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第 6 期 席高磊，等: 4-甲基-7-羟基香豆素及其衍生物的抗氧化性能 ·1163·

被 AAPH 氧化生成小分子羰基化合物，从另一个侧 式中：R i 为从 AAPH 分解产生的过氧自由基引发底
面亦可发现通过跟踪 TBARS 生成量很方便地监测 物氧化反应的速率，mmol/(Ls)。
DNA 氧化反应进程。当加入浓度从 100 至 400 μmol/L
的化合物Ⅱ时，TBARS 吸光度曲线与空白实验相比
有所降低，但走向与空白实验基本相同，说明化合
物Ⅱ不能影响小分子羰基化合物的生成，即化合物
Ⅱ不具有抑制 AAPH 引发的 DNA 氧化反应的活性。
当加入化合物Ⅰ后，使 TBARS 的曲线在反应开始
阶段升速变慢，表明化合物Ⅰ能够抑制 DNA 的氧化
反应，并产生一段抑制期（t inh ），说明羟基在此发挥
了抗氧化作用，这一点符合传统“酚羟基是抗氧化
官能团”的结论 [23] 。如图 1 所示，将 TBARS 吸光
图 2 抑制期(t inh )与化合物Ⅰ浓度之间的关系
度曲线的抑制阶段和增长阶段分别做切线，两切线
Fig. 2 Relationships between t inh and concentrations of
交点所对应的时间即是抑制期（t inh ）。 compound Ⅰ

由于 DNA 为钠盐，溶于水相，AAPH 亦可溶于
水，产生的过氧自由基将在水相中氧化 DNA，因此，
可以假定 AAPH 分解产生自由基的速率 R g 〔R g =
6
(1.4±0.2)×10 c(AAPH)/t〕等于自由基引发 DNA 氧
6
化反应的速率 R i ，即 R i =R g =(1.4±0.2)×10 c(AAPH)/
t，已知 AAPH 的起始浓度为 40 mmol/L，所以 R i =R g =
6
(1.4±0.2)×10 ×40 mmol/(Ls)3.36 mol/(Lmin) [25] 。
式（2）中，n 为抗氧化剂的有效计量因子，表示单
个抗氧化分子中断自由基链传递的数量，在化学体
系内可以认为是单个抗氧化分子淬灭自由基的数
量，是衡量抗氧化剂抗氧化能力的一个重要定量参
数，n 值越大，抗氧化性能越好。n 的测定一般是采
用一个标准的抗氧化剂，如：Trolox 或维生素 E，
它们的 n 为 2.0，即每个 Trolox 分子或维生素 E 分
子能够捕获 2 个自由基，将上述标准抗氧化剂加入
到 AAPH 引发的氧化反应体系中后，测定 R i ，再用
所得到的 R i 标度其他抗氧化剂的 n。因此，n 是一
个相对于 Trolox 或维生素 E 能够捕获 2 个自由基的

图 1 不同浓度化合物Ⅰ、Ⅱ TBARS 吸光度随时间的变 相对数值。也曾将 Trolox 用于抑制 AAPH 引发的
化曲线 DNA 氧化反应中，但是 Trolox 不能产生抑制期。因
Fig. 1 The variation of the absorbance of TBARS in various 此，在无法得到 R i 的情况下作上述假定，所得到的
concentrations compounds Ⅰ and Ⅱ
数值具有相对比较意义，而不能就其绝对值讨论其
以抑制期（t inh ）为纵坐标，以化合物浓度为横 意义。经过对比可以发现，式（1）与式（2）在形
坐标作图，得到 t inh -c(Ⅰ)关系曲线，如图 2 所示。 式上非常接近，即式（1）的斜率就是式（2）的 n/R i ，
由图 2 可知，化合物(Ⅰ)的浓度与抑制期（t inh ） 在假定了 R i =R g =(1.4±0.2)× 10 ×40 mmol/(Ls)3.36
6
之间存在线性关系，通过线性拟合的方式得出化合 mol/(Lmin)之后，抗氧化剂的有效计量因子 n=方
物(Ⅰ)抑制期（t inh ）与浓度之间关系，见式（1）。 程式的斜率×R i 。这样就可以计算出化合物Ⅰ的 n 值，
t inh = (0.48 ± 0.02)c(Ⅰ) + (8.55 ± 0.43) （1） 为 1.61，表示每个分子能够平均捕获 1.61 个自由基。
此前有关化学动力学的研究曾报道 [24] ，抗氧化 2.2.2 香豆素抑制 HO•和 GS•引发的 DNA 氧化反应
剂产生的抑制期（t inh ）与浓度呈线性关系，即如式 体系分析结果
（2）所示： 空白实验和加入化合物后的吸光度值分别为
（2） A blank 和 A detect ，以 A blank 为 100%，化合物的抗氧化
t inh =(n/R i )c antioxidant