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·1162· 精细化工 FINE CHEMICALS 第 36 卷

到 ABTS+•乙醇溶液。该溶液在 734 nm 处吸光度值 据文献已报道方法进行 [22] ，根据情况略作修改。首
最大，为 1.072，在该波长下 ABTS+•的摩尔消光系 先配制溶液：galvinoxyl 自由基的配制方法与 DPPH•
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数为 1.610 L/(mol·cm)。化合物淬灭 ABTS+•的操 相似，即称取 1.0 mg galvinoxyl，加入 20 mL 烧杯
作如下：移取 1.9 mL ABTS+•乙醇溶液和 0.1 mL 浓 中，用少量无水乙醇溶解，之后转移至 100 mL 容量
度为 1 mmol/L 待测化合物储备液加入试管中，使待 瓶中，以无水乙醇定容，得到 galvinoxyl 自由基乙醇
测化合物终浓度为 50 mol/L，迅速混匀，并记录 溶液，该溶液在 428 nm 吸光度值最大，约为 1.523，
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0~1200 s 最大吸收波长处吸光度值（A）随时间的衰 在该波长下的摩尔消光系数为 1.4×10 L/(mol·cm)。
减曲线。 化合物淬灭 galvinoxyl 自由基的操作方法与化合物
1.4.2 捕获 DPPH•性能研究 淬灭 ABTS+•一致：移取 1.9 mL galvinoxyl 自由基乙
化合物淬灭 DPPH•的测试方法可依据文献已报 醇溶液和 0.1 mL 浓度为 3 mmol/L 待测化合物储备液
道方法进行 [21] ，根据情况略作修改。首先配制溶液： 加入试管中，使待测化合物终浓度为 150 mol/L，迅
称取 4.0 mg DPPH•，加入 20 mL 烧杯中，以少量无 速混匀，并记录 0~1200 s 最大吸收波长处吸光度值
水乙醇溶解，之后转移至 100 mL 容量瓶中，以无水 （A）随时间的衰减曲线。
乙醇定容，得到 DPPH•乙醇溶液，该溶液最大吸收 1.5 数据统计与分析
波长在 517 nm 处，吸光度值约为 1.107，在该波长 采用 Origin 8.0 软件对所得数据进行 ANOVA 方
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下的摩尔消光系数为 4.09×10 L/(mol·cm)。化合物 差分析，显著性检验方法为 Duncan 多重检验，显著
淬灭 DPPH•的操作方法与化合物淬灭 ABTS+•一致： 水平为 0.05。
移取 1.9 mL DPPH•乙醇溶液和 0.1 mL 浓度为 2 结果与讨论
2 mmol/L 待测化合物储备液加入试管中，使待测化
合物终浓度为 100 mol/L，迅速混匀，并记录 0~ 2.1 结构表征
1200 s 最大吸收波长处吸光度值（A）随时间的衰减 分别采用 JH40 全自动熔点仪、核磁共振氢谱
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曲线。 （ HNMR）、核磁共振碳谱（ CNMR）和超高效液
1.4.3 捕获 galvinoxyl 自由基性能研究 相色谱-电喷雾离子源质谱联用仪（UHPLC-ESI-
化合物淬灭 galvinoxyl 自由基的测试方法可依 MS）对化合物（Ⅰ）和对照分子（Ⅱ）进行结构表征。

表 1 两种化合物的熔点、核磁共振波谱和超高效液相质谱数据
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Table 1 m.p., HNMR, CNMR and UHPLC-ESI-MS of two compounds
化合物结构式 表征方法 分析结果
m.p. 191~193 ℃（文献 [10] 值：188.5~190 ℃）
1 ①
HNMR (DMSO-d 6) 10.52 (s, 1H, 8-OH), 7.58 (d, J = 9.0 Hz, 1H, 6-CH), 6.80 (dd, J = 8.4 Hz、2.4 Hz, 1H,
7-CH), 6.70 (d, J = 2.4 Hz, 1H, 9-CH), 6.12 (d, J = 1.2 Hz, 1H, 2-CH), 2.36 (d, J = 1.2
Hz, 3H, 4-CH 3)
13 CNMR (DMSO-d 6) 161.6 (1-C), 160.8 (8-C), 155.3 (10-C), 154.0 (3-C), 127.1 (6-C), 113.3 (5-C), 112.5
①
1 (7-C), 110.7 (2-C), 102.6 (9-C), 18.6 (4-C)
+
②
UHPLC-ESI-MS 177.0545[M+H] （理论值：177.0552）
m.p. 150~152 ℃（文献 [11] 值：149~150 ℃）
1 HNMR (DMSO-d 6) 7.83 (d, J = 8.4 Hz, 1H, 6-CH), 7.28 (d, J = 1.8 Hz, 1H, 9-CH), 7.20 (dd, J = 8.4 Hz、
①
2.4 Hz, 1H, 7-CH), 6.40 (d, J = 1.2 Hz, 1H, 2-CH), 2.45(d, J = 1.2 Hz, 3H, 4-CH 3),
2.32 (s, 3H, 12-CH 3)
13 CNMR (DMSO-d 6) 169.2 (11-C), 160.1 (1-C), 154.0 (10-C), 153.5 (8-C), 153.4 (3-C), 126.9 (6-C), 118.9
①
(7-C), 118.0 (5-C), 114.2 (2-C), 110.6 (9-C), 21.4 (12-C), 18.7 (4-C)
②
+
UHPLC-ESI-MS 219.0651[M+H] （理论值：219.0657）
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① HNMR 和 CNMR 以四甲基硅烷为内标，氘代 DMSO 为溶剂；② UHPLC-ESI-MS 以色谱级甲醇为溶剂，其中，色谱条件：
色谱柱为 ACQUITY UPLC BEH C18 柱（2.1 mm×100 mm id.,1.7 μm）；柱温为 30 ℃；流速为 300 μL/min；进样量为 3 μL；流动相为
V(甲醇)∶V(水) = 80∶20。质谱参数：ESI 作为离子源；采用正负离子扫描；毛细管加热温度为 350 ℃；电喷雾电压为 5.0 kV；离子
源鞘气（N 2），206850 Pa；离子源辅助气（N 2），58950 Pa；扫描范围为 m/Z 100~300 全扫描；扫描速度为 1 scan/s。

2.2 抑制自由基引发的 DNA 氧化反应性能分析 不同浓度化合物Ⅰ、Ⅱ中 TBARS 生成量随时间的
2.2.1 香豆素抑制 AAPH 引发的 DNA 氧化反应体 变化曲线如图 1 所示。
系分析结果 由图 1 可知，空白实验中，随着反应时间的增
以吸光度为纵坐标，反应时间为横坐标作图， 长，TBARS 的吸光度值不断增加，表明 DNA 不断