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·698· 精细化工 FINE CHEMICALS 第 36 卷

十字交叉法测其对单核增生性李斯特菌、白色念珠 硝酸钠，防腐剂苯甲酸钠、山梨酸钾，漂白剂兼氧
菌、乙型溶血性链球菌、乙型副伤寒沙门氏菌、阪 化剂过氧化氢、高锰酸钾，根据上述添加剂在食品
崎肠杆菌和大肠杆菌的抑菌圈直径，当抑菌圈直径 体系添加量的差异 [23] ，分别配制亚硫酸钠质量浓度
大于 7 mm 认为有抑制作用。根据 MIC 值筛选出抑 为 0、0.15、0.30、0.45、0.60 g/L，亚硝酸钠质量浓
制作用较强的菌种进行后续实验。 度为 0、0.04、0.08、0.12、0.16 g/L，苯甲酸钠质量
1.2.4 金属离子对 HBA/M-β-CD 包合物抑菌活性的 浓度为 0、0.25、0.50、0.75、1.00 g/L，山梨酸钾质
影响 量浓度为 0、3.50、7.00、10.50、14.00 g/L，过氧化
1.2.4.1 单一金属离子的影响 氢、高锰酸钾质量浓度为 0、0.12、0.25、0.38、0.50 g/L
+
+
2+
2+
选择常量金属离子 Ca 、K 、Na 、Mg ，分 的包合物溶液，包合物中 HBA 质量浓 度为
别配成质量浓度为 0、4.00、8.00、12.00、16.00 g/L 130.00 mg/L，以相同质量浓度 HBA 的甲醇溶液作
的 HBA/M--CD 包合物溶液；选择微量金属离子 为阳性对照，以相应质量浓度的食品添加剂溶液和
2+
2+
3+
2+
Fe 、Fe 、Zn 、Cu 分别配成质量浓度为 0、40.00、 无菌水作为阴性对照。采用滤纸片法测定对 1.2.3
80.00、120.00、160.00 mg/L 的 HBA/M-β-CD 包合 筛选出的菌种的抑菌活性，根据抑菌圈直径测定包
物溶液，包合物中 HBA 质量浓度均为 130 mg/L， 合物的抑菌活性强弱。
以相同质量浓度 HBA 的甲醇溶液作为阳性对照，以
2 结果与讨论
相应质量浓度的金属离子溶液和无菌水作为阴性对
照。采用滤纸片法测定对 1.2.3 节筛选出的菌种的抑菌 2.1 HBA/M--CD 包合物 MIC 的测定
活性，根据抑菌圈直径测定包合物的抑菌活性强弱。 表 1 为 HBA/M--CD 包合物及各阳性对照组对
1.2.4.2 双组分金属离子复配后的影响 常见革兰氏菌的 MIC 及抑菌圈直径。
模拟人体液和血液中金属元素含量的比例对上 表 1 表明，在革兰氏阳性菌中，HBA/M--CD
+
述单组分金 属离子进行 复配 [22] ，按 照 m(K )∶ 包合物对金黄色葡萄球菌的抑制活性最好，MIC 为
2+
2+
+
+
m(Na )=2∶1、m(Na )∶m(Mg )=3∶1、m(Cu )∶ 16.25 mg/L，其次为单增李斯特菌和白色念珠菌，
2+
2+
2+
m(Zn )=1∶10、m(Fe )∶m(Zn )=2∶1 的质量比复 对乙型溶血性链球菌的抑制作用最弱；在革兰氏阴
配成金属离子质量浓度为 16.00 g/L 的 HBA/M--CD 性菌中，HBA/M--CD 包合物对沙门氏菌没有抑菌
包 合 物溶液 ， 包合物 中 HBA 质 量 浓度均 为 活 性 ， 对阪崎 肠杆 菌和大 肠杆 菌的 MIC 均为
130.00 mg/L，以相同质量浓度 HBA 的甲醇溶液作 32.50 mg/L，但随着包合物浓度的增大，对阪崎肠
为阳性对照，以相应质量浓度的金属离子溶液和无 杆菌的抑菌活性增加较为明显。
菌水作为阴性对照。采用滤纸片法测定对 1.2.3 筛选 与各阳性对照组相比，HBA/M--CD 包合物对
出的菌种的抑菌活性，根据抑菌圈直径测定包合物 测试菌的抑菌作用与 HBA 甲醇溶液基本一致或略
的抑菌活性强弱。 有减弱，但均好于或与阳性对照组青霉素和阿莫西
1.2.5 各种食品添加剂对 HBA/M--CD 包合物抑 林相似，明显好于山梨酸钾，在对应的最小抑菌浓
菌活性的影响 度下与 75%体积分数的乙醇的抑菌圈接近或略大。
选择食品添加剂中常见的还原剂亚硫酸钠、亚 其中，阳性对照青霉素除对乙型副伤寒沙门氏菌无

表 1 HBA/M--CD 包合物 MIC 的测定及不同阳性对照对 7 种菌种的抑菌效果 ①
①
Table 1 MIC of HBA/M--CD inclusion complex and the antibacterial effects of different positive controls on seven bacteria
MIC/（mg/L）
革兰氏阳性菌 革兰氏阴性菌
（样品）
金黄色葡萄 乙型溶血性 乙型副伤寒沙
白色念球菌 单增李斯特菌 大肠杆菌 阪崎肠杆菌
球菌 链球菌 门氏菌
HBA/M--CD 16.25 32.50 65.00 32.50 32.50 — 32.50
HBA 甲醇溶液 16.25 65.00 65.00 16.25 16.25 — 32.50
阿莫西林 260.00 520.00 260.00 32.50 130.00 65.00 130.00
②
山梨酸钾 — — — — — — —
5
青霉素/（U/L） ③ 5 . 2 0 ×10 5 5 . 2 0 ×10 5 5 . 2 0 ×10 5 6 . 5 0 ×10 4 5 . 2 0 ×10 5 — 2 . 6 0 ×10
体积分数 75% 6.9±0.4 7.6±0.5 7.8±0.3 8.0±0.0 7.3±0.3 7.1±0.2 7.9±0.2
乙醇/mm
④
注：①抑菌圈直径采用（平均值±标准偏差）表示；②“—”表示无抑菌活性；③青霉素浓度为国际单位；④由于体积分数 75%
乙醇没有浓度梯度，无法测定 MIC 值，所以在此行给出的是抑菌圈直径。