Page 156 - 201907

·1402· 精细化工 FINE CHEMICALS 第 36 卷

efficacy; water-sensitive cosmetic; cosmetic materials

人体正常的皮肤颜色主要取决于皮肤中的黑色 酮纳米混悬液（ L -BLFnd）按照文献[15]自制；小鼠
[1]
素含量和分布 ，当黑色素增长过速或分布不均时， B16 黑素瘤细胞株，中国科学院上海细胞生物所；
[2]
会引起皮肤色素沉着，导致皮肤变黑或形成色斑 。 RPMI-1640 培养液、胎牛血清、胰蛋白酶，美国
长期以来，熊果苷（arbutin）作为美白功能因子被 Hyclone 公司；MTT 试剂盒，南京建成生物研究所；
广泛应用于护肤品行业，但其安全性正不断遭受质 β-熊果苷、Triton X-100、左旋多巴（L-DOPA）、二
疑 [3-6] 。2015 年，欧盟消费者安全科学委员会认为， 甲基亚砜（DMSO），AR，上海阿拉丁试剂有限公
在面霜中不超过 2%（占面霜总质量的百分数，下同） 司；磷酸缓冲液（PBS）、青霉素-链霉素溶液，AR，
[7]
的 α-熊果苷 ，以及面霜中不超过 7%的 β-熊果苷 [8] 杭州科易生物科技有限公司；甘油，宝洁化工有限
是安全的。因此，寻找安全性更好、美白效果更强， 公司；甲基异噻唑啉酮，托尔国际贸易有限公司；
并兼具其他护肤功能的新材料成为护肤品行业的研 液体石蜡，科耐欧贸易有限公司；丁二醇，日本
发热点。 Diacel 公司；肉豆蔻酸异丙酯、聚二甲基硅氧烷、
竹叶黄酮（Bamboo leaf flavone，BLF）是笔者 甘油硬脂酸酯、鲸蜡硬脂醇、EDTA 二钠、黄原胶，
科研团队于上世纪末创制的具有丰厚的文化底蕴、 成都嘉叶生物科技有限公司；蔗糖硬脂酸酯，上海
[9]
本土资源特色和自主知识产权的植物黄酮新产品 ， 翼菁实业有限公司。
其优良的生物学功效，如抗辐射、抑菌、清除自由 Corneometer CM825 皮肤水分含量测试仪、
基、抗氧化等 [10-12] 使其在防晒、美白、延缓衰老护 Tewameter TM300 水分经皮肤散失测试仪、MPA9-
肤品领域具有广阔的发展前景 [13] 。竹叶黄酮的主要
GL200 皮肤光泽度测试仪、MPA9-CL400 皮肤色差
功效成分为碳苷黄酮（flavone C-glycoside），特征
测试仪、Mexameter MX 18 皮肤黑色素和血红素测
性化合物包括荭草苷、异荭草苷、牡荆苷和异牡荆 试仪、MPA580 皮肤弹性测试仪，德国 CK 公司；
苷 [14] 。碳苷黄酮是指其糖基通过—C—C—键直接连
VISIA-CR 面部图像分析系统，美国 Canfield 公司；
接在黄酮母核上（通常在 A 环的 C 6 或 C 8 位），黄 HL-2B 数显恒流泵，上海嘉鹏科技有限公司；2695
酮母核结构如下所示。
分析型高效液相色谱仪，美国 Waters 公司；RE-52AA
旋转蒸发仪，上海亚荣生化仪器厂；冷冻干燥机，
德国 Christ 公司；Luna C 18 柱（250 mm×4.60 mm×
5 μm），美国 Phenomenex 公司；Eon 酶标仪，美国
BioTek 公司；Smart Cell 型二氧化碳培养箱，力康

笔者科研团队在前期研究 [15] 的基础上，进一步 生物医疗科技控股有限公司；SW-CJ-ZF 超净工作
提高竹叶黄酮制剂的纯度，使 4 个碳苷总量合计达 台，上海博迅实业有限公司；TDZS-WS 型离心机，
到 90%以上（记为 H -BLF）；以 H -BLF 为芯材，以芫 湖南湘仪离心机仪器有限公司；LDZX-50KBS 立式
根阴离子多糖（TP）为壁材，通过 ε-聚赖氨酸（ε-PL） 高压灭菌锅，上海申安医疗器械厂。
的离子桥联法形成纳米混悬液；并且在 γ-环糊精的 1.2 方法
包裹和保护下，进一步得到了高纯竹叶碳苷黄酮复 1.2.1 H -BLFnp 美白功效的体外实验
合纳米粒子的冻干粉（记为 H -BLFnp） [16] 。 1.2.1.1 小鼠 B16 黑素瘤细胞的培养及受试物暴露
本文采用体外培养的 B16 黑素瘤细胞模型评价 将阳性对照（β-熊果苷）、 L -BLFnd、 H -BLFnp
H -BLFnp 的美白作用，同时应用皮肤测试仪器，对 及其 3 种组成成分（ H -BLF、TP、ε-PL）分别溶于
人体皮肤含水量、经皮水分散失量、光泽度、明亮 RPMI-1640 培养液中，设置其质量浓度分别为 12.5、
度、黑色素含量、皮肤弹性等生理指标进行测定， 25、50、100 mg/L，经 0.22 μm 水相滤膜过滤灭菌后
考察 H -BLFnp 在保湿、美白、延缓衰老方面的生物 备用。在实验部分，β-arbutin 表示 β-熊果苷； H -BLFnp
学功效，以期为日化行业提供一种成分天然、工艺绿 表示高纯竹叶碳苷黄酮复合纳米材料； H -BLF 表示
色、产品安全，并同时具有保湿、美白、抗衰老等多 高纯竹叶碳苷黄酮；ε-PL 表示 ε-聚赖氨酸；TP 表
重生物学功效的新型护肤功能成分。 示芫根多糖； L -BLFnd 表示低精度竹叶黄酮纳米混

悬液。
1 实验部分
用含 10%体积分数胎牛血清的 RPMI-1640 培养
1.1 试剂与仪器 液在 37 ℃、体积分数 5% CO 2 条件下培养 B16 细胞。
H -BLFnp 按照专利文献[16]自制；低精度竹叶黄 待细胞生长至接近融合状态时，经质量分数为