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·1106· 精细化工 FINE CHEMICALS 第 36 卷

光度值，并按式（2）计算解吸率。 1.2.6.2 单宁对羟基自由基（•OH）清除能力的测定
 V   V 按文献 [12] 采用结晶紫法进行实验，分别将 PB、
E / %  00 e e  100 （1）
V
 00 PL、CB、CL、V C 配制成质量浓度为 0.1、0.2、0.3、
 V 0.4、0.5、0.6、0.7 g/L 的样品溶液。于 10 mL 刻度
D / %  dd  100 （2）
V 
V
 00  e e 试管中依次加入 0.4 mmol/L 的结晶紫 0.3 mL、
式中：E 为树脂对单宁的吸附率，%；D 为树脂对单 1.0 mmol/L 的 FeSO 4 1.2 mL、2.0 mmol/L 的 H 2 O 2
宁的解吸率，%； 0 为单宁样液中单宁的初始质量 0.6 mL，用 pH 4.0 的磷酸二氢钠-柠檬酸缓冲液定容
浓度，g/L；  e 为吸附平衡时溶液中单宁的质量浓度， 至 10 mL，摇晃均匀后静置 30 min，在 580 nm [13]
g/L； d 为洗脱液中单宁的质量浓度，g/L；V 0 为单 处测定其吸光度值 A b ，不加 H 2 O 2 溶液和样液时的
宁样液的体积，L；V e 为吸附平衡时溶液的体积，L； 吸光值为 A 0 ，在加 H 2 O 2 溶液前加入 2.0 mL 不同浓
V d 为洗脱液的体积，mL。 度样液后测定其吸光值为 A s 。平行 3 次实验后取平
1.2.4 静态吸附和解吸实验 均值，按式（4）计算其清除能力（S）。
于 100 mL 具塞锥形瓶中分别加入所得的最佳 A  A
S /%  s b  100 （4）
大孔吸附树脂 1.0 g，在不同树脂用量（g）与样液 A  A b
0
体积（L）的比值〔固液比 200︰1、200︰2、200︰ 1.2.7 单宁的抑菌活性测定
3、200︰4、200︰5〕、样液质量浓度（0.5、1.0、2.0、 按滤纸片扩散法 [7,14] 进行抑菌活性测定，将实验
2.5、3.0 g/L）以及树脂与样液的作用时间（15、30、 菌种于牛肉膏琼脂培养基中 37 ℃的生化培养箱中
8
45、60、75、90、105、120、135、150 min）条件下， 培养 24 h，并分别配制含菌量约为 1×10 个/mL 的
将装有树脂和样液的锥形瓶置于 30.0 ℃、150 r/min 菌悬液。于制好的琼脂平板培养基中加入 0.3 mL 菌
振荡器中恒温恒速振荡，取一定量吸附剩余液，按 悬液，涂布均匀。将已灭菌的滤纸片呈正四边形双
Folin-Denis 法测定吸光度值并计算其吸附率。 层贴到涂有菌液的培养基上，在滤纸片上分别滴加
将充分吸附后的树脂滤干吸附液，用 20 mL 不 0.02 mL 单宁纯化样、单宁粗提样、阿莫西林溶液（阳
同体积分数的乙醇溶液（20%、40%、60%、80%、 性对照）、无菌水（阴性对照），并置于 37 ℃下培
100%）于 30.0 ℃、150 r/min 的振荡条件下进行解 养 24 h，测定各滤纸片的抑菌圈直径，比较抑菌效
吸，取一定量解吸液，按 Folin-Denis 法测定吸光度 果。
值并计算解吸率。
1.2.5 动态吸附及解吸实验 2 结果与讨论
取所得的最佳大孔吸附树脂，采用湿法装柱（柱
2.1 不同树脂对单宁的吸附效果
直径 10 mm，柱高 35 mm）。分别以恒流泵 2.0 mL/min
在 1.2.3 节实验条件下，使用不同型号的树脂对
的流速，将树皮和树叶单宁样液上样，改变样液质
提取液进行静态吸附及解吸实验，结果如表 1 所示。
量浓度（0.3、0.5、0.7、0.8、0.9、1.1 g/L）、样液

体积（5、10、15、20、25 mL）以及体积分数 80% 表 1 不同大孔吸附树脂对巨尾桉树皮和树叶中单宁的
乙醇解吸液用量（1、2、3、4、5 BV）条件下，收 吸附效果
集吸附和解吸后样液，分别计算吸附率和解吸率。 Table 1 Adsorption efficiency of different adsorbents
1.2.6 单宁的抗氧化活性测定 参数 AB-8 HPD-826 DM-301 NKA-9 S-8 X-5
1.2.6.1 单宁对 DPPH•清除能力的测定 树皮 E/% 88.60 92.48 87.08 91.02 93.46 91.93
取 2 mL 不同浓度的树皮单宁纯化物（PB）、树 单宁 D/% 50.30 45.02 55.01 56.74 47.96 53.28
叶单宁纯化物（PL）、树皮单宁粗提物（CB）、树叶 树叶 E/% 73.84 76.59 74.31 86.73 88.22 87.61
单宁粗提物（CL）样液于刻度试管，分别加入 2 mL 单宁 D/% 65.31 53.35 59.92 55.81 42.28 47.87
4
浓度为 3.10×10 mol/L 的 DPPH•乙醇溶液，均匀
混合，避光静置 20 min 后在紫外吸收波长 524 nm 由表 1 可以看出，S-8 型树脂对巨尾桉树皮和树
处测定其吸光度值，记作 A i ，依照上述步骤以相应 叶中单宁的吸附能力最强，NKA-9 型树脂次之。这
体积的蒸馏水替换样液时测得的吸光度值记作 A 0 ， 是因为两类树脂均为极性树脂，较强极性的树脂能
[5]
V C 为对照组 。 较好吸附强极性的分子，巨尾桉树皮和树叶中单宁
DPPH•清除率（S）按式（3）计算： 具有酚羟基，故 S-8 型树脂的吸附率最高。但解吸
A  A 能力最好的分别是 NKA-9 型和 AB-8 型树脂。S-8
S / %  0 i  100 （3） 型树脂吸附能力最强，但其解吸能力太弱；AB-8 型
A 0