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·1164· 精细化工 FINE CHEMICALS 第 36 卷
能力以 A detect /A blank ×100%来表示。重复上述实验 3 其孤对电子被配对并产生无色产物,导致溶液在该
次,得到的平行数据(数据误差<10%)求平均值, 处的吸收峰下降,吸光度值变小,故可利用分光光
之后以化合物相对空白 TBARS 吸光度作柱状图, 度法定量分析。由式(3)可以求出每个时刻自由基
如图 3 所示。 的浓度。
A = εbc (3)
式中:A 为吸光度值;ε 为摩尔消光系数,L/(molcm);
b 为吸收池的厚度,cm;c 为自由基的浓度,mol/L。
2.3.1 捕获 ABTS+•性能分析结果
以 ABTS+•浓度为纵坐标,反应时间为横坐标,
作浓度随时间的衰减曲线,如图 4 所示。
a—在抑制 HO•引发的 DNA 氧化反应体系中,两种化合物相对
空白 TBARS 吸光度;b—在抑制 GS•引发的 DNA 氧化反应体系
中,两种化合物相对于空白 TBARS 的吸光度
图 4 在两种化合物存在下,ABTS+•浓度随时间的衰减
图 3 化合物抑制 HO•和 GS•引发的 DNA 氧化反应体系 曲线
分析结果 Fig. 4 Decay of concentrations of ABTS+• in the presence
Fig. 3 The analysis results of compounds in inhibiting of two compounds
HO• and GS• induced oxidation of DNA
由图 3a 可知,在抑制 HO•引发的 DNA 氧化反 由图 4 可知,空白实验中,随着反应时间的增
长,ABTS+•浓度始终不变,当加入浓度为 50 μmol/L
应体系中,2 个化合物相对空白 TBARS 吸光度均低
的香豆素化合物Ⅰ和Ⅱ后,ABTS+•浓度随反应时间
于 100%,表明化合物Ⅰ和化合物Ⅱ均具备抑制 HO•
引发 DNA 氧化反应的能力。在此,化合物Ⅱ展现了 的增长逐渐减小,说明香豆素化合物Ⅰ和Ⅱ能够提
抑制 HO•引发的 DNA 氧化反应的性能,说明 HO• 供电子与 ABTS+•孤对电子配对,从而展现捕获
与抗氧化剂的反应过程中,不仅仅是夺取抗氧化分 ABTS+•的能力。同时,对比发现,在加入化合物Ⅰ
子中酚羟基上的氢原子,同时可以进攻分子结构发 体系中,ABTS+•浓度随时间的衰减曲线明显低于含
生自由基加成反应,与抑制 AAPH 引发的 DNA 氧 有化合物Ⅱ的体系,说明化合物Ⅰ具有更强的捕获
化反应中的情况不同 [26] ,从而达到抑制 HO•引发的 ABTS+•的能力。主要原因是化合物Ⅰ分子中含有酚
DNA 氧化反应的作用。其中,化合物Ⅰ相对空白 羟基活性官能团,可以给氢原子与 ABTS+•孤对电
TBARS 吸光度小于化合物Ⅱ,说明化合物Ⅰ抑制 子配对,达到淬灭 ABTS+•的作用。
HO•引发 DNA 氧化反应的能力更强,即酚羟基是一 2.3.2 捕获 DPPH•性能分析结果
个有效的抗氧化官能团,有利于提高香豆素抑制 以 DPPH•浓度为纵坐标,反应时间为横坐标,
HO•引发 DNA 氧化反应的能力。如图 3b 所示,在 作浓度随时间的衰减曲线,如图 5 所示。
化合物Ⅰ和化合物Ⅱ抑制 GS•引发的 DNA 氧化反应 由图 5 可知,加入浓度为 100 μmol/L 的香豆素
中,所得实验结果与 HO•引发 DNA 的氧化反应体 化合物Ⅰ和Ⅱ后,DPPH•浓度随反应时间的增长逐
系相同,进一步证明酚羟基是有效的抗氧化官能团, 渐降低,说明香豆素化合物Ⅰ和Ⅱ也能够提供电子
有利于提高香豆素抑制 GS•引发 DNA 氧化反应的能 与 DPPH•孤对电子配对,展现捕获 DPPH•的能力。
力。 且在加入化合物Ⅰ体系中,DPPH•浓度随时间的衰
2.3 捕获自由基性能研究 减曲线明显低于含有化合物Ⅱ的体系,说明化合物
ABTS+•、DPPH•和 galvinoxyl 在乙醇溶液中分 Ⅰ具有更强的捕获 DPPH•的能力,与捕获 ABTS+•
别显紫红色、紫色和黄色,并在 734、517 和 428 nm 结果一致,说明化合物Ⅰ分子中酚羟基也可以给出
处有特征吸收,当这些自由基与抗氧化试剂反应时, H 原子与 DPPH•孤对电子配对,从而淬灭 DPPH•。