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·1098·                            精细化工   FINE CHEMICALS                                  第 36 卷

                 缺铁性贫血(IDA)已成为世界范围内常见的                         得到滤渣;将其置于通风处晾干后,按照质量比 1∶
            营养性疾病之一。然而,现有的口服铁补充剂通常                             16 加入双蒸水(自制),在 80  ℃提取 1.5 h          [15] ,5000
            会引起胃脘痛、腹泻、便秘             [1-3] 。另外,当铁摄入量           r/min 离心 10  min 收集上清液,重复提取 1 次,合
                                                                                     [6]
            高于机体所需量时,可能会对生命产生毒害作用。                             并两次上清液,Sevag 法 除去蛋白质,加入 3 倍体
            因此,寻找一种无毒副作用的新型补铁剂成为当前                             积的无水乙醇,醇沉过夜,离心,干燥后沉淀为螺
            的研究热点之一。                                           旋藻多糖,命名为 SP。
                 螺旋藻(Spriulina platensis)是拉丁美洲和非洲              1.2.2    螺旋藻多糖铁(Ⅲ)配合物制备
            国家的传统食品之一。许多研究表明,螺旋藻或其                                 称取 SP 200 mg,加入 100 mL 双蒸水溶解后,
            提取物能提高人体细胞免疫和体液免疫功能                     [4-5] ,对   加入 1 g 柠檬酸钠,70  ℃水浴搅拌,同时缓慢滴加
            人类或其他动物具有良好的抑癌效果                  [6-7] 。从螺旋藻      质量分数为 20%的 NaOH 水溶液和 2 mol/L FeCl 3 水
            中提取的螺旋藻多糖具有抗氧化、抗病毒、免疫、                             溶液,控制体系 pH 为 8~9       [16] 。当体系中恰好出现不
            抗炎和 DNA 修复等多种生物学活性               [8-10] 。          溶性红棕色沉淀物时,停止滴加上述 NaOH 水溶液
                 随着人们对多糖认识的不断深入,多糖的生物                          和 FeCl 3 水溶液,继续反应 1 h 后,5000 r/min 离心
            学活性已引起国内外研究学者的广泛关注,其来源                             10  min,收集棕红色上清液,加入 3 倍体积的无水
            广泛,是一种理想的保健食品之一。研究表明                     [11-12] ,  乙醇,醇沉静置过夜,离心收集沉淀,双蒸水溶解
            多糖铁(Ⅲ)配合物可有效发挥配合物的生物学活                             后,采用透析袋透析 48  h。减压浓缩,冷冻干燥得
            性。目前,国内外已对天然产物中多种多糖铁(Ⅲ)                            到螺旋藻多糖铁(Ⅲ)配合物,命名 SP-Fe(Ⅲ)。
            配合物的制备、结构及部分活性进行了研究,其可                             1.2.3    SP-Fe(Ⅲ)配合物含量测定
            作为补铁剂用于治疗 IDA,具有稳定性好、水溶性                           1.2.3.1    Fe(Ⅲ)含量标准曲线绘制

            强、高浓度下无毒副作用等优点                [13-14] 。目前,有关           参考肖雄    [17] 等的方法 ,略作修改。分别量取质
                                                                                          2+
            螺旋藻多糖铁(Ⅲ)配合物的研究尚鲜见报道。                              量浓度为 0.01 mg/L 的标准 Fe 溶液 0.5、1.0、1.5、
                 因此,本文以 FeCl 3 为原料,合成螺旋藻多糖                     2.0、2.5、3.0  mL 于带塞试管中,均加入质量分数
            铁(Ⅲ)配合物,对其理化性质及生物学活性进行                             为 10%  V C 和质量分数为 0.1%的邻菲啰啉水溶液各
            了分析,以期为新型补铁剂螺旋藻多糖铁(Ⅲ)配                             2.0 和 2.5 mL,充分混匀后,采用双蒸水补足反应
            合物的深度开发提供理论依据。                                     体系至 10 mL,在 37  ℃水浴反应 10 min 后,以 Fe         2+
                                                               质量浓度(g/L)为横坐标(x),510 nm 吸光度值为
            1    实验部分                                          纵坐标( y ), 得 到 Fe ( Ⅲ )标 准 曲 线为
                                                                                 2
                                                               y=0.1942x+0.0049,R =0.9914。
            1.1    材料、试剂与仪器
                                                               1.2.3.2    SP-Fe(Ⅲ)中 Fe(Ⅲ)质量分数测定
                 螺旋藻粉末由甘肃微藻工程技术研究中心提
                                                                   取 0.1 g/L( 1 )的 SP-Fe(Ⅲ)溶液 1 mL(V 1 ),
            供。无水乙醇、柠檬酸钠、FeCl 3 、邻菲啰啉、V C
                                                               加入质量分数为 10%的 V C 和 0.1%的邻菲啰啉水溶
            等均为市售 AR。DPPH·(色谱纯)、α-葡萄糖苷酶(优                      液各 2.0 和 2.5  mL,充分混匀后,采用双蒸水补足
            级纯)、对硝基苯-α-D-吡喃葡萄糖苷(PNPG,分析                        反应体系至 10 mL(V 2 ),在 37  ℃水浴反应 10 min
            纯)、透析袋(相对分子质量 1000)等均购自成都德                         后,510 nm 处测定吸光度值,代入标准曲线,计算
            思特生物技术有限公司。                                        SP-Fe(Ⅲ)中 Fe(Ⅲ)质量浓度  2 (g/L),按照以
                 PL-203  电子天平,瑞士 Mettler Toledo 仪器有            下公式计算 SP-Fe(Ⅲ)中 Fe(Ⅲ)的质量分数(w)。
            限公司;紫外-可见分光光度计,上海谱元仪器有限                                                    V
                                                                               w /%   22   100        (1)
                                                                                       V
            公司;TG/DTA 系列热重差热综合热分析仪,宁波                                                  11
            赛茵仪器有限公司;气相色谱-质谱联用仪,江苏天                            1.3    SP-Fe(Ⅲ)结构表征
            瑞仪器股份有限公司;Quanta  450 场发射扫描电子                          红外光谱:采用 KBr 压片法检测样品红外光谱。
            显微镜、Nicolet  iS50 红外光谱仪,美国 Thermo                  热重分析:称取 6mg SP 和 SP-Fe(Ⅲ)样品,在 25~
                                               3
            Scientific 科技公司;PANalytical X'Pert 粉末 X 射线         800 ℃内,以 10  ℃/min 速率升温,对样品进行热重
            衍射仪,荷兰 PANalytical 公司。                             分析。XRD 表征:将一定量样品进行 X 射线衍射扫
            1.2   方法                                           描,在 3~50内以 5()/min 的速率进行 X 射线衍
            1.2.1    螺旋藻多糖制备                                   射扫描,根据衍射角度与强度关系绘制 XRD 曲线。
                 准确称取 50 g 螺旋藻粉末,按照质量比 1∶60                    扫描电镜分析:将样品放于样品台上,置于真空喷
            加入体积分数为 90%的乙醇回流提取脱脂,过滤,                           镀仪内喷金镀导电层,  采用扫描电镜进行扫描。
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