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·654·                             精细化工   FINE CHEMICALS                                  第 36 卷

            致其电导率升高        [24] 。细胞内电解质对于维持细胞膜                 到破坏时,会使菌体变形或使其内容物流出,造成
            结构、功能、酶活性、细胞代谢具有重要作用,这                             细菌损伤。AKP 是位于细胞壁与细胞膜之间的一种
            些物质的大量外漏势必导致细胞生理活动紊乱乃至                             酶,正常情况下在胞外含量极低               [34] 。当细胞壁遭到
            细胞死亡     [32] 。此外,比较图 2a 和图 2b,相对于对                破坏后,AKP 将大量泄漏到细胞外,故可通过检测
            照组,EE 处理后金黄色葡萄球菌悬液电导率升幅明                           细胞外 AKP 的含量来判断细胞壁是否完好。比较图
            显高于大肠杆菌,一方面可能与两种细菌自身特性、                            3a 和图 3b,两种菌悬液的 AKP 值均在 EE 处理后明
            膜结构及成分有关,另一方面可能是因为金黄色葡                             显增加,说明 EE 对两种菌的细胞壁均可产生一定
            萄球菌较大肠杆菌对 EE 的敏感性更强,释放出更                           破坏作用,使 AKP 渗出,导致菌悬液中的 AKP 含
            多胞内物质。                                             量增加;而且金黄色葡萄球菌的菌悬液中 AKP 含量

                                                               最高达 5.1 U/L,高于大肠杆菌的最高 AKP 值
                                                               (4.4 U/L),这与前述电导率的实验结果一致。植
                                                               物源抑菌成分/组分的抑菌机制研究较多,主要分为
                                                               破坏细胞壁、破坏菌体蛋白和遗传物质及抑制呼吸
                                                               作用 3 类  [35] 。EE 中总黄酮含量达 20.50 mg/g     [13] ,该
                                                               类成分通过破坏细菌细胞壁,可造成实验菌细胞内
                                                               容物泄漏而使 EE 具有抑菌作用,这既符合大部分
                                                               黄酮类成分的抑菌机理,也使其成为 EE 具有抑菌
                                                               活性的物质基础之一。


















            图 2  EE 对金黄色葡萄球菌(a)和大肠杆菌(b)电导
                  率的影响
            Fig. 2    Effects of EE on the conductivity of S. aureus (a)
                   and E. coli (b)

            2.4    EE 对菌悬液 AKP 含量的影响
                 菌悬液 AKP 含量可间接反映细菌细胞壁的完
            整性,EE 对金黄色葡萄球菌(a)和大肠杆菌(b)
            AKP 含量的影响见图 3。由图 3 可见,随着培养时
            间的增加,两种受试菌的对照组 AKP 含量始终处于
            相对较低且平稳水平(<1.0 U/L)。EE 处理对金黄

            色葡萄球菌 AKP 含量影响如图 3a 所示,当加入 EE                      图 3  EE 对金黄色葡萄球菌(a)和大肠杆菌(b)AKP
            后,30  min 时检测到菌悬液 AKP 含量即达到                             含量的影响
            2.1 U/L;随后 AKP 含量一直呈上升趋势,至 180 min                 Fig. 3    Effects of EE on the AKP content of S. aureus (a)
                                                                     and E. coli (b)
            时达到 5.1 U/L。经 EE 处理后大肠杆菌的 AKP 测量
            结果如图 3b 所示,在加入 EE 后至 120 min 内,AKP                 2.5    EE 对菌悬液胞外可溶性蛋白的影响
            含量呈上升趋势并在 120 min 达到峰值(4.4 U/L),                       为探究 EE 对实验菌悬液可溶性蛋白含量的影
            随后呈下降趋势,至 180 min 时为 2.9 U/L。                      响,对添加 EE 处理后菌悬液中的可溶性蛋白含量进
                 细菌细胞壁是位于其细胞膜外的一层较厚、较                          行了测定。EE 处理后金黄色葡萄球菌的胞外可溶性
            坚韧并略具弹性的结构,主要成分是肽聚糖,对维                             蛋白的含量结果如图 4a 所示。在加入 EE 后 30 min,
            持细菌的固有形态起重要作用              [33] 。当细胞壁结构遭           胞外可溶性蛋白含量明显高于对照组(>0.3 g/L);
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