Page 155 - 《精细化工》2020年 第10期

第 10 期 张晓攀，等: EZH2 甲基转移酶抑制剂的设计、合成及其抑制活性
1.2.1 化合物Ⅲ的合成
向 250 mL 反应瓶中依次加入化合物Ⅱ 5.34 g
（30 mmol）、KOH 1.68 g（30 mmol）、甲醇（60 mL），
室温下搅拌 10 min。将反应液降温至 0 ℃搅拌逐滴
滴加化合物Ⅰ5.40 g（33 mmol），滴加完毕升至室温
反应 2 h。反应结束后将反应液浓缩，水洗，二氯甲
烷萃取（3×30 mL），收集有机相用无水硫酸钠干燥
后减压浓缩。硅胶柱层析分离〔V(石油醚)∶V(乙酸
乙酯)=20∶1〕，得到无色油状物 4-(1-苯基-1H-四氮
唑-5-硫甲基)-3-氧代丁酸乙酯（Ⅲ）8.31 g，产率
+
90.1%; ESI-MS [C 13 H 14 N 4 O 3 S+H] , m/Z：实测值（计 152.3, 133.5, 133.3, 132.1, 128.8, 128.7, 124.3, 106.9,
1
算值）：307.1 (307.1); HNMR (300 MHz, DMSO-d 6 ),
δ: 7.66 (s, 7H), 4.57 (s, 2H), 4.08 (q, J = 7.1 Hz, 2H),
13
3.82 (s, 2H), 1.17 (t, J = 7.1 Hz, 3H)； CNMR (125
MHz, DMSO-d 6 ), δ: 197.7, 168.3, 157.1, 132.1, 124.3,
128.7, 61.0, 47.7, 44.7, 15.1。
1.2.2 化合物Ⅳ的合成
向 250 mL 反应瓶中依次加入 100 mL 乙醇，搅
拌下将化合物Ⅲ 4.50 g（14.7 mmol）溶解，室温下
一次性加入盐酸胍 2.82 g（ 29.4 mmol），滴加
CH 3 ONa 1.59 g（29.4 mmol）的 30 mL 乙醇悬浊液，
滴加完毕升温至 75 ℃，回流反应 8 h。将得到的反
应液减压浓缩，用浓度为 5 mol/L 的盐酸溶液调节
pH 至 8 左右。二氯甲烷萃取（3×60 mL），收集有
机相用无水硫酸钠干燥后减压浓缩得粗品。粗品用
乙腈重结 晶 得黄色固 体 化合物 4- 羟基 -6-(1- 苯 8.19~8.06 (m, 1H), 8.00~7.88 (m, 1H), 7.65 (s, 6H),
基-1H-四氮唑-5-硫甲基)-2-嘧啶胺（Ⅳ）6.32 g，产
+
率 71.2%; ESI-MS [C 12 H 11 N 7 OS+H] , m/Z：实测值（计
1
算值）：302.1 (302.2); HNMR (500 MHz, DMSO-d 6)，
δ: 10.80 (s, 1H), 7.66 (s, 5H), 6.63 (s, 2H), 5.66 (s,
13
1H), 4.25 (s,2H); CNMR (125 MHz, DMSO-d 6 ), δ:
167.3, 155.1, 153.3, 134.1, 128.9, 124.3, 108.7, 42.8。
1.2.3 化合物Ⅴa~Ⅴf 的合成
以化合物Ⅴa 的合成为例。
向 250 mL 反应瓶中加入 100 mL 二氯甲烷，搅
拌下将化合物Ⅳ 0.30 g（1 mmol）溶解，滴加三乙
胺 0.5 mL（3.3 mmol），反应降至 0 ℃，搅拌 10 min。
0 ℃下滴加溶解苯甲酰氯 0.18 g（1.3 mmol）的二氯
·2085·
甲烷溶液 5 mL。滴加完毕撤去冰浴，25 ℃反应 2 h。
反应结束后加水洗涤，二氯甲烷萃取（3×50 mL），
有机相用无水硫酸钠干燥后减压浓缩。硅胶柱层析
分离，流动相为石油醚和乙酸乙酯的混合物（体积
比 3∶1），得到白色固体 N-[4-羟基-6-(1-苯基-1H-
四氮唑-5-硫甲基)-2-嘧啶]-苯甲酰胺（Ⅴa），产率
+
72%; ESI-MS [C 19 H 15 N 7 O 2 S+H] , m/Z：实测值（计算
1
值）：406.1 (406.2); HNMR (500 MHz, CDCl 3 ), δ:
8.19 (d, J = 7.3 Hz, 2H), 7.68 (t, J = 7.4 Hz, 1H),
7.64~7.51 (m, 7H), 6.83 (s, 1H), 4.60 (s, 2H);
13
CNMR (125 MHz, DMSO-d 6 ), δ: 167.8, 155.2, 154.5,
42.6。
用同样的方法制备了化合物Ⅴb~Ⅴf。
N-[4-羟基-6-(1-苯基-1H-四氮唑-5-硫甲基)-2-嘧
啶]-4-氯甲基苯甲酰胺（Ⅴb）为黄色固体，产率 58%;
+
ESI-MS [C 20 H 16 ClN 7 O 2 S+H] , m/Z：实测值（计算
1
值）：454.1 (454.2); HNMR (500 MHz, DMSO-d 6 ), δ:
8.10 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 7.67 (d, J = 6.5 Hz, 7H), 7.13
(s, 2H), 6.68 (s, 1H), 4.89 (s, 2H), 4.58 (s, 2H)；
13 CNMR (125 MHz, DMSO-d 6), δ: 166.7, 155.3, 153.4,
152.1, 143.2, 133.2, 128.7, 127.7, 124.3, 46.2, 42.7。
N-[4-羟基-6-(1-苯基-1H-四氮唑-5-硫甲基)-2-嘧
啶]-3,4-二氯苯甲酰胺（Ⅴc）为黄色固体，产率 77%;
ESI-MS [C 19 H 13 Cl 2 N 7 O 2 S+H] , m/Z：实测值（计算
+
值）：474.2 (474.3); HNMR (300 MHz, DMSO-d 6 ), δ:
1
13
7.15 (s, 2H), 6.66 (s, 1H), 4.56 (s, 2H); CNMR
(125 MHz, DMSO-d 6 ), δ: 166.9, 155.3, 153.8, 152.3,
136.8, 133.7, 133.5, 133.1, 130.3, 128.9, 128.7, 128.2,
124.3, 42.9。
N-[4-羟基-6-(1-苯基-1H-四氮唑-5-硫甲基)-2-嘧
啶]-2,4-二氯-5-氟苯甲酰胺（Ⅴd）为黄色固体，产
+
率 83%; ESI-MS [C 19 H 12 Cl 2 FN 7 O 2 S+H] , m/Z：实测
1
值（计算值）：492.1 (492.3); HNMR (300 MHz,
DMSO-d 6 ), δ: 8.14 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 8.10 (d, J =
6.7 Hz, 1H), 7.66 (s, 5H), 7.19 (s, 2H), 6.69 (s, 1H),
13
4.57 (s, 2H); CNMR (125 MHz, DMSO-d 6 ), δ: 166.9,
163.1, 155.1, 153.8, 152.3, 135.1, 133.1, 130.9, 128.8,
124.3, 118.8, 115.1, 106.9, 42.6。