Page 121 - 《精细化工》2020年第11期
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第 11 期                     苏   文，等:  柠檬提取液生物合成纳米硒及其抗氧化性                                 ·2267·


            间范围窄，限制了传统硒化合物的应用                    [5-6] 。硒纳     公司；Zetasizer NANO-ZS90 粒径分析仪，美国康塔
                                                    [8]
                                          [7]
            米粒子的合成方法包括：物理法 、化学法 、生                             仪器公司；KH2200DE 型数据超声波清洗器，昆山
                 [9]
            物法 。物理法简单快捷，但对设备要求较高、产                             禾创超声仪器有限公司；FD-1D-50 冷冻干燥机，北
            物纯度低、粒度不易控制；化学法原料易得、操作                             京博医康实验室仪器有限公司；H1850 台式高速离
            方便，能够在原子或分子水平上进行反应，易实现                             心机，湖南湘仪实验室仪器开发有限公司；DW-HL-
            尺寸、形状和晶型的可控合成，但化学法工艺复杂，                            328 超低温冷冻储存箱，中科美菱低温科技有限责
            成本高昂，并且会产生有害有毒副产物，影响生态                             任公司；Tescan VEGA-3 SBH 扫描电子显微镜，泰
            环境和人体健康。因此，生物法合成纳米硒更受                              思肯有限公司。
            关注   [10] 。                                        1.2   实验方法
                 生物法包括微生物法         [11] 和植物法  [12] ，但微生物       1.2.1    纳米硒的制备
            法合成纳米硒条件较苛刻，需要严格控制 pH、温度                               柠檬洗净去皮，称量 10 g 柠檬果肉，置于烧杯
            等培养条件，植物法合成纳米硒避免了微生物培养                             中，加入 50 mL 去离子水，料液比（g∶mL）为 1∶
            的复杂过程，而且所得纳米硒具有典型的生物合成产                            5，在 60  ℃的水浴锅中浸提 30 min，在 8000 r/min
            物特性，例如生物相容性、抗菌、抗癌等，因此，植                            下离心 10 min 后，清液用孔径 0.45 μm 微滤膜过滤，
            物生物分子介导的纳米硒生物合成更具吸引力                      [13] ，   放冰箱冷藏备用。
            相关研究已有报道         [14-17] 。YE 等 [18] 利用绿茶纳米聚            将 10 mL 柠檬提取液与 10 mL 50 mmol/L 的亚硒
            集体为模板，抗坏血酸还原 Na 2 SeO 3 制备了纳米硒，                    酸溶液混合，超声 10 min 后，室温下磁力搅拌 50 min，
            通过控制绿茶纳米聚集体浓度和反应溶液比，制备                             观察混合物反应颜色变化，利用 UV-Vis 跟踪纳米硒
            出直径 50 nm 的红色球形纳米硒。LIANG 等              [19] 用圣    的形成，反应结束后，对反应混合液进行离心，分
            罗勒（Ocimum tenuiflorum）叶子提取液与亚硒酸钠                   离上清液，将得到的纳米硒粒子用纯净水清洗 3 遍，
            溶液反应得到了 15~20 nm 的球状纳米硒粒子。但这                       最后冷冻干燥 48 h，即得纳米硒粒子。
            些研究仅局限于对纳米硒生物合成工艺的研究和对                             1.2.2    料液比对纳米硒合成的影响
            产物结构的表征，未对体外抗氧化性进行测试，缺                                 在 pH=10，反应时间 1  h 条件下，不同料液比
            少对柠檬提取液合成纳米硒机理的探究。                                 （g∶mL，下同）（1∶1、1∶5、1∶10、1∶20）柠
                                                               檬提取液制备纳米硒按 1.2.1 节方法，对不同料液比
                 本文拟采用柠檬提取液为原料，利用其中所含
                                                               下得到的纳米硒进行 UV-Vis 分析。
            丰富的多酚、黄酮、V C 等还原性物质与亚硒酸反应
                                                               1.2.3    pH 对纳米硒合成的影响
            合成纳米硒，利用 UV-Vis、XRD、SEM、粒径仪、
                                                                   纳米硒制备方法如 1.2.1 所述，反应时间 1 h。
            FTIR 对所制备的纳米硒结构和性能进行表征，对其
                                                               不同的是取 3  份 10 mL 柠檬提取液（料液比为 1∶5）
            抗氧化性进行检测，并对合成机理进行探索，旨在
                                                               分别与 10 mL 的亚硒酸溶液（50 mmol/L）在室温下
            为植物法合成纳米硒提供理论指导。
                                                               混合，一份不加氨水，另外 2 份用氨水分别调节 pH
            1   实验部分                                           为 6 和 10，反应过程取样液观察颜色变化，并借助
                                                               UV-Vis 的吸收峰位置和吸收强度确定最合适 pH。
            1.1   试剂与仪器                                        1.3   结构表征与抗氧化性检测
                 柠檬，市售；亚硒酸（用 SeO 2 配制）；SeO 2 ，                 1.3.1    UV-Vis 分析
            AR，阿拉丁化学试剂有限公司；氨水（质量分数                                 采用 UV-Vis 对合成的纳米硒形成过程与形态
            25%），AR，天津市天力化学试剂有限公司；FeSO 4 ，                     进行追踪，用 0.5 cm×1.0 cm 石英比色皿装样，扫描
            AR，天津市红岩化学试剂有限公司；浓盐酸（质量                            步长 1 nm。
            分数 36%），AR，北京化工厂；无水乙醇、三羟甲                          1.3.2    XRD 分析
            基氨基甲烷（Tris）、邻苯三酚、双氧水（质量分数                              采用 XRD 对纳米硒组成及结构进行分析，以
            35%）、乙酸乙酯，AR，天津市科密欧化学试剂有                           CuK ɑ 射线为辐射源（λ=0.154 nm），在电流为 50 mA，
            限公司；抗坏血酸，AR，北京奥博星生物技术有限                            电压 40 kV 的条件下扫描。
            责任公司；1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）、水                       1.3.3    SEM 分析
            杨酸，AR，天津市凯通化学试剂有限公司。                                   利用 SEM 观察纳米硒颗粒的大小、形貌和分散
                 Lambda 25 型紫外-可见分光光度计，珀金埃尔                    性，用乙醇分散纳米硒制样。
            默仪器有限公司；D8  Advance 型 X 射线衍射仪、                     1.3.4    粒径分析
            Vector-22 型傅里叶变换红外光谱仪，德国 Bruker                        纳米硒加入超纯水后超声分散上样测试。设定预
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