/L 海水） 0.5 1.0 1.0 0.5 1.0
条藻和旋链角毛藻为受试微生物对化合物的生物活
1.3.2.1 藻液吸光值-浓度线性关系的测定
性进行了测试。
利用紫外分光光度计全波长扫描得到藻液的最
1.3.1 抑菌性测试
大吸收波长后，将培养到指数生长期的藻液用培养
1.3.1.1 培养基及菌悬液的制备
液稀释成不同吸光值的藻液，充分摇匀，并在最大
称取 33 g 营养琼脂于 1 L 的蒸馏水中搅拌至完
吸收波长处测量各稀释藻液的吸光值。用血球计数
全溶解，121 ℃高温杀菌 10 min，待冷却至 50 ℃
板计数得到不同稀释藻液的藻细胞个数，并作出吸
制成固体培养基待用。称取 19 g 营养肉汤于 1 L 蒸
光值-藻液浓度曲线，得出线性回归方程 [26] 。
馏水中摇晃至充分溶解，121 ℃高温杀菌 10 min，
1.3.2.2 化合物对藻类生长活性的抑制作用
冷却至室温制成液体培养基待用。使用前经紫外灯
取一定量质量浓度为 3 g/L 的化合物溶液于处
充分照射，以确保实验的无菌条件。
于指数生长阶段的藻液中，配成一定浓度的受试化
将大肠杆菌和金黄色葡萄球菌置于 37 ℃下充
合物藻液，并定时检测锥形瓶中藻液的吸光值，由
分活化，用接种环刮取斜面培养基上活化的新鲜菌
吸光值-藻液浓度的线性关系计算藻液浓度，进而绘
株接种到无菌液体培养基中，培养 24 h。
制时间-吸光值-藻液浓度曲线，以测定合成化合物
1.3.1.2 最小抑菌浓度的测定
对海藻生长的抑制性 [27-28] 。
采用二倍稀释法，将反应生成的 7 种类辣素结
构乙酰胺化合物配成初始质量浓度为 2 g/L 的丙酮 2 结果与讨论
溶液，用无菌液体培养基按等体积依次进行两倍稀
释，且以不添加化合物的丙酮溶液为对照组，混合 2.1 化合物单体的表征
均匀后，分别向每个试管中加入 200 μL 的菌悬液放 以化合物Ⅰ为例进行结构的解析。
入恒温 37 ℃环境下振荡培养 24 h，在两种菌的最 由化合物Ⅰ的红外光谱数据可知，在 3288.21 cm –1
大吸收波长处依次测定每支试管中菌液的吸光度 处出现 N—H 的伸缩振动吸收峰，在 3103.87 cm –1
值，绘制化合物浓度-吸光度值曲线，即可得各化合 处出现苯环中 C—H 的伸缩振动吸收峰，在 2920.31 cm –1
–1
物的最小抑菌浓度（MIC） [21-22] 。 处出现 O—H 的伸缩振动吸收峰，在 2848.28 cm 处