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·662· 精细化工 FINE CHEMICALS 第 36 卷

以测试组分容量因子对数（lgk）为因变量，甲 2.5 固定相的多组分分离应用
醇体积分数（φ）为自变量，以最小二乘法进行线性 图 5 为 3 组分混合物在两柱上的分离色谱图。
回归，所得结果如表 1 所示。表 1 表明，2 号柱上 3 测试组分在异甘草素键合固定相填充的两柱上均具
种组分的容量因子对数与甲醇体积分数基本满足线 有较好的分离效果。图 6 为五组分混合物在 2 号柱
性关系，说明在该条件下，合成的 ISLSP-Ⅱ固定相 上的分离色谱图，通过调节流动相比例，可增加难
存在反相色谱分离机理。1 号柱上不符合线性规律， 分离对的分辨率。如将甲醇体积分数由 55%降低至
ISLSP-Ⅰ固定相的分离机制更为复杂。实验中还发 40%，2-萘酚和萘的分离度达到了 1.2，如继续降低
现一个有趣的现象，在体积分数 60%的甲醇-水溶液 甲醇含量，两者可以实现基线分离，但分析时间会
中，测试异甘草素样品在合成固定相上的分离情况 延长。图 7 为独活水提物、黄芩醇提取物及甘草醇
时，1 号柱正常出峰而 2 号柱不出峰，需用浓度更 提物在 ISLSP-Ⅱ固定相上的分离色谱图（由于 2 号
大的甲醇来洗脱，这也从侧面说明了两种方法制备 柱效果更好，因此以 2 号柱为例）。由图 7 可知，柱
的固定相在分离机制上存在差异，异甘草素键合固
定相的微观结构不同可能是导致 2 号柱形成具有类
似“亲和”效应的复合分离机制。

表 1 测试样品容量因子对数 lgk 与甲醇体积分数的线
性拟合结果
Table 1 Linear fitting results between lgk and methanol
volume fraction for the test samples
2
柱号 样品 回归方程 R
1 甲苯 lgk=0.19920.00755φ 0.668
二甲苯 lgk=0.272290.00828φ 0.676

–4
苯丙醇 lgk=(9.947310 )0.0122φ 0.497 a—溶剂峰；b—邻甲酚；c—二甲苯；d—2-萘酚；e—杂质
2 甲苯 lgk=1.74020.03134φ 0.982
图 5 多组分混合样品的分离色谱图
二甲苯 lgk=2.10670.03506φ 0.995 Fig. 5 Chromatograms of multi-component sample
苯丙醇 lgk=1.40050.03384φ 0.972

2.4 固定相的稳定性
合成的 ISLSP-Ⅰ、ISLSP-Ⅱ固定相在使用 6 个
月前后的色谱性能评价见表 2，表中数据均为 3 次
测定的平均结果。测试结果表明，合成的异甘草素
键合硅胶固定相稳定性良好，样品的保留值及峰型
参数在两柱上的变化不大，且保留时间偏差不超过
0.9%。推测是因为异甘草素的黄酮母核（C 6 —C 3 —
C 6 ）骨架结构几乎处于同一平面上，中间的 C 环为
开环结构，且在 α、β 位为 C==C 双键，整个分子形
成了近平面的共轭体系，可能也使得合成的硅胶键
合固定相比较稳定。

表 2 两根色谱柱稳定性测试结果
Table 2 Stabilities of the two columns
6 月前 6 月后
固定相 样品 保留时间/ 保留时间/
min 拖尾因子 min 拖尾因子
ISLSP-Ⅰ 甲苯 3.269 1.064 3.285 1.048
二甲苯 3.153 1.036 3.132 1.080

苯丙醇 3.556 1.076 3.548 1.545 a—溶剂峰；b—邻甲酚；c—二甲苯；d—2-萘酚；e—萘；f—联苯
ISLSP-Ⅱ 甲苯 1.494 1.217 1.520 1.205
图 6 2 号柱上流动相比例对多组分分离的影响
二甲苯 1.490 1.269 1.515 1.279
Fig. 6 Effects of mobile phase ratio on the separation of
苯丙醇 1.481 1.238 1.498 1.247 multi-components on column 2