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第 4 期 丛景香，等: 异甘草素键合硅胶固定相的合成及应用 ·659·

分离选择性等方面通常具有较佳的性能 [2-3] 。近年 器，日本岛津有限公司；N2000 色谱数据工作站，
来，以天然药物成分为配基合成的色谱固定相也受 浙江大学智达信息工程有限公司；DF-101D 集热式
[4]
到广泛关注 ，李来生教授课题组 [5-7] 在天然药物成 恒温加热磁力搅拌器，巩义市予华仪器有限责任公
分配基类固定相的研究中做了大量工作。 司；Nicolet IS10 傅里叶变换红外光谱仪，美国赛默
天然药物成分本身来源广泛，绿色无毒，具有 飞世尔科技公司；Zeiss-∑IGMA 扫描电子显微镜，
抗菌作用兼具提高色谱柱寿命的潜质。用作配基的 德国卡尔蔡司公司。
天然成分结构中常具有多种官能团，增加了与待分 1.2 方法
离物质的作用位点，这类色谱固定相作用机制复杂， 1.2.1 固定相的合成
在实际分离中表现出较好的选择性 [8-9] 。在合成该类 参考文献[7]方法，并结合实际，采用液相连续
固定相时，通常是将天然成分键合/修饰于硅胶基质 反应法制备异甘草素键合硅胶固定相 ISLSP-Ⅰ。
上，硅胶基质具有优良的机械强度、化学及热稳定 称取 20 g 硅胶（10 μm）于 3 mol/L 盐酸中静置
性、颗粒性质等，同时硅胶表面丰富的硅羟基也为 24 h 后，在 120 ℃下油浴回流 10 h。将盐酸回流后
进行合成反应提供条件，并由此制成种类繁多的新 的硅胶冷却至室温，用大量二次蒸馏水洗涤，再用
型固定相 [10] ，广泛应用于复杂样品的分析分离。 丙酮淋洗 3 次。将硅胶放入干燥箱，160 ℃下烘烤
异甘草素（Isoliquiritigenin，ISL）是来源于多 除水活化 8 h，得活化硅胶。取 8 g 活化硅胶、120 mL
种天然药物中的活性成分之一，在结构划分中属于 无水甲苯倒入 250 mL 三口烧瓶中，充分搅拌使硅胶
含有 3 个羟基的查尔酮亚类。异甘草素常用于消炎、 均匀分散在甲苯中，边搅拌边加入 4 mL KH-560 偶
止咳等药物中。近些年，研究发现异甘草素具有抗 联剂和 3 滴重蒸三乙胺做催化剂，油浴加热 120 ℃，
氧化 [11] 、抗癌 [12] 、抗衰老 [13] 、抑制细胞增殖 [14] 等生 在氮气保护下，磁力搅拌回流反应 24 h。回流结
物活性，以异甘草素为主导展开大量研究工作。鉴 束后，冷却至室温，用丙酮、甲醇、甲苯淋洗，滤
于其药理作用及结构特点，本文以异甘草素为配基 饼打散，在 80 ℃下真空干燥 6 h，即得偶联剂键合
合成固定相，主要用于复杂中药样品的选择性分析 硅胶。
分离。利用异甘草素结构中的羟基、羰基官能团、 称取 1 g 异甘草素置于 250 mL 三口烧瓶中，边
共轭结构、π电子等，可增加对不同物质的多重作 搅拌边加入 125 mL 无水甲苯、7 g 偶联剂键合硅胶
用机制，提高分离选择性。并对新型固定相性能进 于三口烧瓶中，搅拌；滴入 3 滴高氯酸，通入氮气
行评价，也为异甘草素的深度开发利用提供数据。 保护，在 110 ℃下反应 24 h。反应结束冷却至室温

后抽滤，再用丙酮、甲醇、甲苯淋洗，直至滤液变
1 实验部分
为清澈透明，收集滤饼，放至真空干燥箱内，80 ℃
1.1 试剂与仪器 下真空干燥 8 h，即得异甘草素键合硅胶 ISLSP-Ⅰ，
异甘草素原料，质量分数 98%，宝鸡市方晟生 产品呈暗黄色。
物开发有限公司；硅胶原料（平均粒径 10 μm，孔 采用中间体法 [15] 制备异甘草素键合硅胶，先将
径 12 nm），赛分科技有限公司；γ-(2,3-环氧丙氧)丙 1 g 异甘草素和 4 mL 偶联剂反应生成中间产物后，
基三甲氧基硅烷（KH-560），南京联硅化工有限公 再与 4 g 活化硅胶键合，其他反应中涉及的参数条
司；除色谱用 HPLC 级溶剂，其余试剂均为分析纯。 件与前者相同，最终产品 ISLSP-Ⅱ呈黄色。
LC-10AT 液相色谱输液泵、SPD-10A 紫外检测 ISLSP-Ⅰ合成路线如下所示：